一种用于化学发光免疫法的试剂盒及其制备方法和应用技术

一种用于化学发光免疫法的试剂盒及其制备方法和应用。该试剂盒包括包被有待测物的抗原或抗体的免疫磁珠复合物，以及偶联有聚合物分子的二抗或第二抗体，所述聚合物分子上标记有多个光源基团。由于采用信号放大技术，将多个发光基团共价偶联到聚合物分子上，再将聚合物分子共价偶联到二抗或第二抗体上，使发光基团成倍增加，从而使发光强度成倍增强，可用于检测含量极低的生物指标。检测含量极低的生物指标。检测含量极低的生物指标。

【技术实现步骤摘要】
一种用于化学发光免疫法的试剂盒及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及免疫检测领域，具体涉及一种用于化学发光免疫法的试剂盒及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]化学发光免疫分析包含免疫分析和化学发光分析两部分，其中免疫分析是将化学发光物质或酶作为标记物，直接标记在抗原或抗体上，经过抗原与抗体反应形成抗原-抗体免疫复合物，而化学发光分析是在免疫反应结束后，加入氧化剂或酶的发光底物，化学发光物质经氧化剂的氧化后，形成一个处于激发态的中间体，会发射光子释放能量以回到稳定的基态，发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测。根据化学发光标记物与发光强度的关系，可利用标准曲线计算出被测物的含量。根据标记物的不同可将化学发光免疫分析技术分为三大类：即直接化学发光标记物免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。
[0003]化学发光免疫分析技术在检验医学中有多方面的应用，包括各类疾病标志物的诊断以及治疗药物浓度监测等，其具有灵敏度高、特异性好、线性范围宽和检测时间短等优点。然而该技术对样本量有一定要求，其对于某些超低含量的疾病标志物或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于化学发光免疫法的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：包被有待测物的抗原或抗体的免疫磁珠复合物，以及偶联聚合物分子的标记二抗或标记第二抗体，所述聚合物分子上标记有多个光源基团。2.如权利要求1所述用于化学发光免疫法的试剂盒，其特征在于，所述免疫磁珠复合物中的磁珠表面经过活性基团修饰，所述活性基团包括羧基、氨基、醛基、亲和素中的至少一种；优选地，所述聚合物分子包括聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸、聚甲基丙烯酸甲酯、聚氨基酸和生物大分子中的至少一种；优选地，所述聚氨基酸为赖氨酸；优选地，所述生物大分子为牛血清白蛋白或血蓝蛋白；优选地，所述光源基团包括化学发光基团和荧光基团中的至少一种；优选地，所述化学发光基团包括吖啶酯、鲁米诺类衍生物中的至少一种；优选地，所述荧光基团包括异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明、藻红蛋白、7-氨基-4甲基香豆素、Eu3+螯合物中的至少一种。3.如权利要求2所述用于化学发光免疫法的试剂盒，其特征在于，当采用化学发光基团作为光源基团时，所述试剂盒中还包括化学发光引发剂；优选地，所述化学发光引发剂包括H2O2。4.一种如权利要求1-3任一项所述试剂盒的制备方法，其特征在于，包括：免疫磁珠复合物的制备：包括将含有待测物的抗原或抗体的包被液加入经过活性基团修饰的磁珠中，将待测物的抗原或抗体偶联固定于磁珠上，得到包被有待测物的抗原或抗体的免疫磁珠复合物；标记二抗或标记第二抗体的制备：对聚合物分子进行保护和活化，并将光源基团标记到活化的聚合物分子上，再与二抗或第二抗体偶联，得到标记二抗或标记第二抗体。5.如权利要求4所述试剂盒的制备方法，其特征在于，所述免疫磁珠复合物的制备，具体步骤包括：将经过活性基团修饰的磁珠加入偶联液并反应后，加入含待测物的抗原或抗体的包被液重悬，涡旋混匀反应，磁性分离、去除上清液；用洗涤液洗涤磁珠，磁性分离、去除上清液；加入封闭液，涡旋混匀反应，磁性分离、去除上清液；加入洗涤液洗涤磁珠，磁性分离、去除上清液；再加入缓冲液，涡旋混匀，既得包被有待测物的抗原或抗体的免疫磁珠复合物。6.如权利要求5所述试剂盒的制备方法，其特征在于，所述标记二抗或标记第二抗体的制备，具体步骤包括：(1)保护与活化步骤：包括将聚合物分子置于缓冲液中，在搅拌下加入保护试剂，并在0℃-37℃下反应1-72h；反应完毕后超声、离心、去除上清液，并用洗涤液进行清洗；将所得聚合物分子置于缓冲液中，在搅拌下加入活化试剂，并在0℃-37℃下反应1-72h；反应完...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈小茹，
申请(专利权)人：深圳上泰生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：