一种肠道菌群胶囊及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及医学制剂及工艺技术领域，特别是公开了一种肠道菌群胶囊及其制备方法和应用。本发明专利技术通过粪便采集、菌群提取、制剂制备以及制剂灌装等技术，将肠道菌群以冻干粉的形式制成胶囊，人体通过服用胶囊进行肠道菌群移植，相较于现有方法具有安全、便捷、菌群定植率高等优点。本发明专利技术的肠道菌群胶囊在制备时使用的制剂辅助液可以有效地保护肠道菌群，降低粪便本身对菌群组成的影响，提高冻干粉中肠道菌群的存活率(超过90％)，同时提高菌群在肠道中的定植率，所得胶囊可长时间、稳定地保存于

【技术实现步骤摘要】
一种肠道菌群胶囊及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及医学制剂及工艺
，具体公开了一种肠道菌群胶囊及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]科学研究表明，人体肠道微生物种类繁多且数量庞大，正常肠道菌群作为人体的天然屏障，对维持人体健康起着重要的作用。人体的肠道菌群会随着人的年龄、饮食等因素发生变化并保持着总体平衡。在某些情况下，当人体的肠道菌群平衡被打破，将会造成肠道菌群失调。比如由于外部感染导致的致病菌在人体肠道内的大量繁殖，会使人的身体健康遭受负面影响，甚至引发疾病。
[0003]人体肠道菌群的组成已被证明与多种健康问题和疾病有着紧密的联系。在多项针对肠炎、直肠癌、肠易激综合征、阿兹海默症、糖尿病、抑郁症等患者的调查研究中发现，患者的肠道菌群组成与健康人群有着显著的差异。当使用菌群移植等方法改善患者的肠道菌群组成后，患者的症状有明显的改善。由此可见，肠道菌群移植在疾病的临床治疗中有着巨大的潜力。
[0004]肠道菌群移植(Fecal Microbiota Transplantation，FMT)是一种将健康人粪便中的功能菌群通过灌肠、肠胃镜等方式移植到患者的肠道内，通过影响并重构患者的肠道菌群组成，实现肠道及肠道外疾病治疗的方法。然而，使用他人的粪便菌群进行肠道菌群移植面临着异体排斥的风险。更为安全稳妥的做法是自体菌群移植(autologous Fecal Microbiota Transplantation，aFMT)，即使用自身的粪便菌群进行移植和疾病的治疗，具有更高的安全性。
[0005]目前，人体肠道菌群移植已被越来越多地应用于临床治疗中，不同的移植方法也导致其效果各不相同。除了临床应用外，肠道菌群移植也被用于维持身体的健康状态。但是，由于对菌群移植技术的研究尚不深入，仍缺乏一个标准的高效移植方法。而已有的菌群移植方法多是使用粪便菌群进行灌肠，该方法需要专业的人员和器材，并且对于接受移植的人来说较难接受，且菌群定植低。因此有必要对其进行研究，以提出一种安全、方便、容易被接受且菌群定植率高的肠道菌群移植方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术主要解决的技术问题是提供一种新的肠道菌群移植方法，通过粪便采集、菌群提取、制剂制备以及制剂灌装等技术，将肠道菌群以冻干粉的形式制成胶囊，人体通过服用胶囊进行肠道菌群移植，相较于现有方法具有安全、便捷、菌群定植率高等优点。同时，本专利技术还提供一种肠道菌群胶囊的制备方法及其在治疗肠道及肠道外疾病中的应用。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：一种肠道菌群胶囊，包含肠道菌群冻干粉，所述肠道菌群冻干粉由肠道菌群和制剂辅助液在混合后冷冻干燥制成。制剂辅助液的组成包括：每100mL制剂辅助液中各组分的质量为：甜菜碱(betaine)10-14g，葡萄糖
(glucose)0.3-0.5g，氯化钠(NaCl)0.8-1.0g，抗坏血酸(Ascorbic acid)0.1-0.3g，D-山梨醇(D-Sorbitol)2.0-4.0g，脱脂乳(skimmed milk)4.0-6.0g，HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)2.0-3.0g，余量为水。
[0008]优选地，所述制剂辅助液的添加量为每克肠道菌群添加2-3mL的制剂辅助液。
[0009]上述制剂辅助液中各成分的作用分别为：甜菜碱作为低温保护剂，可以保护菌群在低温冻干过程中的存活率；葡萄糖作为营养成分，可以提高菌群在存储过程中的存活率；氯化钠作为渗透压平衡成分，可以提高菌群在悬浊液中的存活率；抗坏血酸作为抗氧化剂，可以降低服用胶囊者的副作用；D-山梨醇和脱脂乳作为塑形剂，除了提高菌群在冻干过程中的存活率外，还能为冻干粉提供轻而多孔的结构，增强菌粉的复水性，从而帮助菌群冻干的制备；HEPES作为缓冲成分，可以保证冻干的酸碱度处于中性范围。
