【技术实现步骤摘要】
静注新型冠状病毒人免疫球蛋白的制备方法
[0001]本专利技术涉及一种人血浆蛋白的制备方法，特别是一种静注新型冠状病毒人免疫球蛋白的分离纯化方法。
技术介绍
[0002]新型冠状病毒肺炎COVID-19(新冠肺炎)为新发急性呼吸道传染病，是由严重急性呼吸综合征冠状病毒2SARS-CoV-2(Severe Actue Respiratory SyndromeCoronavirus 2)感染引起的急性传染性疾病。SARS-CoV-2属于冠状病毒科，是一种β属具有包膜的单股正链RNA病毒。迄今为止，已经鉴定出六种冠状病毒感染人类并引起疾病。其中229E型冠状病毒、OC43型冠状病毒、NL63型冠状病毒和HKU1型冠状病毒感染通常为轻度感染，受感染的患者主要表现为发热，咳嗽和影像学上的肺部玻璃密度影，类似于严重急性呼吸综合征冠状病毒SARS-CoV和中东呼吸综合征冠状病毒 MERS-CoV感染。其他两种，重症急性呼吸系统综合症冠状病毒SARS-CoV和中东呼吸系统综合症冠状病毒MERS-CoV，则可能引起致命的疾病。 SARS-Co...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种静注新型冠状病毒人免疫球蛋白的制备方法，包括以下步骤：一、血浆病毒灭活采用新冠肺炎康复者血浆，融化后血浆去除冷沉淀，将去冷沉淀的血浆用其体积1～3倍、体积浓度为0.85～0.9％的生理盐水稀释，得到稀释后的血浆，用0.5mol/L HCl或醋酸缓冲液调节稀释后的血浆pH至7.0～7.5后，再向内加入其体积1/10的S/D病毒灭活剂，搅拌均匀，在25
±
1℃、继续搅拌下灭活6小时，得到灭活后血浆；所述S/D病毒灭活剂为在注射用水中含有体积浓度10％的聚山梨酯-80和3.3％的磷酸三丁酯；二、第一步亲和层析将灭活后血浆用0.45μm滤芯过滤，加入到柱高8～12cm、6～8倍柱床体积的Protein A凝胶平衡液层析柱中，按ProteinA凝胶的最大处理量的60～80％上样，过滤后的灭活后血浆与ProteinA凝胶的接触时间为6～10min，收集流穿液1，得到Protein A吸附后血浆；用洗脱液洗脱被吸附在层析柱上的1型免疫球蛋白G(IgG1)、2型免疫球蛋白G(IgG2)和4型免疫球蛋白G(IgG4)，洗脱液线性流速为1.0～1.5cm/min，得到Protein A洗脱液；所述Protein A凝胶采用MabSelect
TM
PrismA；将所述Protein A凝胶装填至层析柱内，得到Protein A层析柱，用6～8倍柱床体积的Protein A凝胶平衡液，以1cm/min的线性流速平衡所述Protein A层析柱，得到Protein A凝胶平衡液层析柱；所述Protein A凝胶平衡液为在注射用水中含有10～30mmol/L磷酸二氢钠和0.1～0.3mol/L氯化钠，pH 7.0～7.5；洗脱液为在注射用水中含有0.1～0.5mol/L甘氨酸，pH 3.0～4.0；三、第二步亲和层析将ProteinA吸附后血浆用1M HCl或0.5mol/L HCl调节pH至6.8～7.2，用0.45μm滤芯过滤，加入到柱高8～12cm、6～8倍柱床体积的Protein G凝胶平衡液层析柱中，按Protein G凝胶的最大处理量的60～80％上样，过滤后的ProteinA吸附后血浆与Protein G凝胶的接触时间为4～8min，收集流穿液2，得到Protein G吸附后血浆；用洗脱液洗脱被吸附在层析柱上的3型免疫球蛋白(IgG3)，洗脱线性流速为1.3～2.0cm/min，得到Protein G洗脱液；所述Protein G凝胶采用Protein G Sepharose 4Fast Flow；将所述Protein G凝胶装填至层析柱内，得到Protein G层析柱，用6～8倍柱床体积的Protein G凝胶平衡液，以1cm/min的线性流速平衡所述Pr...
【专利技术属性】
技术研发人员：甄细娥，张运佳，张战，王建慧，傅清慧，曾欢，侯明霞，吴燕，宋清爽，朱路平，丁美玲，邱柏钦，张伟，邓淙严，洪大川，刘栩详，李慧，钟璇林，谢思艺，张佩，郭采平，谢文杰，许强，
申请(专利权)人：深圳市卫光生物制品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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