一种乳酸肠球菌、预防或治疗肿瘤的药物及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种乳酸肠球菌、预防或治疗肿瘤的药物及应用，涉及生物医药技术领域。本发明专利技术分离筛选出一种新的乳酸肠球菌，该乳酸肠球菌对癌症病人肿瘤免疫治疗的效果具有重要的影响。肠道微生物与免疫细胞之间能相互作用，共同调控人的免疫系统。研究表明，本发明专利技术提供的乳酸肠球菌可以诱导iDC(immature DC)细胞分化成熟，成熟DC能有效激活T细胞与增加具备抗肿瘤活性的肿瘤内浸润淋巴细胞的浸橍，从而杀伤肿瘤细胞；此外，本发明专利技术提供的乳酸肠球菌可以诱导M0型巨噬细胞向M1或M2型细胞的分化。本发明专利技术提供的乳酸肠球菌可以用于制备肿瘤抑制剂及相应的药物，从而实现肿瘤预防或治疗及逆转肿瘤免疫疗法未应答之需求。

【技术实现步骤摘要】
一种乳酸肠球菌、预防或治疗肿瘤的药物及应用
本专利技术涉及医药生物
，具体而言，涉及一种乳酸肠球菌、预防或治疗肿瘤的药物及应用。
技术介绍
在肿瘤治疗领域，肿瘤逃逸是目前肿瘤免疫治疗公认的障碍，患者肿瘤细胞自身的缺陷和免疫系统的功能障碍一起作用促进了肿瘤的疯狂生长。PD-1/PD-L1免疫疗法(immunotherapy)是当前全世界备受瞩目、广为研究的新一类抗癌免疫疗法，旨在充分利用人体自身的免疫系统抵御、抗击癌症，通过阻断PD-1/PD-L1信号通路使癌细胞死亡，具有治疗多种类型肿瘤的潜力，实质性改善患者总生存期。目前，上述的免疫治疗存在一定的副作用及治疗失败等问题，而引入微生物进行辅助传统免疫疗法进行治疗，不失为一种全新的治疗干预手段。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种乳酸肠球菌、预防或治疗肿瘤的药物及应用以解决上述技术问题。基于现有的技术问题，本专利技术分离筛选出一株乳酸肠球菌，该乳酸肠球菌可以抑制肿瘤的生长速度，可以用于肿瘤的预防和治疗。此外，该乳酸肠球菌还可以与其他的肿瘤抑制剂联合使用。本专利技术是这样实现的：本专利技术提供了一种乳酸肠球菌在制备肿瘤抑制剂中的应用；所述肿瘤包括如下实体肿瘤中的至少一种：结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、肾癌、纤维肉瘤、肺癌和胆管癌。优选地，乳酸肠球菌在制备结肠直肠癌抑制剂中的应用。上述的乳酸肠球菌，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏名称为乳酸肠球菌(Enterococcusfaecium)MNC-168，保藏编号为GDMCCNO:61121。保藏时间为2020年8月5月，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省微生物研究所，分类名称为Enterococcusfaecium。在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述乳酸肠球菌的菌落培养特征为：在细菌培养基上，培养24h后菌落呈白色，圆形，表面湿润，不透明，边缘整齐；在显微镜下，菌体呈椭球状，0.7-1.0μm×0.8-1.3μm，单个或成对排列，革兰氏阳性；优选地，细菌培养基为MRS培养基。本专利技术还提供了一种预防或治疗肿瘤的药物，其包括乳酸肠球菌。在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述预防或治疗肿瘤的药物还包括药学上可接受的添加剂或辅料，优选地，药物组合物剂型选自片剂、丸剂、粉剂、混悬剂、凝胶、乳液、乳膏、颗粒剂、纳米颗粒、胶囊、栓剂、注射剂、喷雾和针剂。在其他实施方式中，上述预防或治疗肿瘤的药物的有效成分包括并不限于乳酸肠球菌，还可以包括其他的预防或治疗肿瘤的药物或抗体。乳酸肠球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏名称为乳酸肠球菌(Enterococcusfaecium)MNC-168，保藏编号为GDMCCNO:61121。本专利技术还提供了一种药物组合物，其包括上述的预防或治疗肿瘤的药物。可选的，上述药物组合物还包括联用药物，联用药物为如下药物中的至少一种：化疗药物，光敏剂，光热剂，抑制性第二信号分子的抗体、抑制性第二信号分子的抑制剂、PD-L1抑制剂、PD-1/PD-L1单抗药物。在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述抑制性第二信号分子包括如下信号分子中的至少一种：PD-1和CTLA-4。在其他实施方式中，上述抑制性第二信号分子可以是PD-1；CTLA-4；PD-1和CTLA-4。上述抑制性第二信号分子是指抑制免疫反应的信号分子。在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述抑制性第二信号分子的抗体或抑制性第二信号分子的抑制剂包括如下抗体中的至少一种：尼伏单抗(nivolumab)、潘利珠单抗(pembrolizumab)、替雷利珠单抗(Tislelizumab)、纳武利尤单抗注射液(Opdivo)、帕博利珠单抗注射液(Keytruda)、特瑞普利单抗注射液(拓益JS001)和信迪利单抗注射液(达伯舒IBI308)。在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述PD-L1抑制剂选自度伐单抗(durvalumab)、阿替珠单抗(atezolizumab)或阿维单抗(avelumab)。在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述PD-1/PD-L1单抗药物选自帕博利珠单抗或纳武利尤单抗。在其他实施方式中，只要能抑制免疫反应的发生均可以与本专利技术提供的乳酸肠球菌配合进行联合肿瘤治疗。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术分离筛选出一种新的乳酸肠球菌，该乳酸肠球菌对癌症病人肿瘤免疫治疗的效果具有重要的影响。肠道微生物与免疫细胞之间能相互作用，共同调控人的免疫系统。研究表明，本专利技术提供的乳酸肠球菌可以诱导iDC(immatureDC)细胞分化成熟，成熟DC能有效激活T细胞，从而杀伤肿瘤细胞；此外，本专利技术提供的乳酸肠球菌可以诱导M0型巨噬细胞向M1或M2型细胞的分化，具体地，使得IL-1β，IL-23，TNFα的分泌量显著的增加。本专利技术提供的乳酸肠球菌可以用于制备肿瘤抑制剂及相应的药物，从而实现肿瘤预防或治疗。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为MNC-168在平板上的生长状况图；图2A为巨噬细胞和MNC-168在MOI(细菌：细胞)为10共培养后产生细胞因子IL-1β的变化；图2B为巨噬细胞和MNC-168在MOI(细菌：细胞)为10共培养后产生细胞因子IL-23的变化；图2C为巨噬细胞和MNC-168在MOI(细菌：细胞)为10共培养后产生细胞因子TNFα的变化；图3A为PrimaryPBMC和MNC-168在MOI(细菌：细胞)为1共培养后产生细胞因子IL-1β的变化；图3B为PrimaryPBMC和MNC-168在MOI(细菌：细胞)为1共培养后产生细胞因子CXCL9的变化；图4A为iDC细胞和MNC-168在MOI(细菌：细胞)为10共培养后产生细胞因子CXCL9的变化；图4B为iDC细胞和MNC-168在MOI(细菌：细胞)为10共培养后产生细胞因子IL-1β的变化；图5为MNC-168在模拟胃液中的存活曲线；图6为MNC-168在模拟肠液中的存活曲线；图7为MNC-168和PD-1抗体联用对结直肠癌(CT26)的抑制作用结果图；图8为MNC-168和PD-1抗体联用对结直肠癌(MC38)的预防和治疗作用结果图；图9为MNC-168逆转PD-1抗体未响应率；图10为MNC-168增加肿瘤內淋巴細胞浸润；图11为MNC-168在MRS培养基上划线培养24h后的图片；图12为MNC-168经过染色后在光学显微镜下的形态图；图13为MNC-168的电镜图；图1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种乳酸肠球菌在制备肿瘤抑制剂中的应用；所述肿瘤包括如下实体肿瘤中的至少一种：结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、肾癌、纤维肉瘤、肺癌和胆管癌。/n

