表达多个巨细胞病毒(CMV)抗原的MVA载体及其用途制造技术

所公开的是一种共表达多个人巨细胞病毒(HCMV)抗原以激发针对HCMV感染的有效的体液和细胞免疫应答的表达系统。该表达系统可包括被插入多个核酸序列的载体，该多个核酸序列编码通过一个或多个连接序列连接的HCMV抗原的多个亚单位，使得该亚单位同时被共表达。所公开的还有包含该表达系统或载体的疫苗组合物以及使用该疫苗组合物预防或治疗HCMV感染的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】表达多个巨细胞病毒(CMV)抗原的MVA载体及其用途优先权声明本申请要求于2018年5月11日提交的美国临时申请号62/670,607的优先权，其通过引用整体并入本文，包括附图。政府权益声明本专利技术在国家过敏症和传染病研究所授予的批准号AI103960和AI63356的政府支持下完成。政府享有本专利技术的某些权利。背景发育中的胎儿的人巨细胞病毒(HCMV)感染是永久性出生缺陷的最常见感染原因(6，44)，导致的先天性疾病多于美国目前所有已检测的新生儿病症的总和(13)。仅在美国，每年就有超过5000名儿童遭受宫内HCMV感染引发的长期医疗病症(11)，最常见导致听觉和认知障碍，但也可能导致更严重的后果，包括脑钙化，小头畸形，和死产(6，44)。然而，尽管认识到HCMV是主要的健康问题(66)，但大多数女性并未意识到先天性HCMV感染(12)，并且预防或治疗先天性HCMV传播或疾病的干预措施仍然难以捉摸(55)。尽管已经开发了许多HCMV疫苗策略(70)，但只有对基于减毒活疫苗株(strain)Towne或与MF59佐剂结合的重组糖蛋白B本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种表达系统，包含一个或多个载体，每个载体包含一个或多个表达盒，每个表达盒包含：/n单启动子；/n编码多个HCMV抗原的多个核酸序列，/n介导核糖体跳跃的一个或多个2A肽信号序列或在所述多个核酸序列的每一个之间的一个或多个内部核糖体进入位点；/n其中，所述多个HCMV抗原在同时由所述表达系统共表达时有效地诱发多功能体液和细胞免疫应答。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180511 US 62/670,6071.一种表达系统，包含一个或多个载体，每个载体包含一个或多个表达盒，每个表达盒包含：
单启动子；
编码多个HCMV抗原的多个核酸序列，
介导核糖体跳跃的一个或多个2A肽信号序列或在所述多个核酸序列的每一个之间的一个或多个内部核糖体进入位点；
其中，所述多个HCMV抗原在同时由所述表达系统共表达时有效地诱发多功能体液和细胞免疫应答。


2.根据权利要求1所述的表达系统，其中，所述多功能体液和细胞免疫应答包括中和抗体，促进ADCC，CDC，或CDV的抗体，以及多功能CD4+和CD8+T细胞应答。


3.根据权利要求1或权利要求2所述的表达系统，其中，所述多个HCMV抗原包含包膜五聚体复合物(PC)，所述包膜五聚体复合物包含gH，gL，UL128，UL130，和UL131A，gB，pp65，IE1，IE2，gO，gM，gN，和任何其他HCMV抗原，或其免疫原性的片段。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的表达系统，其中，将编码所述多个HCMV抗原的所述多个核酸序列插入一个或多个MVA插入位点。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的表达系统，其中，所述MVA插入位点包含在所述MVA基因64L和65L之间的插入位点(IGR64/65)，在所述MVA基因69R和70L之间的插入位点(IGR69/70)，在所述MVA基因044L和045L之间的插入位点(IGR44/45)，在所述MVA基因007R和008L之间的插入位点(IGR7/8)，在所述MVA基因122R和123L之间的插入位点(IGR122/123)，在所述MVA基因148R和149L之间的插入位点(IGR148/149)，MVA缺失1位点(Dell)，MVA缺失2位点(Del2)，MVA缺失3位点(Del3)，MVA缺失4位点(Del4)，MVA缺失5位点(Del5)，MVA缺失6位点(Del6)，和任何所述MVA基因之间的任何其他MVA基因间区域(IGR)。


6.根据权利要求1-5中任一项所述的表达系统，其中，所述一个或多个载体中的每一个是病毒载体，质粒，BAC，或病毒-BAC构建体。


7.根据权利要求6所述的表达系统，其中，所述病毒载体是被修饰的痘苗安卡拉(MVA)载体。


8.根据权利要求1-7中任一项所述的表达系统，其中，一个或多个2A信号序列编码口蹄疫病毒的2A肽(F2A)，马鼻炎A病毒的2A肽(E2A)，猪捷申病毒-1的2A肽(P2A)，质型多角体病毒的2A肽(BmCPV2A)，软化病病毒的2A肽(BmIFV2A)，或明脉扁剌蛾病毒的2A肽(T2A)。


9.根据权利要求1-8中任一项所述的表达系统，其中，所述启动子是痘苗的痘苗病毒mH5启动子，pSyn启动子，p7.5启动子，或p11启动子，或刺激痘苗基因表达的任何其他天然或合成的启动子序列。


10.根据权利要求1-9中任一项所述的表达系统，其中，所述表达系统包括：
第一载体，包含第一表达盒，所述第一表达盒包含第一启动子，编码两个或更多个HCMV抗原的两个或更多个核酸序列，以及在所述两个或更多个核酸序列的每一个之间的一个或多个2A信号序列；和
第二载体，包含第二表达盒，所述第二表达盒包含第二启动子，编码一个或多个HCMV抗原的一个或多个核酸序列，以及在所述一个或多个核酸序列的每一个之间的一个或多个2A信号序列；
其中，所述第一和第二载体的所述HCMV抗原由所述表达系统同时表达。


11.根据权利要求10所述的表达系统，其中，所述第一载体的所述两个或更多个HCMV抗原包含UL128，UL130，UL131A，gL，和gH；以及所述第二载体的所述一个或多个HCMV抗原包含pp65，gB，和/或IE1/IE2。


12.根据权利要求10所述的表达系统，进一步包含第三载体，所述第三载体包含第三表达盒，所述第三表达盒包含第三启动子，编码一个或多个HCMV抗原的一个或多个核酸序列，以及在所述一个或多个核酸序列的每一个之间的一个或多个2A信号序列；
其中，所述第一载体，所述第二载体，和所述第三载体的所述HCMV抗原由所述表达系统同时表达...

【专利技术属性】
技术研发人员：费利克斯·乌索，唐·J·戴蒙德，
申请(专利权)人：希望之城，
类型：发明
国别省市：美国;US