一种托莫西汀中间体的生物合成方法及羰基还原酶技术

本发明专利技术涉及酶工程技术领域，尤其是一种托莫西汀中间体的生物合成方法及羰基还原酶，该羰基还原酶产酶菌株为Escherichia coli TM1908，菌种保藏编号CCTCC NO：M2019714。进行托莫西汀中间体生物合成，在辅酶、辅酶循环酶、助溶剂、缓冲液的存在下，经该羰基还原酶催化转化为托莫西汀中间体化合物I。本发明专利技术的合成方法解决了现有技术中化学催化低手性产品的问题，降低了生产成本、减少了污染。同时，本发明专利技术为托莫西汀重要手性中间体的制备提供了新的催化底物。制备提供了新的催化底物。

【技术实现步骤摘要】
一种托莫西汀中间体的生物合成方法及羰基还原酶


[0001]本专利技术涉及酶工程领域，具体领域为一种托莫西汀中间体的合成方法。

技术介绍

[0002]托莫西汀(atomoxetine)是一种高度选择性去甲肾上腺素再摄取抑制(norepinephrine reuptake inhibitor，NRI)，通过选择性地与神经突触前膜上的去甲肾上腺素(noradrenaline，NE)再摄取转运体结合，抑制NE再摄取，而与其他神经递质亲和力极低。对于中枢神经兴奋剂治疗有严重不良反应或者治疗无效的患者，亦有了可选择的途径，可以试用托莫西汀治疗。托莫西汀作为第一个被用于治疗注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)的非兴奋性药物，2002年获得美国FDA批准，2003年在美国正式上市，目前已经在包括我国在内的多个国家上市并应用。
[0003]托莫西汀的研究具有广阔的市场前景，吸引了国内外众多的科研工作者的兴趣，其合成方法自然也是科研工作者研究的重点。目前托莫西汀的合成路线主要以纯化学本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种羰基还原酶，其特征在于：其产酶菌株为Escherichia coli TM1908，菌种保藏编号CCTCC NO：M2019714。2.权利要求1所述的羰基还原酶的制备方法，其特征在于：将Escherichia coli TM1908接种于10ml LB液体培养基，接种量为1％，培养基含1mg卡那霉素，37℃，220rpm摇床培养8h，获得种子液；将上述种子液接入发酵产酶培养基，接种量为1～5％，发酵培养基中添加终浓度为10mg/100mL卡那霉素，37℃，220rpm摇床培养至OD
600
在0.6～0.8时加入终浓度为0.5mM的IPTG，18℃诱导24h；发酵液诱导结束后，在4℃下，12000rpm离心3min，收集菌体；0.2M pH7.0的PB buffer洗菌并重悬，超声破碎后冻干，获得羰基还原酶冻干酶粉。3.采用权利要求1所述的羰基还原酶或权利要求2制得的羰基还原酶进行托莫西汀中间体生物合成的方法，其特征在于：由化合物II作为起始原料，在辅酶、辅酶循环酶、助溶剂、缓冲液的存在下，经羰基还原酶催化合成托莫西汀中间体化合物I，其反应如下所示，所述化合物II为3-甲胺基-1-苯基-1-丙酮盐酸盐。4.根据权利要求3所述的托莫西汀中间体生物合...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈本顺，叶金星，何伟，石利平，徐春涛，张维冰，程瑞华，孙伟振，孟鑫，徐秋斌，刘轩豪，施莉莉，
申请(专利权)人：江苏阿尔法药业有限公司，
类型：发明
国别省市：