本发明专利技术适用于微生物育种技术领域，提供了一株植物乳杆菌，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌PLBS007，于2018年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC NO.16947；本发明专利技术还提供了一株植物乳杆菌在断奶幼兔饲料中的应用。借此，本发明专利技术的植物乳杆菌PLBS007具有较好的热稳定性、酸稳定性，在断奶幼兔日粮中添加适宜水平的植物乳杆菌PLBS007，能够降低断奶幼兔的腹泻率和死亡率，提高断奶幼兔的平均日增重和免疫球蛋白含量，增强断奶幼兔的免疫能力，减轻断奶应激，提高断奶幼兔的经济效益。提高断奶幼兔的经济效益。提高断奶幼兔的经济效益。
【技术实现步骤摘要】
一种植物乳杆菌及其在断奶幼兔饲料中的应用
[0001]本专利技术涉及微生物育种
，尤其涉及一种植物乳杆菌及其在断奶幼兔饲料中的应用。
技术介绍
[0002]断奶幼兔腹泻一直是影响实验兔产量和质量的重要原因，也是困扰整个养兔业发展的重大难题。产生腹泻的原因主要是断奶幼兔消化机能不完善，极易受外界环境、饲粮营养等因素影响造成肠道中微生物区系比例失衡，使有害菌大量增殖，不能被有益菌群所抑制。寻找一种安全、天然且可防治断奶幼兔腹泻的饲料原料，是实验兔饲养迫切需要解决的问题之一。
[0003]益生菌可产生多种酶，帮助宿主消化吸收，促进蛋白及钙等吸收，还可合成微生物等，维持机体生理代谢，具有抗氧化、提高免疫及调节肠道等功能。
[0004]植物乳杆菌是一种源自人类肠道的革兰氏阳性菌，具有抗炎特性和保护肠道屏障作用，能够调整肠道菌群平衡，抑制肠道不良微生物的增殖，同时植物乳杆菌能分泌抗生物素类物质，对肠道致病菌产生拮抗作用，可改善动物肠道微生态平衡、促进生长及预防疾病；还耐受酸和胆汁、消除乳糖不耐症、降低胆固醇、抑制并治疗腹泻及增强机体免疫等。但是，植物乳杆菌在断奶幼兔中的应用研究鲜有报道，其添加量及效果也不尽相同。
[0005]综上可知，现有技术在实际使用上显然存在不便与缺陷，所以有必要加以改进。
技术实现思路
[0006]针对上述的缺陷，本专利技术的目的在于提供一种植物乳杆菌，具有较好的热稳定性、酸稳定性，在断奶幼兔日粮中添加适宜水平的植物乳杆菌PLBS007，能够降低断奶幼兔的腹泻率和死亡率，提高断奶幼兔的平均日增重和免疫球蛋白含量，增强断奶幼兔的免疫能力，减轻断奶应激，提高断奶幼兔的经济效益。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术提供一株植物乳杆菌，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌PLBS007，于2018年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC NO.16947。
[0008]根据本专利技术的植物乳杆菌，所述植物乳杆菌取自牛乳。
[0009]根据本专利技术的植物乳杆菌，所述植物乳杆菌在断奶幼兔的基础日粮中的添加量为70～400mg/kg。
[0010]根据本专利技术的植物乳杆菌，所述植物乳杆菌在断奶幼兔的基础日粮中的添加量为186～289mg/kg。
[0011]根据本专利技术的植物乳杆菌，本专利技术还提供一种筛选植物乳杆菌的方法，包括以下步骤：
[0012]步骤一混合菌株的稀释
[0013]将牛乳放入MRS固体培养基培养，并进行菌株的梯度稀释，得到不同梯度的稀释
液；
[0014]步骤二菌株初筛
[0015]采用溶钙圈法，取不同梯度的所述稀释液涂布于MRS初筛培养基中培养，挑取具有透明溶钙圈的单菌落划线，获得形态单一的初筛菌落；
[0016]步骤三菌株复筛
[0017]将所述初筛菌落接种于MRS培养基继续培养，收集上清液，用滤膜过滤除菌，制备无菌上清液；
[0018]制备指示菌平板，然后在牛津杯中添加所述无菌上清液，预扩散后继续培养，测定抑菌圈大小，筛选抑菌活力高的菌株为复筛菌株。
[0019]根据本专利技术筛选植物乳杆菌的方法，所述MRS固体培养基包括如下组分：蛋白胨10.0g/L，牛肉膏8.0g/L，酵母粉4.0g/L，葡萄糖20.0g/L，磷酸氢二钾2.0g/L，柠檬酸三铵2.0g/L，乙酸钠5.0g/L，七水硫酸镁0.58g/L，四水硫酸锰0.25g/L，吐温801mlg/L，蒸馏水1L。
[0020]根据本专利技术筛选植物乳杆菌的方法，所述步骤三中，所述滤膜选用0.22μm滤膜。
[0021]根据本专利技术的植物乳杆菌，所述植物乳杆菌在断奶幼兔饲料中的应用。
