一种中亚白及多糖衍生物的制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及一种中亚白及多糖衍生物的制备方法和用途，该方法经淀粉酶辅助提取中亚白及多糖后，对中亚白及多糖经硫酸化，乙酰化，羧甲基化及磷酸化的修饰，分别得到硫酸化衍生物，乙酰化衍生物，羧甲基化衍生物及磷酸化衍生物；取代度DS分别为：0.12，0.56，0.13，0.32，经验证表明：这些衍生物具较显著的抗氧化及益生元活性，适宜作为一种新型的抗氧化剂及潜在的益生元的药物或保健食品中的用途。

【技术实现步骤摘要】
一种中亚白及多糖衍生物的制备方法和用途
本专利技术属于医药
，多糖的结构改造领域，具体涉及一种中亚白及多糖衍生物的制备方法和用途。
技术介绍
中亚白及(TUBERSALEP)，又名欧白及，为兰科植物OrchischusuaD.Don的干燥块茎。功能与主治:生湿生热，壮阳生精，养心生血等；几千年来，它作为了一种药物来治疗各种疾病，包括麻痹、胃疾病、霍乱、黄疸、胸痛、关节炎、炎症、梅毒、酸度、肝炎、遗精、肿瘤、月经失调、湿疹、哮喘、腹泻、催情药、血痢疾、消化不良、骨折、耳痛、风湿、疟疾、壮阳药、溃疡、伤口等。除此之外，它还可以作为增稠剂和稳定剂添加到饮料和冰淇淋中。中亚白及多糖主要由葡甘聚糖组成，研究表明魔芋葡甘聚糖具有抗糖尿病，抗肥胖，益生元，抗炎，调节免疫等功能；因此研究中亚白及多糖，挖掘其药用潜力十分有必要。植物多糖具有抗氧化，抗炎，抗凝血，免疫调节及促益生菌增长等多种功能，它以其广泛的治疗作用和极低的细胞毒性，在医药、食品、化妆品和环境治理等领域具有广阔的应用前景。多糖的活性与多糖的结构有很大的关系，通过结构修饰之后的多糖在某些方面的活性会显著提高。如：硫酸化改性可显著改善多糖的结构特征,促进多糖的生物活性，甚至可使多糖具有新的生物活性。硫酸多糖具有多种生物活性，如抗氧化、抗癌、免疫调节、抗凝血等.因此，多糖的结构修饰也逐渐成为了研究的热点。益生元是一种可被选择性发酵，而专一改善肠道中有益于宿主健康和幸福感的菌群组成和活性的食物配料。近年来，研究表明诸多多糖及低聚糖可作为益生元。益生元具有很多生理活性，如非消化性，改善肠道菌群，促进肠道益生菌生长，降低肠道PH，调节机体代谢和免疫系统，减轻便秘等。研究表明，肠道微生物结构的改变会影响消化率和代谢产物的种类，从而使机体发生变化。因此，通过干扰肠道内微生物菌群可以实现调节机体健康的目的。益生元具有稳定性好、热量低、服用量小、配伍性好等优点，其通过促进有益菌的繁殖来抑制有害细菌的生长，从而达到调整肠道菌群，保持机体健康的目的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种中亚白及多糖衍生物的制备方法和用途，该方法经淀粉酶辅助提取中亚白及多糖后，对中亚白及多糖经硫酸化，乙酰化，羧甲基化及磷酸化的修饰，分别得到硫酸化中亚白及多糖衍生物，乙酰化中亚白及多糖衍生物，羧甲基化中亚白及多糖衍生物及磷酸化中亚白及多糖衍生物；取代度DS分别为：0.12，0.56，0.13，0.32，经验证表明：这些衍生物具较显著的抗氧化及益生元活性，适作为一种新型的抗氧化剂及潜在的益生元的药物或保健食品中的用途。本专利技术所述的一种中亚白及多糖衍生物的制备方法，所述中亚白及多糖衍生物为硫酸化中亚白及多糖衍生物、乙酰化中亚白及多糖衍生物、羧甲基化中亚白及多糖衍生物和磷酸化中亚白及多糖衍生物，具体操作按下列步骤进行：a、将干燥的中亚白及用万能打粉机打粉，过40目筛，取粉末加浓度80％乙醇，磁力搅拌，加热器回流提取，冷却至室温，过滤，将残渣通风干燥，置于温度-4℃备用，得到提取物；b、将步骤a得到的提取物1g，加100mL水和0.5mL耐高温淀粉酶，磁力搅拌，加热器回流提取2小时，500转/分钟，温度100℃，离心7800转/分钟，将上清液在温度55