本实用新型专利技术涉及一种用于提取核酸的装置,其包含:第一容器,第二容器和第三容器,其中,第一容器包含第一密封试剂层、裂解液层和磁珠,并且,第一密封试剂层位于裂解液层上方,且磁珠位于裂解液层中;第二容器包含第二密封试剂层和核酸洗涤液层,并且,第二密封试剂层位于核酸洗涤液层上方;和第三容器包含第三密封试剂层和核酸洗脱液层,并且,第三密封试剂层位于核酸洗脱液层上方。
【技术实现步骤摘要】
一种用于提取核酸的装置
本专利技术涉及核酸提取领域,具体涉及一种用于提取核酸的装置、试剂盒和方法,所述用于提取核酸的装置、试剂盒和方法能够显著降低提取核酸过程中发生交叉污染的可能性。
技术介绍
目前,核酸的提取成为生物医药领域甚至农林牧渔等领域内所有学科进行科学研究的基础。而能否提取出高质量的核酸则是分子生物学试验中的关键,提取方法的灵敏度以及提取结果的准确性也将直接关系到后续试验。因此,核酸提取方法被不断的改进和完善。目前,核酸提取广泛应用的方法包括,经典的酚氯仿抽提法、新发展的硅胶膜吸附法、磁珠分离法等。基于大范围检测或同时对多个生物试样进行检测的需要,目前大多使用自动化装置进行核酸提取。然而,已发现,在使用自动化装置对多个样品进行核酸提取的过程中,样品间的交叉污染,仍然是显著的问题。因此,需要对用于提取核酸的方法和装置进行进一步改进,以避免或减少样品间的交叉污染。
技术实现思路
为了解决上述问题,本申请的专利技术人经过反复摸索,开发了一种用于提取核酸的试剂盒和装置,能够显著降低提取核酸过程中样品之间的交叉污染的可能性,减少或甚至杜绝假阳性的检测结果。基于此,本申请还提供了用于提取核酸的方法,提取过程简单方便,更适宜自动化操作。因此,在本申请的第一方面,提供了一种用于提取核酸的试剂盒,其中,所述试剂盒包含密封试剂和用于提取核酸的试剂,所述密封试剂在液体状态下的密度小于所述用于提取核酸的试剂的密度,并且,所述密封试剂在液体状态下与所述用于提取核酸的试剂不互溶。在某些实施方案中,所述密封试剂为液体,例如与水性溶液不互溶的液体,例如与水不互溶的有机物,例如与水不互溶的、不挥发的有机物。在某些实施方案中,所述密封试剂为固体,并且其在预定的条件下能够转变为液体,且所述液体的密度小于所述用于提取核酸的试剂的密度,并且所述液体与所述用于提取核酸的试剂不互溶(例如,其与水性溶液不互溶,且不挥发)。在某些实施方案中,所述预定的条件选自加热,光照和/或化学处理。例如,在某些实施方案中,所述密封试剂为固体,并且其在加热的条件下能够转变为液体,且所述液体的密度小于所述用于提取核酸的试剂的密度,并且所述液体与所述用于提取核酸的试剂不互溶(例如,其与水性溶液不互溶,且不挥发)。例如,在某些实施方案中,所述密封试剂在温度T1以下(包括T1)为固态,在温度T2以上(包括T2)为液态,T2>T1。由此,通过加热密封试剂,使其温度达到T2或以上,即可使固态的密封试剂液化,形成液态的密封试剂。而通过冷却密封试剂,使其温度达到T1或以下,即可使液态的密封试剂固化,形成固态的密封试剂。在某些实施方案中,T1=20~40℃,例如30~40℃。在某些实施方案中,T2=45~95℃,例如60~90℃,例如70~80℃。在某些实施方案中,所述密封试剂选自:矿物油,动物油,植物油,合成油,石蜡,硅油,或其任何组合。如本文中所使用的,术语“不互溶”是指两种或两种以上的液体置于同一容器时,彼此之间不会互相溶解,当它们接触时,会自发产生分界的界面,形成分层。如本文中所使用的,术语“分层”是指两种或两种以上不互溶的液体置于同一容器时,由于具有密度差,而自发形成上下分布的结构,密度大的液体下沉,密度小的液体上浮,形成分层。如本文中所使用的,本专利技术的密封试剂在液体状态下与用于提取核酸的试剂不互溶,且其密度小于用于提取核酸的试剂的密度。因此,当本专利技术的密封试剂在液体状态下与用于提取核酸的试剂处于同一容器中时,二者将形成分层结构,且,本专利技术的密封试剂将位于上层,隔离(即,密封)位于下层的用于提取核酸的试剂(以及其中可能包含的其他物质,例如核酸),既阻止下层试剂(以及其中可能包含的其他物质,例如核酸)逸散至外界环境,也阻止外界环境中的物质进入和污染下层。在本申请中,优选的是,核酸分子不能溶解于本专利技术的密封试剂中。由此,本专利技术的密封试剂能够更好发挥隔离作用。此外,可以理解的是,只要能够实现此功能的物质都可以作为本申请的密封试剂,因此,本申请的密封试剂并不局限于上述列举的物质。在某些实施方案中,所述用于提取核酸的试剂包括选自以下的一种或多种:裂解液(例如,细胞裂解液),核酸洗涤液,和核酸洗脱液。