一种胃癌标志物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种胃癌标志物及其应用，涉及生物医药技术领域；所述标志物为环状RNAhsa_circ_0061137，序列如SEQ ID NO.1所示，全长1787bp。本发明专利技术所述标志物hsa_circ_0061137在胃癌组织中低表达，且胃癌组织中hsa_circ_0061137表达较低的患者预后更差；当过表达所述标志物hsa_circ_0061137编码的蛋白时，可以抑制胃癌细胞增殖。本发明专利技术所述胃癌标志物的发现，为胃癌的预后和治疗提供了一条全新的途径，hsa_circ_0061137和其编码的蛋白质有望成为胃癌的预后标志物和临床治疗的靶分子。

【技术实现步骤摘要】
一种胃癌标志物及其应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种胃癌标志物及其应用。
技术介绍
胃癌是严重危害人类健康的疾病，发病率占我国恶性肿瘤第二位，死亡率占我国恶性肿瘤第三位。由于早期诊断不灵敏等原因，很多胃癌患者被发现时已处于中晚期，预后较差。对于无法手术的患者，化疗是常用的治疗方案，然而现在的化疗方案仍缺乏靶向性，且有诸多副作用，迫切需要寻找更加有效的胃癌治疗靶点和预后指标。circRNAs是一类具有环状闭合结构的RNA分子，由于circRNAs在肿瘤的侵袭、转移及耐药等方面有着重要作用，且具有组织疾病特异性及稳定性等优点，已成为近年来肿瘤领域的研究热点，但是目前并没有一种可明确治疗且具有胃癌标志作用的circRNAs出现。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种胃癌标志物及其应用，hsa_circ_0061137的编码蛋白质可以抑制胃癌细胞的生长和转移，将为胃癌的预后和治疗提供一条全新的途径，hsa_circ_0061137和其编码的蛋白质有望成为胃癌的预后标志物和临床治疗的靶分子。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种胃癌标志物，所述标志物为环状RNAhsa_circ_0061137，所述hsa_circ_0061137的核苷酸序列为SEQIDNO.1所示。优选的，所述标志物编码的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。本专利技术还提供了一种检测所述标志物的引物对，所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示：TGGGCGAGCGATCACAATTAC，所述下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示：CAGACGAAACCTCTGGGTCC。本专利技术还提供了一种检测所述标志物的试剂盒，所述试剂盒包括上述引物对。优选的，所述试剂盒中还包括DNA聚合酶、缓冲液和水。本专利技术还提供了上述标志物在制备胃癌预后判断和治疗药物中的应用。本专利技术还提供了上述标志物在制备抑制胃癌细胞增殖的药物中的应用。本专利技术还提供了一种用于胃癌预后判断和治疗的药物，所述药物的有效成分包括所述标志物的编码蛋白质。本专利技术还提供了一种抑制胃癌细胞增殖的药物，所述药物的有效成分包括所述标志物的编码蛋白质。优选的，所述药物中还包括药学上可接受的载体和/或辅料。本专利技术提供了一种胃癌标志物，所述标志物为环状RNAhsa_circ_0061137，位于20号染色体上，全长1787bp，由DIDO1基因2-6号外显子转录后经反向剪切形成。本专利技术所述标志物hsa_circ_0061137在胃癌组织中低表达，且胃癌组织中hsa_circ_0061137表达较低的患者预后更差；当过表达所述标志物hsa_circ_0061137的蛋白时，可以抑制胃癌细胞增殖。本专利技术所述胃癌标志物的发现，为胃癌的预后和治疗提供了一条全新的途径，hsa_circ_0061137和其编码的蛋白质有望成为胃癌的预后标志物和临床治疗的靶分子。附图说明图1为hsa_circ_0061137实时定量PCR扩增产物溶解曲线及测序分析；图2为hsa_circ_0061137在胃癌组织中的表达及与预后关系；图3为hsa_circ_0061137编码蛋白可抑制胃癌细胞增殖能力；图4为Hsa_circ_0061137所编码蛋白的过表达载体结构示意图。具体实施方式本专利技术提供了一种胃癌标志物，所述标志物为环状RNAhsa_circ_0061137，所述hsa_circ_0061137的核苷酸序列为SEQIDNO.1所示。