℃条件下进行减压浓缩至1/4-1/5，得到浓缩液；c、将步骤b得到的浓缩液用4倍体积无水乙醇进行沉淀，在温度4℃下放置12h，收集沉淀后，溶解于水中，3500Da透析袋透析3天，冷冻干燥，备用；d、将步骤c所得样品200mg溶于10mLN,N-二甲基甲酰胺，然后加入三氧化硫吡啶络合物100mg，在磁力搅拌下温度80℃反应3小时，反应后冷却至室温，用4M氢氧化钠调节pH至中性，用蒸馏水3500DA透析袋透析72小时，透析结束后，冷冻干燥得硫酸化中亚白及多糖衍生物；或将步骤c所得样品200mg溶解于10mL蒸馏水中，用10M氢氧化钠调节pH至9.0，并置于室温10min，加入2mL乙酸酐，并用氢氧化钠保持pH在8.0-8.5，反应30min后，加入10M盐酸调节pH至7终止反应，用蒸馏水3500DA透析袋透析72小时，透析结束后，冷冻干燥得乙酰化中亚白及多糖衍生物；或将步骤c所得样品200mg溶解于15.6mL18％氢氧化钠中，缓慢加乙醇至出现白色沉淀，继续搅拌1h，继续加入乙醇至出现白色沉淀，向反应液中加入3.0mL一氯乙酸，搅拌，再次加入乙醇至浑浊，并用磁力搅拌加热器在温度70℃反应2小时，继续加乙醇至出现沉淀，再置于在70℃反应2小时，反应结束后，用蒸馏水3500DA透析袋透析72小时，透析结束后冷冻干燥得羧甲基化中亚白及多糖衍生物；或将3.4g多聚磷酸钠和0.56g三偏磷酸钠溶于30mL蒸馏水中，加入150mg硫酸钠和步骤c所得样品200mg，并用氢氧化钠调节pH至9.0，用磁力搅拌，温度90℃加热反应4小时，反应结束后，用蒸馏水3500DA透析袋透析72小时，透析结束后，冷冻干燥得磷酸化中亚白及多糖衍生物。所述方法获得的中亚白及多糖衍生物在制备抗氧化剂中的用途。所述方法获得的中亚白及多糖衍生物在制备益生元的药物中的用途。所述方法获得的中亚白及多糖衍生物在制备益生元的保健食品中的用途。本专利技术所述的一种中亚白及多糖衍生物的制备方法和用途，其有益效果为：本专利技术通过淀粉酶辅助提取了中亚白及多糖，使中亚白及中淀粉有效去除。本专利技术通过不同手段对中亚白及多糖进行了衍生化修饰，所得硫酸化中亚白及多糖衍生物，乙酰化中亚白及多糖衍生物，羧甲基化中亚白及多糖衍生物及磷酸化中亚白及多糖衍生物的取代度DS分别为：0.12，0.56，0.13，0.32，具有显著的抗氧化，促益生菌生长活性。为中亚白及多糖衍生物开发作为氧化剂和益生元提供了理论依据。验证了中亚白及多糖不同结构修饰衍生物对其抗氧化及作为益生元活性的影响效果不同，为后期定向修饰多糖及构效关系研究提供了参考。附图说明图1为本专利技术中亚白及衍生化多糖紫外谱图；图2为本专利技术中亚白及衍生化多糖红外谱图；图3为本专利技术中亚白及衍生化多糖XRD谱图；图4为本专利技术中亚白及衍生化多糖刚果红实验结果；图5-图7为本专利技术中亚白及衍生化多糖抗氧化实验结果；图8-图9为本专利技术中亚白及衍生化多糖促益生菌增长活性实验结果。具体实施方式实施例1制备硫酸化中亚白及多糖衍生物：a、将干燥的中亚白及用万能打粉机打粉，过40目筛，取粉末加浓度80％乙醇，磁力搅拌，加热器回流提取，冷却至室温，过滤，将残渣通风干燥，置于温度-4℃备用，得到提取物；b、将步骤a得到的提取物1g，加100mL水和0.5mL耐高温淀粉酶，磁力搅拌，加热器回流提取2小时，500转/分钟，温度100℃，离心7800转/分钟，将上清液在温度55℃条件下进行减压浓缩至1/4-1/5，得到浓缩液；c、将步骤b得到的浓缩液用4倍体积无水乙醇进行沉淀，在温度4℃下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种中亚白及多糖衍生物的制备方法，其特征在于所述中亚白及多糖衍生物为硫酸化中亚白及多糖衍生物、乙酰化中亚白及多糖衍生物、羧甲基化中亚白及多糖衍生物和磷酸化中亚白及多糖衍生物，具体操作按下列步骤进行：/na、将干燥的中亚白及用万能打粉机打粉，过40目筛，取粉末加浓度80%乙醇，磁力搅拌，加热器回流提取，冷却至室温，过滤，将残渣通风干燥，置于温度-4℃备用，得到提取物；/nb、将步骤a得到的提取物1g，加100 