冬凌草叶水提物粉末、其制备、治疗肺纤维化作用及应用制造技术

本发明专利技术公开了冬凌草叶水提物粉末,其制备方法以及在治疗肺纤维化的应用。通过本发明专利技术所述的方法制备得到的冬凌草叶水提物粉末含25种奎尼酸类化合物和11种槲皮素类化合物。实验证明,本发明专利技术的冬凌草叶水提物粉末具有优秀的治疗肺纤维化作用。因而提出本发明专利技术为治疗肺纤维化提供了有效的技术手段。维化提供了有效的技术手段。维化提供了有效的技术手段。

【技术实现步骤摘要】
冬凌草叶水提物粉末、其制备、治疗肺纤维化作用及应用


[0001]本专利技术涉及一种制备冬凌草叶水提物粉末的方法,涉及由该方法制备的冬凌草叶水提物粉末在制备肺纤维化药物中的应用。本专利技术属于生物医药领域。

技术介绍

[0002]特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种漫性,进行性,结疤性的原因不明的间质性肺炎。特发性肺纤维化也是最普遍的间质性肺病之一。由于肺远端空隙出现瘢痕并增厚,所以损害呼吸空气交换。随着瘢痕化组织增加,患者的肺越来越僵硬。僵硬的肺的远端气囊既不能正常发挥充气和排气功能,输送的氧气及其他气体也不能正常跨过它的上皮膜表面。这些事件一旦展开,将严重损害肺向循环的血流输送氧气,并导致人体出现其它并发症,包括器官功能的严重局限,以及有时器官衰竭和死亡。这样一来, 特发性肺纤维化成为使患者生活能力降低的最致命的间质性肺病。特发性肺纤维化仍然属于相对罕见的疾病,发病率大约是1/10000人/年,发病年龄在60-70岁。虽然最近抗纤维化治疗获得批准,但是比较典型的患者都在确诊的3-5年死亡。
[0003]目前,已经报道了200多种不同的纤维化呼吸病例。在这些病例之中,对特发性肺纤维化发病有贡献的因子容易鉴别,例如对滤过性毒菌感染或服用药物之后出现的特发性肺纤维化,或患确切的预先处置过的疾病(例如硬皮病)的患者的特发性肺纤维化,或接触特定环境(例如石棉)的患者的特发性肺纤维化风险因子容易鉴别。然而,有许多其它情形即使经过详尽研究肺特发性肺纤维化的病因仍然不能确认。在这些情形下可依赖专门的影像及组织病理切片从多种不同的病例诊断一种特发性肺纤维化病例。虽然事实上肺纤维化代表各种疾病族,以及每种病例可以有不同的刺激性事件,但是在所有案例中产生大量瘢痕组织的主要细胞一定是活化的肺成纤维细胞。
[0004]进行性肺瘢痕化,又称肺纤维化,已经成为世界范围内许多基础研究,转化研究和临床研究的焦点。到目前为止已经揭示,进行性肺瘢痕化研究需要更多与肺纤维化相关的流行病学和病因学信息。由于特发性肺纤维化预后最差并是最普遍的最具毁灭性的特发性间质性肺炎,所以这种肺病在进行性肺瘢痕化研究中尤其受到关注。三联疗法[强的松 (prednisone)加咪唑硫嘌呤(azathioprine)加N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine)的联合治疗] 曾用于治疗特发性肺纤维化,后来该疗法因极具危害性而被终止。目前,特发性肺纤维化患者普遍接受抗纤维化治疗。尽管眼下抗纤维化治疗取得了不少进展,然而只有两种称为抗纤维化的药被允许用于治疗特发性肺纤维化。这两种药是尼达尼布(nintedanib)和吡非尼酮(pirfenidone)。