[0022]本专利技术的目的在于提供一种植物乳杆菌，本专利技术提供的植物乳杆菌PLBS007，具有较好的热稳定性、酸稳定性，可以较好地抑制革兰氏阳性菌单增李斯特氏菌、藤黄微球菌、蜡样芽孢杆菌和和革兰氏阴性菌福氏志贺氏菌，但是对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌无抑制作用。在断奶幼兔日粮中添加适宜水平的植物乳杆菌PLBS007，能够降低断奶幼兔的腹泻率和死亡率，提高断奶幼兔的平均日增重和免疫球蛋白含量，增强断奶幼兔的免疫能力，减轻断奶应激，提高断奶幼兔的经济效益。
附图说明
[0023]图1是本专利技术植物乳杆菌PLBS007的菌落形态图；
[0024]图2是本专利技术植物乳杆菌PLBS007的生长曲线图；
[0025]图3是本专利技术植物乳杆菌PLBS007的热稳定性试验图；
[0026]图4是本专利技术植物乳杆菌PLBS007的酸稳定性试验图。
具体实施方式
[0027]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0028]本专利技术提供了一株植物乳杆菌，拉丁文学名：Lactobacillus plantarum；该植物乳杆菌为植物乳杆菌PLBS007，已于2018年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏(简称：CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC NO.16947。
[0029]本专利技术的植物乳杆菌取自牛乳，本专利技术提供了植物乳杆菌PLBS007的筛选方法，包括以下步骤：
[0030]步骤一混合菌株的稀释
[0031]将牛乳放入MRS固体培养基37℃培养24小时，并进行菌株的梯度稀释，得到不同梯度的稀释液。
[0032]MRS固体培养基包括如下组分：蛋白胨10.0g/L，牛肉膏8.0g/L，酵母粉4.0g/L，葡萄糖20.0g/L，磷酸氢二钾2.0g/L，柠檬酸三铵2.0g/L，乙酸钠5.0g/L，七水硫酸镁0.58g/L，四水硫酸锰0.25g/L，吐温801mlg/L，蒸馏水1L，115℃灭菌20分钟。
[0033]步骤二菌株初筛
[0034]采用溶钙圈法，取不同梯度的稀释液涂布于MRS初筛培养基中，37℃培养24～36h，挑取具有透明溶钙圈的单菌落划线，获得形态单一的初筛菌落。
[0035]步骤三菌株复筛
[0036]将初筛菌落接种于MRS培养基，37℃培养24h，8000r/min离心10min，收集上清液，用0.22μm滤膜过滤除菌，制备无菌上清液。
[0037]以S.aureus ATCC14458为指示菌，在营养琼脂培养基中添加S.aureus ATCC14458菌液，终浓度为106CFU/mL，制备指示菌平板，采用牛津杯琼脂扩散法，牛津杯中添加无菌上清液50μL，4℃冰箱预扩散10h后于37℃培养14h，测定抑菌圈大小，筛选抑菌活力高的菌株为复筛菌株。
[0038]本专利技术还提供了植物乳杆菌PLBS007的鉴定方法，包括形态学鉴定和基因序列鉴定。
[0039]形态学鉴定
[0040]根本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株植物乳杆菌，其特征在于，所述植物乳杆菌为植物乳杆菌PLBS007，于2018年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCC NO.16947。2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌，其特征在于，所述植物乳杆菌取自牛乳。3.根据权利要求1所述的植物乳杆菌，其特征在于，所述植物乳杆菌在断奶幼兔的基础日粮中的添加量为70～400mg/kg。4.根据权利要求3所述的植物乳杆菌，其特征在于，所述植物乳杆菌在断奶幼兔的基础日粮中的添加量为186～289mg/kg。5.一种筛选权利要求1所述的植物乳杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一混合菌株的稀释将牛乳放入MRS固体培养基培养，并进行菌株的梯度稀释，得到不同梯度的稀释液；步骤二菌株初筛采用溶钙圈法，取不同梯度的所述稀释液涂布于MRS初筛培养基中培养，挑取具有透明溶钙圈的...
【专利技术属性】
技术研发人员：张佳，谭竹毅，
申请(专利权)人：青岛普罗百世生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。