本专利技术所述环状RNAhsa_circ_0061137，位于20号染色体上，全长1787bp，由DIDO1基因2-6号外显子转录后经反向剪切形成；所述hsa_circ_0061137可编码一段长度为529氨基酸的蛋白质，其氨基酸序列优选如SEQIDNO.2所示。在本专利技术中，过表达所述hsa_circ_0061137的蛋白质可以起到抑制胃癌细胞增殖的效果。本专利技术还提供了一种检测所述标志物的引物对，所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示(TGGGCGAGCGATCACAATTAC)，所述下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示(CAGACGAAACCTCTGGGTCC)。本专利技术所述引物对优选为反向扩增引物，扩增的片段优选为209bp。本专利技术还提供了一种检测所述标志物的试剂盒，所述试剂盒包括上述引物对。本专利技术所述试剂盒中优选还包括DNA聚合酶、缓冲液和水，在本专利技术中所述DNA聚合酶和缓冲液优选以2×Mixture的形式存在；所述水优选为RNasefree双蒸水。本专利技术还提供了上述标志物在制备胃癌预后判断和治疗药物中的应用。在本专利技术中，过表达所述标志物的蛋白质，具有抑制胃癌细胞增殖的能力，所以可作为胃癌预后判断和治疗的药物或治疗靶点。本专利技术还提供了上述标志物在制备抑制胃癌细胞增殖的药物中的应用。本专利技术还提供了一种用于胃癌预后判断和治疗的药物，所述药物的有效成分包括所述标志物的编码蛋白质。本专利技术所述药物中优选还包括药学上可接受的载体和/或辅料。本专利技术对所述药物的剂型并没有特殊限定。本专利技术还提供了一种抑制胃癌细胞增殖的药物，所述药物的有效成分包括所述标志物的编码蛋白质。本专利技术所述药物中优选还包括药学上可接受的载体和/或辅料。本专利技术对所述药物的剂型并没有特殊限定。下面结合实施例对本专利技术提供的胃癌标志物及其应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。实施例1对胃癌circRNA芯片数据集GSE83521和GSE891436进行分析时，发现环状RNAhsa_circ_0061137在两个数据集中的胃癌组织中都显著低表达。根据hsa_circ_0061137所示的cDNA序列(SEQIDNO.1)，设计反向扩增引物序列，引物具体序列见SEQIDNO.3(TGGGCGAGCGATCACAATTAC)和SEQIDNO.4(CAGACGAAACCTCTGGGTCC)，PCR产物大小209bp。并采用测序和琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物特异性和正确性(图1)。RNA样品制备：向细胞样品中加入1mLtrizol裂解细胞(若为组织，则向30mg组织中加入1mLtrizol匀浆)；加入200μL氯仿，振荡混匀，放置3min；4℃，10000×g离心15min，取上层水相加入新EP管；加入500μL异丙醇，混匀，室温放置10min；4℃，10000×g离心10min，吸弃上清；加入75％乙醇1mL洗涤沉淀，7500×g离心5min，弃上清；室温干燥，加入无RNase水溶解，并测浓度和纯度。RNA逆转录：采用HiScript1stStrandcDNASynthesisKit(Vazyme)，试剂成分与反应体系如下：在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胃癌标志物，其特征在于，所述标志物为环状RNA hsa_circ_0061137，所述hsa_circ_0061137的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种胃癌标志物，其特征在于，所述标志物为环状RNAhsa_circ_0061137，所述hsa_circ_0061137的核苷酸序列为SEQIDNO.1所示。


2.根据权利要求1所述标志物，其特征在于，所述标志物编码的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。


3.一种检测权利要求1所述标志物的引物对，其特征在于，所述引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。


4.一种检测权利要求1所述标志物的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求3所述引物对。


5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：张徐，张宇，许文荣，钱晖，张佳音，郭祯，王茂叶，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32