一种微滴数字PCR分析耐除草剂转基因大豆ZH10-6拷贝数的方法技术

本发明专利技术公开了一种微滴数字PCR分析耐除草剂转基因大豆ZH10‑6拷贝数的方法，该方法以耐除草剂转基因大豆ZH10‑6的

【技术实现步骤摘要】
一种微滴数字PCR分析耐除草剂转基因大豆ZH10-6拷贝数的方法
本专利技术属于农业转基因生物安全评价
，特别是涉及一种基于微滴数字PCR技术分析耐除草剂基因大豆新品种拷贝数的方法构建及其应用。具体说是一种基于数字PCR的转基因大豆ZH10-6拷贝数分析方法，通过将体系溶液生成微滴，将PCR体系分配到足够小的反应单元中，实现每个反应单元只有单个模板分子，经PCR反应扩增后，由微滴读取器读取微滴并计算内外基因拷贝数浓度比值，实现精准检测转基因大豆ZH10-6外源插入基因拷贝数的方法构建及其应用。
技术介绍
转基因作物是指将非本身的外源目的片段转化到目标植株得到的新作物。以获得更好的性状或质量。例如利用转基因技术培育的耐除草剂等具有抗性、产量多、质量高的作物，给人们带来了巨大的经济效益。转基因技术在农业和食品行业中发挥的作用尤为重要。然而，许多人认为转基因食品是非自然的和人工的，因此不能对它们做出积极的反应。确保食品安全和质量的食品分析与所有国家都有密切关系，对转基因食品进行食品安全评价变得极其重要。表达载体、目的基因整合情况、外源插本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测转基因大豆ZH10-6的特异性引物及探针，其特征在于包括G2EPSPS外源插入目的基因序列：/n正向引物序列：5’- TCGAGATTGATGGTGGTTTGTC -3’/n反向引物序列：5’- TCAGCGCCACTTCAATCG -3’/n探针序列：FAM- CCAGTACGTATCGGCCCTGCTGATG -BHQ1；/nGAT外源插入目的基因序列：/n正向引物序列：5’- GGGCAAACTGATTTCCATAGCTT -3’/n反向引物序列：5’- CCTCGGAGCTGGTACTGTTTCT -3’/n探针序列：FAM- ATTCCACCAGGCCGAGCACTC...

【技术特征摘要】
1.一种用于检测转基因大豆ZH10-6的特异性引物及探针，其特征在于包括G2EPSPS外源插入目的基因序列：
正向引物序列：5’-TCGAGATTGATGGTGGTTTGTC-3’
反向引物序列：5’-TCAGCGCCACTTCAATCG-3’
探针序列：FAM-CCAGTACGTATCGGCCCTGCTGATG-BHQ1；
GAT外源插入目的基因序列：
正向引物序列：5’-GGGCAAACTGATTTCCATAGCTT-3’
反向引物序列：5’-CCTCGGAGCTGGTACTGTTTCT-3’
探针序列：FAM-ATTCCACCAGGCCGAGCACTCAGA-BHQ1；
3’端转化体特异性序列：
正向引物序列：5’-ACCTTCGGTTCCACCCTTGT-3’
反向引物序列：5’-AGGAACAAAAGGAAACAAAAAATAAT-3’
探针序列：FAM-TAGTTTCCGAGGCAGACACATCAGTT-BHQ1；
内源基因Lectin基因序列：
正向引物序列：5’-GCCCTCTACTCCACCCCCA-3’
反向引物序列：5’-GCCCATCTGCAAGCCTTTTT-3’
探针序列：FAM-AGCTTCGCCGCTTCCTTCAACTTCAC-BHQ1。


2.一种采用权利要求1所述用于检测转基因大豆ZH10-6的特异性引物及探针精准定量检测转基因耐除草剂大豆ZH10-6的方法，其特征在于如下步骤：
（1）G2EPSPS外源插入目的基因序列：
正向引物序列：5’-TCGAGATTGATGGTGGTTTGTC-3’
反向引物序列：5’-TCAGCGCCACTTCAATCG-3’
探针序列：FAM-CCAGTACGTATCGGCCCTGCTGATG-BHQ1；
GAT外源插入目的基因序列：
正向引物序列：5’-GGGCAAACTGATTTCCATAGCTT-3’
反向引物序列：5’-CCTCGGAGCTGGTACTGTTTCT-3’
探针序列：FAM-ATTCCAC...

【专利技术属性】
技术研发人员：王勃，郭勇，赵新，邱丽娟，刘双，袁珊，王成，兰青阔，王永，
申请(专利权)人：天津市农业科学院，中国农业科学院作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：天津;12