【技术实现步骤摘要】
四种血液来源蛋白的纯化方法
[0001]本专利技术涉及蛋白的分离纯化,具体涉及四种血液来源蛋白的纯化方法。
技术介绍
[0002]在生物医药快速发展的时代,血液制品行业已成为生物医药及诊断产业的重要组成部分。目前血浆来源的血液制品(血浆蛋白药物)主要有白蛋白、免疫球蛋白、凝血因子、蛋白酶抑制剂四大类,发达国家的血液制品企业可以从血浆中获取超过20种的血浆蛋白药物。然而,受人才、技术、临床认知水平等因素制约,国内的血液制品企业最多只能获得不超过10种,且主要是基于低温乙醇沉淀工艺分离提纯的产品,包括人血白蛋白、免疫球蛋白和凝血因子VIII产品等。目前国内主要提纯血浆蛋白药物仍基于Cohn等人二十世纪四十年代专利技术的低温乙醇法,通过调节乙醇浓度、盐浓度、温度和pH,依靠血浆蛋白的溶解度不同来分离,此方法虽然程序简单、溶剂价廉,适用于工业化生产,但有较大的局限性,主要可分离血浆中含量较高的蛋白(如白蛋白和免疫球蛋白),对含量较少的蛋白(如α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、触珠蛋白、转铁蛋白等)则很难提纯。
[0003] ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.四种血液来源蛋白的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:a、将血清透析到pH为4.2到4.8的层析缓冲液中,得透析样品,用阴离子交换层析对所述样品进行纯化,收集流穿液I和洗脱液I;b、洗脱液I经亲和层析纯化得流穿液II及HP蛋白;c、流穿液II透析到pH为3.0-3.8的层析缓冲液中,再用阴离子交换层析进行纯化,收集AAG蛋白;d、调流穿液I的pH至5.0-5.8,用阳离子交换层析进行纯化,收集流穿液III与洗脱液II;e、将流穿液III用亲和层析进行纯化得AAT蛋白;f、将洗脱液II透析到pH为5.3-5.8的层析缓冲液中,再用阴离子交换层析进行纯化,得TRF蛋白。2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述阴/阳离子交换层析和亲和层析,均包含平衡、上样、流穿和洗脱四个过程。3.如权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,所述层析缓冲液选自醋酸钠缓冲液、磷酸缓冲液,盐酸缓冲液,碳酸缓冲液。4.如权利要求2所述的制备...
【专利技术属性】
技术研发人员:易维京,朱攀,任燕斌,赵威,赵忠颢,
申请(专利权)人:重庆中元汇吉生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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