【技术实现步骤摘要】
一种检测碱性磷酸酶的复合荧光探针及其制备方法与应用
本专利技术属于荧光分析
,具体涉及一种检测碱性磷酸酶的复合荧光探针及其制备方法与应用。
技术介绍
碱性磷酸酶是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’-磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。其直接参加磷代谢,在钙、磷的消化、吸收、分泌及骨化过程中发挥着重要的作用。作为临床常规检测项目之一,碱性磷酸酶主要用于诊断肝脏和骨骼系统疾病。由于它在许多疾病的诊断中都可以作为重要的生物指标,如原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎、纤维性骨炎、骨软化病等疾病的检查。如果血清中ALP值不正常,会导致某些疾病的发生,例如,骨疾病、肝癌、乳腺癌、前列腺癌症和糖尿病。因此,开发一种快速、简便、灵敏的碱性磷酸酶检测方法具有重要的现实意义。近年来,已有多种方法用于碱性磷酸酶活性检测,包括比色法、荧光法、表面增强拉曼光谱法、电化学、化学发光方法等。在这些方法中,荧光法引起了人们相当大的关注,主要是 ...
【技术保护点】
1.一种检测碱性磷酸酶的复合荧光探针,其特征在于:所述荧光探针为硫量子点-MnO
【技术特征摘要】
1.一种检测碱性磷酸酶的复合荧光探针,其特征在于:所述荧光探针为硫量子点-MnO2-L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐复合荧光探针。
2.一种检测碱性磷酸酶的复合荧光荧光探针的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)硫量子点的合成:将硫粉、分散剂加入到碱性溶液中,制得混合液;超声反应,得硫纳米粒子溶液;将得到的硫纳米粒子溶液用透析袋除去杂质,得到黄色荧光硫量子点溶液;
(2)纳米MnO2的合成:十二烷基硫酸钠溶液、硫酸加入超纯水混合均匀制得混合溶液,水浴反应;随后,加入高锰酸钾溶液,继续反应,得到MnO2纳米片溶液;所合成的MnO2纳米片经超纯水洗涤、过滤,冷冻干燥,得到MnO2纳米片;
(3)配制L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐溶液:配制浓度为0.1M/L的L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐水溶液,4℃条件下保存;
(4)将硫量子点、MnO2纳米片和L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐加入缓冲溶液中,孵化,制得硫量子点-纳米MnO2-L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐复合荧光探针。
3.根据权利要求2所述的一种检测碱性磷酸酶的复合荧光荧光探针的制备方法,其特征在于:
所述步骤(1)中硫粉为升华硫、单质硫、斜方硫和硫磺粉中的一种;
所述步骤(1)中分散剂为β-环糊精;
所述步骤(1)中硫粉与分散剂的质量比为1.2-1.6:2.5-4.5;
所述步骤(1)中碱性溶液为氢氧化钠溶液,浓度为1-2mol/L;
所述步骤(1)中超声反应时间为2-4h。
4.根据权利要求3所述的一种检测碱性磷酸酶的复合荧光荧光探针的制备方法,其特征在于:
所述步骤(2)混合溶液中十二烷基硫酸钠和硫酸浓度比为7-10:0.04-0.06;
所述步骤(2)中水浴反应温度为75-95℃,反应时间为10-30min;
所述步骤(2)中高锰酸钾溶液的浓度为1-2mmol/L。
5.根据权利要求4所述的一种检测碱性磷酸酶的复合荧光荧光探针的制备方法,其特征在于:
所述步骤(4)中缓冲溶液为磷酸缓冲或Tris-HCl中的一种;
所述步骤(4)中缓冲溶液的pH为4-10;
所述步骤(4)中硫量子点、MnO2纳米片、L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐和缓冲溶液的体积比为1-2:2-2.5:2-5:100-500。
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【专利技术属性】
技术研发人员:卫艳丽,周羊羊,卫宇馨,王丽,董川,
申请(专利权)人:山西大学,
类型:发明
国别省市:山西;14
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