竹柏果实饼粕乙酸乙酯有效部位的提取方法和用途技术

本发明专利技术提供了一种竹柏果实饼粕中得到乙酸乙酯有效部位的提取方法和用途。该有效部位是从竹柏果实提炼过油的饼粕中通过采用醇/水溶液提取后经过正己烷、二氯甲烷洗涤后得到乙酸乙酯有效部位，进一步实验研究发现该有效部位具有治疗肿瘤/癌症疾病的潜在功效。位具有治疗肿瘤/癌症疾病的潜在功效。

【技术实现步骤摘要】
竹柏果实饼粕乙酸乙酯有效部位的提取方法和用途


[0001]本专利技术属于医药
具体涉及从竹柏果实提炼油后的饼粕中获得的乙酸乙酯有效部位的提取方法及用途。

技术介绍

[0002]竹柏(Podocarpus nagi)，罗汉松科(Podocarpaceae)罗汉松属(Podocarpus)植物，在民间则有山杉、糖鸡子、罗汉柴、铁甲树、椰树等别名。主要分布于长江以南地带，如福建、江西、浙江、湖南、广西、广东等地。在瑶族民间，竹柏作为习用药材，具有止血、接骨、消肿作用；也可治外伤、出血、骨折、狐臭、眼疾、感冒等；竹柏鲜树皮或根的水煎剂可用于治风湿性关节炎([1]国家中医药管理局《中华本草》编委会，中华本草[M]，第2册第4卷，上海:上海科学技术出版社，1999.0813-0817；[2]戴斌，中国现代瑶药[M]，南宁:广西科学技术出版社，2009:257-259.16-18])。
[0003]竹柏虽然是瑶族民间习用药材，但是到目前为止还没有完全研究清楚其有效药用成分及活性物质基础。而且对竹柏化学成分及药理活性方面的研究相对较少。因此用科学的方法深入研究分析竹柏的天然药用成份及物质基础，将为竹柏的成药性研究提供相应的科学依据。
[0004]近年来，我们研究小组对竹柏进行了相关的研究：对竹柏叶、果实进行了提取分离。从竹柏果实中提取了可食用、具有抗氧化活性、降血压活性的功能养生油(雍建平、卢灿忠、张世碧，一种竹柏籽油的制备方法及用途，申请号：202010203003.0)。
[0005]癌症已成为世界范围内最主要的致死性疾病。癌症可于任何年龄在各种器官及组织中发生，导致死亡的主要癌症种类有：肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌和乳腺癌等。虽然部分小分子抗癌药物已用于临床，部分化合物正在进行临床前的研究。然而大部分癌症患者发觉病情时已是中期至晚期，临床治疗总体效果较差，尤其是多药耐药性的不断出现，使得癌症的治疗困难重重。因此，开发出活性高、副作用低的新型抗癌药物来满足临床的需求迫在眉睫。中药在我国用药历史悠久，毒副作用相对较低。从中药中发现新的候选药物或先导药物是当今药物研发的主流，尤其是对民族中药的深入开发。
[0006]文献报道了竹柏果皮和果壳中挥发油成分具有抗肿瘤活性(廖泽勇、韦玮，竹柏果皮和果壳中挥发油成分及其抗肿瘤活性研究[J]，医药导报，2015,34(5):609-612)。鉴于此，我们接着对竹柏果实提炼油后的饼粕进行研究，以期发现具有抗肿瘤活性的有效部位或成份。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是针对临床上应用的抗肿瘤/癌症药物具有毒、副作用大的现状，提供了从瑶族习用药材竹柏果实提炼油后的饼粕中获得了具有抗肿瘤活性的有效部位，该部位具有治疗肿瘤/癌症的潜在功效。
[0008]本专利技术提供了一种竹柏果实提炼油后的饼粕中乙酸乙酯有效部位的提取方法，包
括以下步骤：
[0009]A、将竹柏果实提炼过油的饼粕用乙醇和水的混合溶液浸泡或热提取后，过滤，浓缩，得到浸膏；
[0010]B、将步骤A所述浸膏分散在水中，用正己烷萃取，得到第一水层；
[0011]C、将步骤B中所述第一水层用二氯甲烷萃取，得到第二水层；
[0012]D、将步骤C中所述第二水层用乙酸乙酯萃取，收集合并乙酸乙酯层，浓缩、干燥后得到所述有效部位。
[0013]根据本专利技术的实施方案，步骤A中所述竹柏果实提炼过油的饼粕与混合溶液的质量体积比(kg/L)可以为1:(1-5)，例如为20:50；
