特异性结合SARS-CoV-2 Spike RBD 的单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术公开一种特异性结合SARS‑CoV‑2 Spike RBD的单克隆抗体，为SARS‑CoV‑2 Spike RBD/2E10；本发明专利技术还公开了包含ARS‑CoV‑2 Spike RBD/2E10和SARS‑CoV‑2 Spike RBD/6E2的单克隆抗体、包含SARS‑CoV‑2 Spike RBD/2E10和HRP‑SARS‑CoV‑2 Spike RBD/6E2的单克隆抗体；同时还公开了一种表达载体，以及所述单克隆抗体的应用。所述单克隆抗体，可结合并识别SARS‑CoV‑2 Spike RBD的多肽链，用于SARS‑CoV‑2 Spike RBD的检测及药物制备。

【技术实现步骤摘要】
特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体及其应用
本专利技术属于生物医学
，具体涉及特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体及其应用。
技术介绍
SARS-CoV-2Spikeprotein(S蛋白)是冠状病毒最重要的表面蛋白，与病毒的传染能力及发病机制等密切相关。S蛋白是一类很大的三聚体跨膜蛋白，可以被分成两个功能单位：S1和S2蛋白亚基。S1包含受体结合区域（receptorbindingdomain,RBD）部分，负责识别和结合细胞受体。研究发现冠状病毒人传人的特性是由衣壳表面棘突蛋白（S蛋白）与宿主细胞表面受体的相互作用实现的。因此，病毒S蛋白与受体表面的相互作用可以定量的评价病毒的传播能力。石正丽等报道SARS-CoV-2SpikeRBD与人体细胞表面的ACE2受体结合进入细胞。ACE2是人类的一个重要的细胞表面受体，广泛分布于人的心脏、肾脏、睾丸、胃肠道、大脑和肺内。S蛋白也是宿主中和抗体的重要作用位点，针对与SARS-CoV-2SpikeRBD抗体的研究不仅适用于新冠病毒的临床检测，还可应用于开发抗新冠病毒的药物。然而，目前尚未有SARS-CoV-2SpikeRBD浓度检测方法应用于相关疾病的临床诊断。
技术实现思路
针对现有技术的缺陷，本专利技术提供一种特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体及其在抗SARS-CoV-2SpikeRBD药物制备及检测中的应用。特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体，所述单克隆抗体为SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10识别并结合SARS-CoV-2SpikeRBD的多肽链；所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的重链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。编码所述单克隆抗体的基因，编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的轻链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.5所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的重链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.6所示。特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体，包含两种抗体，分别为SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2识别并结合SARS-CoV-2SpikeRBD的多肽链；所述SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.3所示，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的重链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.4所示；所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10采用上述单克隆抗体SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10。编码所述特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体的基因，所述单克隆抗体包含两种抗体，分别为SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的轻链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.5所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的重链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.6所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的轻链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.7所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的重链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.8所示。特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体，包含两种抗体，分别为SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和HRP-SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和HRP-SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2识别并结合SARS-CoV-2SpikeRBD的多肽链；所述HRP-SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2为HRP标记的SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2；所述SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.3所示，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的重链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.4所示；所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10采用上述单克隆抗体SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10。编码所述特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体的基因，所述单克隆抗体包含两种抗体，分别为SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和HRP-SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2，所述HRP-SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2为HRP标记的SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的轻链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.5所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的重链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.6所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的轻链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.7所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的重链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.8所示。一种表达载体，所述表达载体含有上述单克隆抗体中的基因序列SEQ.ID.NO.5、SEQ.ID.NO.6、SEQ.ID.NO.7和SEQ.ID.NO.8。所述单克隆抗体用于抗SARS-CoV-2的药物的制备的应用；优选地，所述单克隆抗体包含两种抗体，分别为SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2识别并结合SARS-CoV-2SpikeRBD的多肽链。所述单克隆抗体用于SARS-CoV-2SpikeRBD检测的应用；优选地，所述单克隆抗体包含两种抗体，分别为SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和HRP-SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和HRP-SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2识别并结合SARS-CoV-2SpikeRBD的多肽链；所述HRP-SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2为HRP标记的SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2。更优选地，所述单克隆抗体用于SARS-CoV-2SpikeRBD检测的应用，所述应用具体为SARS-CoV-2SpikeRBD诊断试剂的制备。本本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 特异性结合SARS-CoV-2 Spike RBD的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体为SARS-CoV-2 Spike RBD/2E10，所述SARS-CoV-2 Spike RBD/2E10识别并结合SARS-CoV-2Spike RBD的多肽链；所述SARS-CoV-2 Spike RBD/2E10的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述SARS-CoV-2 Spike RBD/2E10的重链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。/n

【技术特征摘要】
1.特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体为SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10识别并结合SARS-CoV-2SpikeRBD的多肽链；所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的重链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。


2.编码权利要求1所述单克隆抗体的基因，其特征在于：编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的轻链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.5所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的重链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.6所示。


3.特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体，其特征在于：包含两种抗体，分别为SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10和SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2识别并结合SARS-CoV-2SpikeRBD的多肽链；
所述SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.3所示，所述SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的重链可变区的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.4所示；
所述SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10采用权利要求1所述单克隆抗体。


4.编码权利要求3所述特异性结合SARS-CoV-2SpikeRBD的单克隆抗体的基因，其特征在于：编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的轻链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.5所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/2E10的重链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.6所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD/6E2的轻链可变区的基因序列如SEQ.ID.NO.7所示；编码SARS-CoV-2SpikeRBD...

【专利技术属性】
技术研发人员：董轲，郜赵伟，王希，张惠中，刘冲，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61