[0005]吡非尼酮的疗效得到4个安慰剂对照的随机临床试验支持。第一个临床试验在日本完成,历时52周,治疗显著延缓了致命的肺功能衰退及病情恶化。此后,两个独立的临床试验在轻度和中度特发性肺纤维化患者身上验证吡非尼酮的安全性及疗效。其中一项临床试验仅仅证明了吡非尼酮在统计水平延缓肺功能衰退及在18个月内可减轻病情恶化。由于对这项临床试验结果存在质疑,美国FDA为吡非尼酮安排了安慰剂对照的3期临床试验。结
论是,吡非尼酮可延缓肺功能衰退及减轻病情恶化。2014年吡非尼酮(pirfenidone)被美国FDA有条件地推荐治疗特发性肺纤维化。
[0006]2011年完成的安慰剂对照的那项2期临床试验表明,每天口服2次,每次150mg,尼达尼布可以安全地延缓患者的肺功能衰退,降低急性恶化引起的死亡以及改善生活质量。 2014年完成的安慰剂对照的两项3期临床试验表明,与安慰剂比,尼达尼布显著延缓肺功能衰退,显著延长患者发生首次急性病情恶化的时间。2015年尼达尼布被有条件地推荐治疗特发性肺纤维化。尼达尼布的最常见的副反应是轻度至中度腹泻,这个副反应使得大约不足5％的患者退出试验。由于有些接受尼达尼布治疗的患者出现肝酶水平升高现象,所以建议在服用尼达尼布之前及服用尼达尼布中途都监测肝功能。对于心血管及/或出血风险高的患者,应当评估尼达尼布增加的出血及心脏疾患风险。
[0007]值得强调的是,尼达尼布和吡非尼酮只能延缓肺功能衰竭,并不能改善病情。此外, 依然不知道尼达尼布和吡非尼酮对其它进行性纤维化肺病是否有效。面对这种状况,仍然需要进一步研究这些疾病的病因学,以便确认合理的诊断方法以及发展可以改进患者存活的安全的干预。最近对特发性肺纤维化病理的理解表明,它的发病包括了多个分子通路。于是,试验聚焦于不同的靶点。例如前炎症流,免疫系统异常,细胞外信号传输,胶原沉积,细胞外基质硬化和肌成纤维细胞活化。GLPG1690作为autotaxin(制造细胞外溶血磷脂酸的酶,亦为抗纤维化有效的酶)的选择性抑制剂正在进行两项安慰剂对照的3期临床研究。Rho激酶是包含ROCK1和ROCK2的丝氨酸/苏氨酸激酶家族。ROCK1和ROCK2 被Rho家族的鸟苷三磷酸酶活化,与细胞增殖,粘附,迁移和凋亡关联。临床前研究发现, 博来霉素诱发的肺纤维化动物服用ROCK抑制剂可以抑制噬中性粒细胞和巨噬细胞渗入成肌纤维细胞,抑制成纤维细胞迁移,增殖和分化为成肌纤维细胞,以及诱导肺成肌纤维细胞凋亡。在动物和人体模型上,Rho激酶通路也与前炎症细胞因子的分泌关联。KD025 是口服的ROCK2专属性抑制剂,与ROCK1相比KD025对ROCK2的选择性更高。此外, KD025的耐受性好,无严重副反应。
[0008]冬凌草是唇形科香茶菜属植物碎米桠Rabdosiarubescens(Hemsl.)Hara的全草。冬凌草为多年生草本植物,广泛分布于我国黄河长江流域,主产于河南济源太行山和王屋山地区。因具有清热解毒,清咽利喉和消肿止痛功能,民间一直将冬凌草全草煮水饮用。在过去的30多年里,冬凌草的化学成分及药理作用研究主要集中在叶和杆的脂溶性部分, 代表性成分为冬凌草甲素和冬凌草乙素。迄今没有任何与冬凌草叶的水提物的化学成分及治疗作用相关的研究见诸文献。
[0009]专利技术人长期从事冬凌草叶水提物粉末的化学成分及治疗作用研究。专利技术人对冬凌草叶水提物粉末的化学组分进行质谱分析,发现了36种未见报道的组分,主要包括桂皮酰奎尼酸和多取代槲皮素。虽然报道过冬凌草叶水提物粉末单一组分的生物活性,但是全组分联合的生物活性并不知情。通过反复研究专利技术人发现,这28种组分可治疗肺纤维化。与冬凌草的已知专利技术相比,本专利技术的冬凌草叶水提物粉末可治疗肺纤维化的专利技术达到了一个全新高度。根据这些认识,专利技术人提出了本专利技术。