mL水和0.5 mL耐高温淀粉酶，磁力搅拌，加热器回流提取2小时，500转/分钟，温度100℃，离心7800转/分钟，将上清液在温度55℃条件下进行减压浓缩至1/4-1/5，得到浓缩液；/nc、将步骤b得到的浓缩液用4倍体积无水乙醇进行沉淀，在温度4℃下放置12h，收集沉淀后，溶解于水中，3500 Da透析袋透析3天，冷冻干燥，备用；/nd、将步骤c所得样品200 mg溶于10 mL N,N-二甲基甲酰胺，然后加入三氧化硫吡啶络合物100 mg， 在磁力搅拌下温度80℃反应3小时，反应后冷却至室温，用4M 氢氧化钠调节pH至中性，用蒸馏水3500DA透析袋透析72小时，透析结束后，冷冻干燥得硫酸化中亚白及多糖衍生物；/n或将步骤c所得样品200 mg溶解于10 mL蒸馏水中，用10 M氢氧化钠调节pH至9.0，并置于室温10 min，加入2 mL 乙酸酐，并用氢氧化钠保持pH在8.0-8.5，反应30 min 后，加入10M 盐酸调节pH至7终止反应，用蒸馏水3500DA透析袋透析72小时，透析结束后，冷冻干燥得乙酰化中亚白及多糖衍生物；/n或将步骤c所得样品200 mg溶解于15.6 mL18% 氢氧化钠中，缓慢加乙醇至出现白色沉淀，继续搅拌1h，继续加入乙醇至出现白色沉淀，向反应液中加入3.0 mL一氯乙酸，搅拌，再次加入乙醇至浑浊，并用磁力搅拌加热器在温度70℃反应2小时，继续加乙醇至出现沉淀，再置于在70℃反应2小时，反应结束后，用蒸馏水3500 DA透析袋透析72小时，透析结束后冷冻干燥得羧甲基化中亚白及多糖衍生物；/n或将3.4 g多聚磷酸钠和0.56 g三偏磷酸钠溶于30 mL蒸馏水中，加入150 mg 硫酸钠和步骤c所得样品200mg，并用氢氧化钠调节pH至9.0， 用磁力搅拌，温度90℃加热反应4小时，反应结束后，用蒸馏水3500 DA透析袋透析72小时，透析结束后，冷冻干燥得磷酸化中亚白及多糖衍生物。/n...

【技术特征摘要】
1.一种中亚白及多糖衍生物的制备方法，其特征在于所述中亚白及多糖衍生物为硫酸化中亚白及多糖衍生物、乙酰化中亚白及多糖衍生物、羧甲基化中亚白及多糖衍生物和磷酸化中亚白及多糖衍生物，具体操作按下列步骤进行：
a、将干燥的中亚白及用万能打粉机打粉，过40目筛，取粉末加浓度80%乙醇，磁力搅拌，加热器回流提取，冷却至室温，过滤，将残渣通风干燥，置于温度-4℃备用，得到提取物；
b、将步骤a得到的提取物1g，加100mL水和0.5mL耐高温淀粉酶，磁力搅拌，加热器回流提取2小时，500转/分钟，温度100℃，离心7800转/分钟，将上清液在温度55℃条件下进行减压浓缩至1/4-1/5，得到浓缩液；
c、将步骤b得到的浓缩液用4倍体积无水乙醇进行沉淀，在温度4℃下放置12h，收集沉淀后，溶解于水中，3500Da透析袋透析3天，冷冻干燥，备用；
d、将步骤c所得样品200mg溶于10mLN,N-二甲基甲酰胺，然后加入三氧化硫吡啶络合物100mg，在磁力搅拌下温度80℃反应3小时，反应后冷却至室温，用4M氢氧化钠调节pH至中性，用蒸馏水3500DA透析袋透析72小时，透析结束后，冷冻干燥得硫酸化中亚白及多糖衍生物；
或将步骤c所得样品200mg溶解于10mL蒸馏水中，用10M氢氧化钠调节pH至9.0，并置于室温10min，加入2mL乙酸酐，...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿布力米提·伊力，阿吉艾克拜尔·艾萨，热合巴提·努尔夏提，
申请(专利权)人：中国科学院新疆理化技术研究所，
类型：发明
国别省市：新疆;65