一种银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法技术

本发明专利技术涉及医药分析技术领域，具体涉及一种银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，该分离方法通过采用不同的吸附柱和洗脱液，以及制备型液相色谱柱和不同的流动相，能够分离出不同的黄酮类化合物，且各化合物纯度较高，可用做含量测定的对照品，也可用于银杏叶提取物及其制剂的质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法
本专利技术涉及医药分析
，尤其涉及一种银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法。
技术介绍
银杏叶提取物和舒血宁注射液中含有大量黄酮类成分，如槲皮素-3-O-(2”,6”-6-O-二鼠李糖)-鼠李糖葡萄糖苷、杨梅酮3-O-芸香糖苷、山柰酚-3-O-(2”,6”-6-O-二鼠李糖)-鼠李糖葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-(2”,6”-6-O-二鼠李糖)-鼠李糖葡萄糖苷等，种类繁多。这些黄酮类化合物对于银杏叶提取物以及舒血宁注射液等银杏叶提取物制剂的深入研究具有重要意义，然而其中有很多种黄酮类化合物难以购得，自行合成则需要大量人力、物力成本。现有技术中虽然有从银杏叶中分离得到多种化合物的方法，但得到的化合物种类有限，仍有些化合物尚无报道如何从银杏叶或其提取物中获得。
技术实现思路
针对一些黄酮类化合物难以购得、现有技术中尚未公开从银杏叶或其提取物中获得以上黄酮类成分的问题，本专利技术提供一种银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法。为达到上述专利技术目的，本专利技术实施例采用了如本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，其特征在于，所述分离方法包括以下步骤：/n将银杏叶提取物经过硅胶柱吸附，依次用5:1、3:1、2:1(v/v)的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，收集2:1(v/v)石油醚-乙酸乙酯洗脱流份。/n

【技术特征摘要】
1.一种银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，其特征在于，所述分离方法包括以下步骤：
将银杏叶提取物经过硅胶柱吸附，依次用5:1、3:1、2:1(v/v)的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，收集2:1(v/v)石油醚-乙酸乙酯洗脱流份。


2.根据权利要求1所述的银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，其特征在于，所述银杏叶提取物中总黄酮苷的含量≥24％；和/或
所述银杏叶提取物的制备方法为：将银杏叶粉碎，用49.5～50.5(v/v)％乙醇加热回流提取，合并提取液，浓缩后用大孔吸附树脂柱吸附，依次用水和15～85(v/v)％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，即得。


3.根据权利要求1或2所述的银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，其特征在于，所述分离方法还包括：取所述2:1(v/v)石油醚-乙酸乙酯洗脱流份，浓缩后用制备型HPLC色谱柱分离，流动相为8:1(v/v)乙酸乙酯-甲醇。


4.根据权利要求1或2所述的银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，其特征在于，所述分离方法还包括：取所述2:1(v/v)石油醚-乙酸乙酯洗脱流份，浓缩后用硅胶柱吸附，用5～6:1(v/v)的乙酸乙酯-甲醇进行洗脱，收集洗脱流份，标记为b1；和/或
所述分离方法还包括：取所述2:1(v/v)石油醚-乙酸乙酯洗脱流份，浓缩后用硅胶柱吸附，依次用5～6:1、8～10:1、4～5:2(v/v)的乙酸乙酯-甲醇进行梯度洗脱，收集4～5:2(v/v)乙酸乙酯-甲醇洗脱流份，标记为b3。


5.根据权利要求4所述的银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，其特征在于，所述分离方法还包括：
将所述b1浓缩后用SephadexLH-20柱吸附，用5:1(v/v)的甲醇-水进行洗脱，收集洗脱流份，标记为c1；和/或
将所述b1浓缩后用SephadexLH-20柱吸附，依次用5:1、9:1(v/v)的甲醇-水进行洗脱，收集9:1(v/v)甲醇-水洗脱流份，标记为c2；和/或
将所述b3用中压反相硅胶柱吸附，用9:1(v/v)的甲醇-水洗脱，收集洗脱流份，标记为d1；和/或
将所述b3用中压反相硅胶柱吸附，依次用9:1、8:1(v/v)的甲醇-水洗脱，收集8:1(v/v)甲醇-水洗脱流份，标记为d2；和/或
将所述b3用中压反相硅胶柱吸附，依次用9:1、8:1和3:1(v/v)的甲醇-水洗脱，收集3:1(v/v)甲醇-水洗脱流份，标记为d3。


6.根据权利要求5所述的银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，其特征在于，所述分离方法还包括将所述c1用制备型HPLC色谱柱分离，流动相为60:40(v/v)的甲醇-0.05％磷酸；和/或
所述分离方法还包括将所述c2用制备型HPLC色谱柱分离，流动相为97:3(v/v)的甲醇-0.1％三氟乙酸水；和/或
所述分离方法还包括将所述d1经制备型HPLC色谱柱分离，流动相为15:85(v/v)乙腈-水；和/或
所述分离方法还包括将所述d2经制备型HPLC色谱柱分离，流动相为80:20(v/v)甲醇-水；和/或
所述分离方法还包括将所述d3经制备型HPLC色谱柱分离，流动相为90:10(v/v)乙腈-水。


7.一种银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，其特征在于，所述化学成分为槲皮素-3-O-α-L鼠李糖-2”-(6”-p-香豆酰基)-β-D)葡萄糖苷和山柰酚-3-O-α-L鼠李糖-2”-(6”-p-香豆酰基)-β-D)葡萄糖苷；所述分离方法包括以下步骤：
将银杏叶提取物经过硅胶柱吸附，依次用5:1、3:1和2:1的石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，收集2:1(v/v)石油醚-乙酸乙酯洗脱流份，标记为A1；
将所述A1用制备型HPLC色谱柱分离，流动相为8:1(v/v)乙酸乙酯-甲醇，制备得到所述槲皮素-3-O-α-L鼠李糖-2”-(6”-p-香豆酰基)-β-D)葡萄糖苷和山柰酚-3-O-α-L鼠李糖-2”-(6”-p-香豆酰基)-β-D)葡萄糖苷。


8.根据权利要求7所述的银杏叶提取物中黄酮类化学成分的分离方法，其特征在于，所述银杏叶提取物中总黄酮苷的含量≥24％；和/或
所述银杏叶提取物的制备方法为：将银杏叶粉碎，用49.5～50.5(v/v)％乙醇加热回流提取，合并提取液，浓缩后用大孔吸附树脂柱吸附，依次用水和15～85(v/v)％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，即得。


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【专利技术属性】
技术研发人员：孙胜斌，李响明，杨琴，林珊，周永妍，王文鹏，王雪莲，姜国志，
申请(专利权)人：神威药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13