技术实现思路

[0010]本专利技术要解决的技术问题是提供一种制备冬凌草叶水提物粉末的方法,以及由该
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(3-羧基-1-丙烯羰氧)-6
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(5-羟基
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1-戊烯羰氧)槲皮素,3-O-葡萄糖苷-2
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甲酰氧-3
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(10-羧基-1,3-癸二烯羰氧)-4
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(5-羧基-2
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种冬凌草叶水提物粉末,其特征在于，所述冬凌草叶水提物粉末中含有25种奎尼酸类化合物；所述的25种奎尼酸类化合物为3-O-[E-2-(3-羧基-1-丙烯羰氧)-3,5-二甲酰氧-4-(3-羧基-2-丙烯酰氧)-6-(6-羧基-1,3-己二烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(6-羟基-1-己烯羰氧)-3-(4-羟基-1-丁烯羰氧)-4-(3-羧基-1-丙烯羰氧)-5-甲氧-6-(5-羧基-1-戊烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(3-羧基丙羰氧)-3,5-二甲氧-4-(3-羧基丙酰氧)-6-(6-羧基己羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(6-羟基己羰氧)-3,5-二甲酰氧-4-(3-羟基丙羰氧)-6-(6-羧基己羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(7-羧基-1,3-庚二烯羰氧)-3,4-二(3-羧基-1-丙烯羰氧)-5-甲酰氧-6-(6-羧基-1,3-己二烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(7-羧基-1-庚烯羰氧)-3-(6-羟基-1-己烯羰氧)-4-(3-羧基-1-丙烯羰氧)-5-甲酰氧-6-(6-羧基-1-己烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(4-羟基丁羰氧)-3,4-二(3-羧基丙羰氧)-5-甲酰氧-6-(6-羧基-1-己烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(5-羧基-1-戊烯羰氧)-3-羧基乙酰氧-4,6-二(3-羧基丙烯酰氧)-5-甲酰氧桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2,3-二(3-羧基-1-丙烯羰氧)-4-(3-羧基丙烯酰氧)-5-羧基乙酰氧-6-(4-羧基-1-丁烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2,3,4-三(4-羟基丁羰氧)-5-甲酰氧-6-(6-羧基-1,3-己二烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(4-羟基-1,3-丁二烯羰氧)-3,4-二(3-羧基-1-丙烯羰氧)-5-甲酰氧-6-(6-羧基-1,3,5-己三烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(4-羟基-1,3-丁二烯羰氧)-3-羧乙酰氧-4-(3-羧基-1-丙烯羰氧)-5-甲酰氧-6-(4-羧基-1,3-丁二烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2,3-二(3-羧基丙羰氧)-4-(3-羧基丙酰氧)-5-甲酰氧-6-(6-羧基-1-己烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2,3-二(3-羧基丙羰氧)-4-(3-羟基丙酰氧)-5-羟甲氧-6-(5-羧基戊羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2,6-二(5-羧基-1-戊烯羰氧)-3-(3-羧基丙羰氧)-4-羧基乙酰氧-5-甲氧桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(8-羧基-1-辛烯羰氧)-3-(3-羧基丙羰氧)-4-(7-羧基-1-庚烯羰氧)-5-羧基乙酰氧-6-(4-羧基-1-丁烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(9-羟基-1-壬烯羰氧)-3-(4-羟基丁羰氧)-4-(8-羟基-1-辛烯羰氧)-5-甲氧-6-(4-羧基-1-丁烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(7-羧基-1,3,5-庚三烯羰氧)-3,4-二(5-羧基-1,3-戊二烯羰氧)-5-羧基乙酰氧-6-(6-羧基-1,3-己二烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(4-羟基-1-丁烯羰氧)-3-(4-羧基-1-丁烯羰氧)-4-(3-羧基丙烯酰氧)-5-羧基乙酰氧-6-(4-羧基-1,3-丁二烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(7-羧基-1,3,5-庚三烯羰氧)-3-(8-羟基-1,3,5,7-辛四烯羰氧)-4,5-二(4-羧基-1,3-丁二烯酰氧)-6-(6-羧基-1,3,5-己三烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(4-羟基丁羰氧)-3,4-二(3-羧基丙羰氧)-5-(3-羟基丙酰氧)-6-(4-羧基丁羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2,6-二(5-羧基-1-戊烯羰氧)-3-(3-羧基丙羰氧)-4-(3-羧基丙酰氧)-5-羟基桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2,5-二(7-羧基-1,3-庚二烯羰氧)-3-(6-羟基-1,3-己二烯羰氧)-4-(4-羧基-1,3-丁二烯羰氧)-6-(6-羧基-1,3-己二烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸,3-O-[E-2-(5-羟基-1-戊烯羰氧)-3,4-二(4-羧基-1-丁烯羰氧)-5-羧基乙酰氧-6-(4-羧基-1,3-丁二烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸和3-O-[E-2,5-二羧基乙酰氧-3-(10-羧基-1,3,5,7-癸四烯羰氧)-4-(8-羧基-1,3,5-辛三烯羰氧)-6-(6-羧基-1,3-己二烯羰氧)桂皮酰]奎尼酸。2.权利要求1所述的冬凌草叶水提物粉末,其特征在于，所述冬凌草叶水提物粉末看还含有11种槲皮素类化合物；其中，所述的11种槲皮素类化合物为3-O-...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，赵明，黄飞，卢斌，
申请(专利权)人：北京恒润泰生医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：