一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂及其制备方法，包括致孔剂溶液制备、基料制备、基料浸渍和树脂合成，所述致孔剂溶液的制备，壳聚糖100

【技术实现步骤摘要】
一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂及其制备方法


[0001]本专利技术属于树脂制备
，涉及一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂，具体涉及一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂及其制备方法。

技术介绍

[0002]脱氧核糖核苷酸是组成DNA结构的基本单位，脱氧核苷酸或其盐传统上是以脱氧核糖核酸(DNA)为原料，经5
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磷酸二酯酶的酶解作用而获得的，在医药、试剂、精细化工等领域有着十 分广泛的应用。dNTP，deoxy-ribonucleoside triphosphate（脱氧核糖核苷三磷酸）的缩写。是包括dATP, dGTP, dTTP, dCTP,等在内的统称，N是指含氮碱基，代表变量指代A、T、G、C等中的一种。在生物DNA合成中，以及各种PCR（RT-PCR（reverse transcription PCR）、Real-time PCR）中起原料作用。现有技术的脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂存在以下主要缺陷：难以提高树脂的比表面积，交换容量偏小，机械强度低，孔径分布范围大，圆球率不高等特点。

技术实现思路

[0003]本专利技术针对以上不足，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂及其制备方法。本专利技术可以实现以下专利技术目的：本专利技术的脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂，比表面积大，具有较大的交换容量，机械强度高，孔径分布均匀，圆球率高。
[0004]为解决上述技术问题，采用以下技术方案：本专利技术的一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂的制备方法，所述方法，包括致孔剂溶液的制备、基料的制备、基料浸渍和树脂的合成。
[0005]以下方案是对本专利技术技术方案的优化：所述致孔剂溶液的制备，壳聚糖100-120份、尿素8-15份、壳寡糖10-20份和氯化钙0.1-1份。
[0006]所述壳聚糖，粘度15-45cps、脱乙酰度在70-80%；所述氯化钙，CAS号10043-52-4，有效成分含量≥99.0%，磷酸盐含量≤0.003%。
[0007]所述基料的制备，苯乙烯、二乙烯苯和致孔剂按重量比例10-20:3-5:2-10。
[0008]所述基料的制备，引发剂的加入量为总重量的0.1-1wt%，所述引发剂为过氧化苯甲酰和偶氮二异丁腈，质量比为100:1-2；所述过氧化苯甲酰，苯甲酰胺含量为0.01-0.1%，碳酸钙含量为0.001-0.01%。
[0009]所述基料的制备，将聚乙烯醇、蓖麻油聚氧乙烯醚、去离子水和亚甲基兰按重量10：0.1-1：30-50：12-18的比例搅拌混合，50-60℃下保温1-2小时，然后加入油相反应。
[0010]所述基料的制备，混合物于50-60℃下保温25-50min，以5℃/min的速率升温至80-85℃，继续保温30min后，开启第一次搅拌；以5℃/min的速率升温至100℃，开启第二次搅拌。
[0011]所述基料的制备，第一次搅拌，搅拌3小时，搅拌速率为1000-2000rpm/min；第二次搅拌，搅拌速率为600-800rpm/min，搅拌1-2小时。
[0012]所述基料浸渍，向基料中缓慢加入浸渍液，加入过程中控制温度为35-42℃，加入时间，保温40min后加入氯化亚铁和氯化锌、氯化钙的混合物，混合搅拌，继续保温8小时。
[0013]本专利技术的一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂，比表面积为90-130g/m2，全交换容量为16.2-21.4mmol/g，圆球率不低于96.2%。
[0014]本专利技术的脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂的制备方法，包括以下步骤：步骤一、致孔剂溶液的制备将致孔剂按15-20wt%加入到去离子水中搅拌至完全溶解，加入5wt%(去离子水)的乳化剂span-60快速搅拌20-40min，得到致孔剂溶液。
[0015]所述致孔剂的组份及各自的重量份数为：壳聚糖100-120份、尿素8-15份、壳寡糖10-20份和氯化钙0.1-1份。