【技术特征摘要】
20210119 CN 20211007229491.一种乳酸肠球菌在制备肿瘤抑制剂中的应用；所述肿瘤包括如下实体肿瘤中的至少一种：结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、肾癌、纤维肉瘤、肺癌和胆管癌。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述乳酸肠球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏名称为乳酸肠球菌(Enterococcusfaecium)MNC-168，保藏编号为GDMCCNO:61121；
优选地，所述乳酸肠球菌的菌落培养特征为：在细菌培养基上，培养24h后菌落呈白色，圆形，表面湿润，不透明，边缘整齐；在显微镜下，菌体呈椭球状，0.7-1.0μm×0.8-1.3μm，单个或成对排列，革兰氏阳性；
优选地，所述细菌培养基为MRS培养基。


3.一种预防或治疗肿瘤的药物，其特征在于，其包括乳酸肠球菌。


4.根据权利要求3所述的预防或治疗肿瘤的药物，其特征在于，所述预防或治疗肿瘤的药物还包括药学上可接受的添加剂或辅料，优选地，所述药物组合物剂型选自片剂、丸剂、粉剂、混悬剂、凝胶、乳液、乳膏、颗粒剂、纳米颗粒、胶囊、栓剂、注射剂、喷雾和针剂；
优选地，所述乳酸肠球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏名称为乳酸肠球菌(Enterococcusfaecium)MNC-168，保藏编号为GDMCCNO:61121。


5.一种药物组合物，其特征在于，其包括权利要求3-4任一项所述的预防或治疗...

【专利技术属性】
技术研发人员：李宝霞，林诠盛，蒋先芝，梁婕凝，刘真真，陈胜，苏雪，
申请(专利权)人：慕恩广州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44