一种突变型丙酮酸氧化酶及其在2-丁酮酸代谢解毒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种突变型丙酮酸氧化酶及其在2‑丁酮酸代谢解毒中的应用，具体涉及一种利用该突变型丙酮酸氧化酶重构乙酸旁路途径增强细胞对2‑丁酮酸耐受性的方法，属于基因工程和微生物发酵技术领域。对丙酮酸氧化酶(PoxB)进行定点饱和突变得到PoxB

【技术实现步骤摘要】
一种突变型丙酮酸氧化酶及其在2-丁酮酸代谢解毒中的应用
本专利技术涉及一种突变型丙酮酸氧化酶及其在2-丁酮酸代谢解毒中的应用，具体涉及一种利用该突变型丙酮酸氧化酶重构乙酸旁路途径增强细胞对2-丁酮酸耐受性的方法，属于基因工程和微生物发酵

技术介绍
微生物细胞在其生活和生产过程中经常遭受细胞内有毒代谢产物和不利的环境因素的侵害，例如乙二醛，甲基乙二醛，松柏醛，糠醛等。2-丁酮酸(2-OBA)，也称为2-酮丁酸或α-酮丁酸，属于α-酮酸类的短链酮酸，结构接近丙酮酸。2-OBA是生物代谢必不可少的中间体，从细菌到人类的所有生物物种中都存在。然而，2-OBA在大多数微生物中的积累会导致严重的细胞毒性，包括生长停滞甚至死亡。在L-异亮氨酸，L-2-氨基丁酸，1-丙醇和1-丁醇等这些2-OBA衍生物的生物合成过程中，苏氨酸脱氨酶催化L-苏氨酸分解生成2-OBA，为了避免2-OBA的毒性积累，苏氨酸脱氨酶表达水平往往受到限制，这限制了下游生物合成代谢流量和目标产物生产率的提高。这种类型的生物毒性不仅阻碍发酵菌株的生长，而且阻碍了目标产物的生物合成。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种丙酮酸氧化酶PoxB

【技术特征摘要】
1.一种丙酮酸氧化酶PoxBF112W突变体，其特征在于，含有SEQIDNO.6所示的氨基酸序列。


2.编码权利要求1所述丙酮酸氧化酶PoxBF112W突变体的基因，其特征在于，核苷酸序列为SEQIDNO.7。


3.一种重组大肠杆菌，其特征在于，表达权利要求1所述的突变型丙酮酸氧化酶PoxBF112W或含有权利要求2所述基因。


4.根据权利要求3所述的重组大肠杆菌，其特征在于，以敲除了丙酮酸酯甲酸酯裂解酶和丙酮酸脱氢酶E1组件基因的大肠杆菌TWF105为宿主。


5.根据权利要求4所述的重组大肠杆菌，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王小元，方宇，张淑嫣，王建莉，胡晓清，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32