一种CSFV的IPMA抗体检测方法技术

本发明专利技术公开了一种CSFV的IPMA抗体检测方法，属于生物技术领域。本发明专利技术公开的一种CSFV的IPMA抗体检测方法，包括接毒、铺板、固定、加一抗、加二抗、显色。本发明专利技术公开的一种CSFV的IPMA抗体检测方法，细胞反应板可提前制备，可在‑20℃长期保存；反应结果可用荧光显微镜进行观察；具有特异性强、敏感性高、操作简单、可长期保存的特点。IPMA方法利用活病毒接种，使用的是全病毒，抗原结构更加完整，结果更具有准确性和代表性。

【技术实现步骤摘要】
一种CSFV的IPMA抗体检测方法
本专利技术涉及生物
，更具体的说是涉及一种CSFV的IPMA抗体检测方法。
技术介绍
猪瘟(ClassicalSwineFever)，早期称猪霍乱(HogCholera,HC)，是由猪瘟病毒(ClassicalSwineFeverVirus,CSFV)引起猪的一种急性、热性和高度接触性传染病，其特征为高热稽留和全身广泛性出血。猪瘟的发病率和死亡率都很高，主要分为急性型、亚急性型、慢性型、非典型猪瘟或温和型猪瘟，给全世界养猪产业造成巨大的经济损失。其在世界各地均有不同程度的流行，我国将此病列为一类动物疾病，世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病。猪瘟病毒(CSFV)属于黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)，是RNA病毒，具有感染性。在自然条件下，猪还可能感染与猪瘟病毒(CSFV)同属的牛病毒性腹泻病毒(BovineViralDiarrheaVirus，BVDV)和绵羊边界病病毒(BorderdiseaseVirus，BDV)，但是CSFV却只对猪有致病性。虽然本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种CSFV的IPMA抗体检测方法，其特征在于，具体步骤如下：/n(1)接毒：细胞瓶内PK15细胞长至50-70％时，将100个TCID

【技术特征摘要】
1.一种CSFV的IPMA抗体检测方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)接毒：细胞瓶内PK15细胞长至50-70％时，将100个TCID50的CSFV病毒液接种到PK15细胞上，加入2％的DMEM培养基进行培养；
(2)铺板：细胞长满后将其铺到96孔板内，每孔接种100μL，置于CO2培养箱中继续培养36h，观察细胞生长情况，待细胞长满后，取出96孔板；同时设立不接毒正常细胞对照孔；
(3)固定：把取出的96孔板用PBS冲洗2-3次，用预冷的无水乙醇于-20℃固定30min，细胞反应板制备成功；
(4)加一抗：把细胞反应板用PBS洗过2-3次，加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：王利平，李鹏，刘兴友，孙国鹏，岳锋，王选年，陈磊山，李红，张艳芳，刘长忠，朱艳平，郭东光，
申请(专利权)人：新乡学院，
类型：发明
国别省市：河南;41