[0014]根据本专利技术的实施方案，步骤A中所述乙醇和水的体积比可以为(50-100):30，例如70:30；
[0015]根据本专利技术的实施方案，步骤A中所述浸泡的温度可以为10-30℃，例如25℃；所述浸泡时间可以为20-50天，例如30天；
[0016]根据本专利技术的实施方案，步骤A中所述热提取的温度可以为30-100℃，例如80℃；所述热提取的时间可以为6-24h，例如12h；
[0017]根据本专利技术的实施方案，步骤B中所述正己烷萃取的次数可以为1-5次，例如3次；
[0018]根据本专利技术的实施方案，步骤C中所述二氯甲烷萃取的次数可以为1-5次，例如3次；
[0019]根据本专利技术的实施方案，步骤D中所述乙酸乙酯萃取的次数可以为1-5次，例如3次；
[0020]根据本专利技术的实施方案，步骤D中干燥可以为冻干或烘干，所述烘干的温度可以为40-60℃。
[0021]本专利技术还提供一种所述提取方法得到的竹柏果实提炼油后的饼粕中乙酸乙酯有效部位。
[0022]本专利技术还提供所述有效部位在制备抗癌药物中的应用。
[0023]根据本专利技术实施方案，所述癌症可以为胃癌、乳腺癌、肺腺癌或宫颈癌。
[0024]有益效果
[0025]本专利技术提供了一种从竹柏果实提炼油后的饼粕中有效提取了乙酸乙酯有效部位的方法，意外发现了该有效部位具有很好的抗肿瘤活性。进一步研究发现，该有效部位对胃癌细胞株、乳腺癌细胞株(MCF-7)、肺腺癌细胞株(A549)和宫颈癌细胞株(Hela)四种肿瘤细胞株均具有抑制活性。特别是在16.9mg/mL浓度下，对胃癌细胞株、和肺腺癌细胞株(A549)的抑制率分别达到了97.04％、和96.61％。该有效部位及其制备的抗癌药物在治疗肿瘤/癌症中具有潜在的功效。
具体实施方式
[0026]下文将结合具体实施例对本专利技术的技术方案做更进一步的详细说明。应当理解，下列实施例仅为示例性地说明和解释本专利技术，而不应被解释为对本专利技术保护范围的限制。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均涵盖在本专利技术旨在保护的范围内。
[0027]除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已
OD
加药细胞
)/(OD
对照细胞-OD
空白
)]×
100。阴性对照为V
高糖培养基
/V
DMSO
:10:1的混合溶液。
[0048]该有效部位对胃癌细胞株、肺腺癌细胞株(A549)以及宫颈癌细胞株(Hela)的测试过程同上。其对四种肿瘤细胞株的抑制率如表1。
[0049]表1该部位在16.9mg/mL浓度下对四种肿瘤细胞株的抑制率
[0050][0051]以上，对本专利技术的实施方式进行了说明。但是，本专利技术不限定于上述实施方式。凡在本专利技术的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种竹柏果实提炼油后的饼粕中乙酸乙酯有效部位的提取方法，包括以下步骤：A、将竹柏果实提炼过油的饼粕用乙醇和水的混合溶液浸泡或热提取后，过滤，浓缩，得到浸膏；B、将步骤A所述浸膏分散在水中，用正己烷萃取，得到第一水层；C、将步骤B中所述第一水层用二氯甲烷萃取，得到第二水层；D、将步骤C中所述第二水层用乙酸乙酯萃取，收集合并乙酸乙酯层，浓缩、干燥后得到所述有效部位。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤A中所述竹柏果实提炼过油的饼粕与混合溶液的质量体积比(kg/L)为1:(1-5)。3.根据权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步骤A中所述乙醇和水的体积比为(50-100):30。4.根据权利要求1-3任一项所述的提取方法，其特征在于，步骤A中所述浸泡的温度为10-30℃；...

【专利技术属性】
技术研发人员：雍建平，卢灿忠，肖雨晨，杨洋，
申请(专利权)人：厦门稀土材料研究所，
类型：发明
国别省市：