【技术实现步骤摘要】
透明质酸检测试剂盒及检测系统
本专利技术涉及免疫检测
,特别是涉及一种透明质酸检测试剂盒及检测系统。
技术介绍
透明质酸(HyaluronicAcid,简称HA)是人体基质的主要成分之一,为具有O-β-D-葡萄糖醛酸基及N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖基为单位的双糖重复结构的一种粘多糖。HA主要由间质细胞合成,经淋巴循环入血液,由肝脏内皮细胞摄取,由特异的透明质酸酶水解,在体液中与蛋白质结合而存在,实际上属于糖蛋白的辅基。研究发现血清中透明质酸含量是反映肝内皮细胞功能,反映活动性纤维化,预测肝硬化的良好指标。对肝病患者而言,HA总体水平依据病损和病理改变程度表现为:肝硬化>慢性活动性肝炎>慢性迁延性肝炎>急性肝炎。HA作为反映肝细胞纤维化损害的指标,优于谷丙转氨酶(ALT)。对于透明质酸的分析检测主要有分光光度法、酶联免疫法、免疫荧光法、时间分辨法和化学发光法。目前市场上的透明质酸检测试剂盒主要利用免疫竞争进行检测(无论是酶联免疫还是化学发光免疫),具体步骤一般是:将待测样本加入到包被有透明质酸的微孔板中,再加入 ...
【技术保护点】
1.一种透明质酸检测试剂盒,其特征在于,包括:/n第一试剂,包括第一标记物标记的透明质酸结合物,所述透明质酸结合物包括明胶和透明质酸,所述透明质酸结合物中的明胶的平均分子量为50kDa~100kDa;/n第二试剂,包括透明质酸结合蛋白;/n第三试剂,包括第二标记物标记的透明质酸结合蛋白的抗体,所述第二标记物为化学发光标记物;及/n第四试剂,包括第三标记物标记的磁性微粒,所述第三标记物能够与所述第一标记物特异性结合。/n
【技术特征摘要】
1.一种透明质酸检测试剂盒,其特征在于,包括:
第一试剂,包括第一标记物标记的透明质酸结合物,所述透明质酸结合物包括明胶和透明质酸,所述透明质酸结合物中的明胶的平均分子量为50kDa~100kDa;
第二试剂,包括透明质酸结合蛋白;
第三试剂,包括第二标记物标记的透明质酸结合蛋白的抗体,所述第二标记物为化学发光标记物;及
第四试剂,包括第三标记物标记的磁性微粒,所述第三标记物能够与所述第一标记物特异性结合。
2.根据权利要求1所述的透明质酸检测试剂盒,其特征在于,所述第一试剂还包括无机盐、牛血清白蛋白、表面活性剂和Bis-Tris丙烷缓冲液,在所述第一试剂中,第一标记物标记的透明质酸结合物的质量、无机盐的质量、牛血清白蛋白的质量、表面活性剂的质量及Bis-Tris丙烷的摩尔量之比为(0.1mg~1mg):(4.385g~10g):(5g~50g):(0.2g~1g):(20mmol~400mmol);
所述第二试剂还包括无机盐、牛血清白蛋白、表面活性剂和Bis-Tris丙烷缓冲液,在所述第二试剂中,透明质酸结合蛋白的质量、无机盐的质量、牛血清白蛋白的质量、表面活性剂的质量及Bis-Tris丙烷的摩尔量之比为(0.1mg~4mg):(4.385g~10g):(5g~50g):(0.2g~1g):(20mmol~400mmol);
所述第三试剂还包括无机盐、牛血清白蛋白、表面活性剂和Bis-Tris丙烷缓冲液,在所述第三试剂中,第二标记物标记的透明质酸结合蛋白的抗体的质量、无机盐的质量、牛血清白蛋白的质量、表面活性剂的质量及Bis-Tris丙烷的摩尔量之比为(0.2mg~2mg):(4.385g~10g):(5g~50g):(0.2g~1g):(20mmol~400mmol)。
3.根据权利要求1或2所述的透明质酸检测试剂盒,其特征在于,所述透明质酸结合物中的透明质酸的平均分子量为2kDa~1500kDa。
4.根据权利要求2所述的透明质酸检测试剂盒,其特征在于,所述第一试剂中的无机盐、所述第二试剂中的无机盐和所述第三试剂中的无机盐分别独立地选自氯化钠和氯化钾中的至少一种;及/或,
所述第一试剂中的表面活性剂、所述第二试剂中的表面活性剂和所述第三试剂中的表面活性剂分别独立地选自吐温80、吐温20和TritonX-100中的至少一种;及/或,
所述化学发光标记物选自三联吡啶钌、金刚烷、鲁米诺、鲁米诺的衍生物、异鲁米诺、异鲁米诺的衍生物、吖啶酯、辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶。
5.根据权利要求2所述的透明质酸检测试剂盒,其特征在于,在所述第一试剂中,表面活性剂为吐温80,Bis-Tris丙烷与吐温80的质量之比为(5.6~564.5):1;
及/或,在所述第二试剂中,表面活性剂为吐温80,Bis-Tris丙烷与吐温80的质量之比为(5.6~564.5):1;
及/或,在所述第三试剂中,表面活性剂为吐温80,Bis-Tris丙烷与吐温80的质量之比为(5.6...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘先成,师丹丹,徐良,杨宁,曾映,王铮,
申请(专利权)人:深圳普门科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:广东;44
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