在某些优选的实施方案中,所述用于提取核酸的试剂包括,彼此分开放置的细胞裂解液,核酸洗涤液,和核酸洗脱液。如本文中所使用的,术语“用于提取核酸的试剂”是指在核酸提取过程中所用到的试剂。用于提取核酸的试剂通常包括裂解液、核酸洗涤液和核酸洗脱液。如本文中所使用的,术语“裂解液”是指使样品中的核酸游离于其中的溶液。此类裂解液是本领域技术人员所熟知的,并且可方便地配制或商购获得。在某些实施方案中,裂解液能够裂解细胞,使细胞中包含的核酸(例如,基因组DNA,质粒DNA,线粒体DNA,叶绿体DNA,总RNA,mRNA,tRNA,miRNA等)释放出来,并溶解/游离于裂解液中。在此类实施方案中,裂解液也称为细胞裂解液。如本文中所使用的,术语“核酸洗涤液”是指在核酸提取过程中,用于从包含核酸的体系中移除杂质(例如细胞碎片,蛋白质,多糖,质膜等)的溶液。此类核酸洗涤液是本领域技术人员所熟知的,并且可方便地配制或商购获得。在本文中,“核酸洗涤液”和“洗涤液”可互换使用。如本文中所使用的,术语“核酸洗脱液”是指在核酸提取过程中,用于从包含核酸的体系中分离出核酸的溶液,其能够溶解核酸,并且能稳定储存核酸。此类核酸洗脱液是本领域技术人员所熟知的,并且可方便地配制或商购获得。在本文中,“核酸洗脱液”和“洗脱液”可互换使用。本领域技术人员可以理解的是,可根据待提取核酸的样品的类型(例如细胞培养物、离体组织、体液等)、拟提取的核酸的类型(例如DNA,如基因组DNA,质粒DNA,线粒体DNA,叶绿体DNA等;或者RNA,如总RNA,mRNA,tRNA,miRNA等)、所使用的提取方法等因素,而对裂解液(例如,细胞裂解液),核酸洗涤液和核酸洗脱液的成分进行调整。并且,此类调整完全在本领域技术人员的能力范围之内。例如,当待提取的核酸为细胞培养物中的质粒DNA时,裂解液通常可包含裂解细胞的试剂(例如,SDS,TritonX-100,NP-40,异硫氰酸胍(GITC)等)和盐(例如,Tris,EDTA,NaCl等)。当待提取的核酸是基因组DNA时,裂解液通常还可包含十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。例如,常用的用于提取DNA的细胞裂解液配方可以为4M盐酸胍,50mMTris-HCl,10mMEDTA,15%TritonX100,pH6.5。常用的用于洗涤DNA的洗涤液可包括盐(例如,Tris,EDTA,NaCl等)和乙醇等。例如,常用的用于洗涤DNA的洗涤液配方可以为100mMNaCl,50mMTris-HCl(pH7.8),75%无水乙醇。常用的用于洗脱DNA的洗脱液可以为TE溶液或无菌水,其中,TE溶液通常是由Tris和EDTA配制而成的。例如,常用的用于洗脱DNA的洗脱液配方可以为10mMTris-HCl,1m本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于提取核酸的装置,其包含:第一容器(101),第二容器(102)和第三容器(103),其中,/n第一容器(101)包含第一密封试剂层(104)、裂解液层(105)和磁珠(106),并且,第一密封试剂层(104)位于裂解液层(105)上方,且磁珠(106)位于裂解液层(105)中;/n第二容器(102)包含第二密封试剂层(107)和核酸洗涤液层(108),并且,第二密封试剂层(107)位于核酸洗涤液层(108)上方;和/n第三容器(103)包含第三密封试剂层(109)和核酸洗脱液层(110),并且,第三密封试剂层(109)位于核酸洗脱液层(110)上方。/n
【技术特征摘要】
1.一种用于提取核酸的装置,其包含:第一容器(101),第二容器(102)和第三容器(103),其中,
第一容器(101)包含第一密封试剂层(104)、裂解液层(105)和磁珠(106),并且,第一密封试剂层(104)位于裂解液层(105)上方,且磁珠(106)位于裂解液层(105)中;
第二容器(102)包含第二密封试剂层(107)和核酸洗涤液层(108),并且,第二密封试剂层(107)位于核酸洗涤液层(108)上方;和
第三容器(103)包含第三密封试剂层(109)和核酸洗脱液层(110),并且,第三密封试剂层(109)位于核酸洗脱液层(110)上方。
2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员:占伟,胡陈超,郭玉淅,杨毅,曹甜甜,
申请(专利权)人:厦门致善生物科技股份有限公司,
类型:新型
国别省市:福建;35
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