[0016]所述壳聚糖，粘度15-45cps、脱乙酰度在70-80%；所述氯化钙，CAS号10043-52-4，有效成分含量≥99.0%，磷酸盐含量≤0.003%；所述壳寡糖，分子量1000-1800Da，脱乙酰度＞95%。
[0017]步骤二、基料的制备将苯乙烯、二乙烯苯和致孔剂按重量比例10-20:3-5:2-10混合，加入粉体引发剂，引发剂的加入量为总重量的0.1-1wt%，得到油相；所述苯乙烯，含水率＜0.5%；所述二乙烯苯，含水率＜0.5%；所述引发剂为过氧化苯甲酰和偶氮二异丁腈，质量比为100:1-2；所述过氧化苯甲酰，苯甲酰胺含量为0.01-0.1%，碳酸钙含量为0.001-0.01%；将聚乙烯醇、蓖麻油聚氧乙烯醚、去离子水和亚甲基兰按重量10：0.1-1：30-50：12-18的比例搅拌混合，50-60℃下保温1-2小时，然后加入油相，油相与聚乙烯醇、蓖麻油聚氧乙烯醚、去离子水和亚甲基兰的总质量的重量比例控制在1:3-5；50-60℃下保温25-50min，以5℃/min的速率升温至80-85℃，继续保温30min后，开启搅拌，搅拌3小时，搅拌速率为1000-2000rpm/min；以5℃/min的速率升温至100℃，搅拌速率降低，降为600-800rpm/min，搅拌1-2小时得到反应物，经过滤、洗涤、干燥，得到基料。
[0018]步骤三、基料浸渍向基料中缓慢加入浸渍液，加入过程中控制温度为35-42℃，加入时间，保温40min后加入氯化亚铁和氯化锌、氯化钙的混合物，混合搅拌，继续保温8小时。
[0019]所述浸渍液，为氯甲醚，加入量为基料的2-3倍；所述氯化亚铁和氯化锌、氯化钙混合物，重量比例为1：10-20：0.1-1，加入量为基料的5-10wt%。
[0020]步骤四、树脂的合成将浸渍基料用去离子水洗涤至中性，缓慢滴加三甲胺至反应完全，经去离子水洗涤至pH值为7，冷冻干燥，得到本专利技术的离子交换树脂。本专利技术的离子交换树脂应用广泛，可用于脱氧核糖核苷三磷酸纯化。
[0021]经检测，本专利技术的离子交换树脂，比表面积大，具有较大的交换容量，机械强度高，孔径分布均匀，圆球率高；比表面积为90-130g/m2；全交换容量为16.2-21.4mmol/g，体积交
换容量4.4-7.1mmol/ml；机械强度高；孔径分布均匀，粒度0.315-1.25mm占比为95.8%，圆球率不低于96.2%。
[0022]本专利技术采用以上技术方案，与现有技术相比，具有以下优点：(1)本专利技术脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂，突破传统的采用离子交换树脂分离提纯，方法更简单高效，得到的脱氧核糖核苷三磷酸收率得以提高，收率82.1-86.5%，超过82%；(2)本专利技术脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂，得到的脱氧核糖核苷三磷酸纯度好，纯度大于99.0%。
具体实施方式
[0023]实施例1一种脱氧核糖核苷三磷酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂的制备方法，其特征在于，所述方法，包括致孔剂溶液的制备、基料的制备、基料浸渍和树脂的合成；所述致孔剂溶液的制备，壳聚糖100-120份、尿素8-15份、壳寡糖10-20份和氯化钙0.1-1份。2.根据权利要求1所述的一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖，粘度15-45cps、脱乙酰度在70-80%；所述氯化钙，CAS号10043-52-4，有效成分含量≥99.0%，磷酸盐含量≤0.003%。3.根据权利要求1所述的一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂的制备方法，其特征在于，所述基料的制备，苯乙烯、二乙烯苯和致孔剂按重量比例10-20:3-5:2-10。4.根据权利要求1或3所述的一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂的制备方法，其特征在于，所述基料的制备，引发剂的加入量为总重量的0.1-1wt%，所述引发剂为过氧化苯甲酰和偶氮二异丁腈，质量比为100:1-2；所述过氧化苯甲酰，苯甲酰胺含量为0.01-0.1%，碳酸钙含量为0.001-0.01%。5.根据权利要求1所述的一种脱氧核糖核苷三磷酸纯化用离子交换树脂的制备方法，其特征在于，所述基料的制备，将聚乙烯醇、蓖麻油聚氧乙烯醚、去离子水和亚甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：张国臣，刘维华，刘建亮，于敦海，
申请(专利权)人：潍坊华诺医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：