[0010]作为一种优选的实施方式，制剂辅助液的组成包括：每100mL制剂辅助液中各组分的质量为：甜菜碱(betaine)12g，葡萄糖(glucose)0.4g，氯化钠(NaCl)0.9g，抗坏血酸(Ascorbic acid)0.2g，D-山梨醇(D-Sorbitol)3.0g，脱脂乳(skimmed milk)5.0g，HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)2.5g，余量为水。
[0011]优选地，所述制剂辅助液的添加量为每3g肠道菌群添加7mL的制剂辅助液。
[0012]本专利技术的肠道菌群胶囊在制备过程中使用的制剂辅助液成分无药理活性，作用是提高菌群在冻存和冻干状态下的存活率，以及提高服用后菌群在肠道中的定植率。该制剂辅助液对肠道菌群中的拟杆菌、厚壁菌、变形菌、软壁菌、肠球菌、乳酸菌、肠杆菌、放线菌、小梭菌和双歧杆菌均有着优良的保护作用，肠道菌群冻干存活率超过90％。
[0013]作为一种优选的实施方式，所述冷冻干燥包括以下步骤：
[0014]a)预冻：以每小时降低5-10℃的冷冻速度，从25℃冷冻至-60℃至-80℃，总预冻时间为8-24h；
[0015]b)冻干：分阶段冻干，每6小时提升8℃，共4次；每3小时提升8℃，共3次，每2小时提升6℃，共1次，升温冻干35h。
[0016]上述优化的冷冻干燥方式可以避免冻干过程对菌群的破坏，能够更好地保护菌群中的重要菌种，减少冻干过程中菌群的损伤。
[0017]作为一种优选的实施方式，所述肠道菌群的制备方法为：
[0018]1)向采集的粪便样品中加入生理盐水，混合后得到粪便样品稀释混合液；
[0019]2)将步骤1)处理得到的粪便样品稀释混合液进行初步离心，分离底部大颗粒物质沉淀，得到上层均质液体A；
[0020]3)将步骤2)处理得到的上层均质液体A进行逐级离心，分离底部沉淀物质，得到上层均质液体B；
[0021]4)将步骤3)处理得到的上层均质液体B进行高速离心，去除上层液体，得到的底部沉淀即为肠道菌群。
[0022]作为一种优选的实施方式，步骤1)中，所述生理盐水为无菌生理盐水；所述无菌生理盐水的加入量为每克粪便样品加入8-10mL。更进一步优选地，所述无菌生理盐水的加入量为每克粪便样品加入9mL。例如，当采集的粪便样品为400g时，向粪便样品中加入3600mL无菌生理盐水。
[0023]作为一种优选的实施方式，步骤1)中，所述粪便样品在提供者排出5-30s内装入密
封袋中并抽真空密封。所述密封后的粪便样品装入保温箱中，和干冰一起，在-15℃至-25℃的环境中至多保存6h。
[0024]作为一种优选的实施方式，步骤1)中，所述混合为使用磁力搅拌器对粪便样品和生理盐水的混合物进行搅拌，搅拌速度为400-600RPM，搅拌时间为20-40min。更进一步优选地，所述混合的搅拌速度为500RPM，搅拌时间为30min。
[0025]作为一种优选的实施方式，步骤1)中所有操作都在厌氧环境中进行，如在厌氧工作台中进行。
[0026]作为一种优选本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肠道菌群胶囊，其特征在于：所述肠道菌群胶囊包含肠道菌群冻干粉，所述肠道菌群冻干粉由肠道菌群和制剂辅助液在混合后冷冻干燥制成；所述制剂辅助液的组成包括：每100mL制剂辅助液中各组分的质量为：甜菜碱10-14g，葡萄糖0.3-0.5g，氯化钠0.8-1.0g，抗坏血酸0.1-0.3g，D-山梨醇2.0-4.0g，脱脂乳4.0-6.0g，HEPES 2.0-3.0g，余量为水；优选地，所述制剂辅助液的添加量为每克肠道菌群添加2-3mL。2.根据权利要求1所述的肠道菌群胶囊，其特征在于：所述制剂辅助液的组成包括：每100mL制剂辅助液中各组分的质量为：甜菜碱12g，葡萄糖0.4g，氯化钠0.9g，抗坏血酸0.2g，D-山梨醇3.0g，脱脂乳5.0g，HEPES 2.5g，余量为水；优选地，所述制剂辅助液的添加量为每3g肠道菌群添加7mL。3.一种如权利要求1或2所述的肠道菌群胶囊的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1：采集粪便样品后进行菌群提取，得到肠道菌群；S2：在S1处理得到的肠道菌群中加入制剂辅助液，混合后进行冷冻干燥处理，得到肠道菌群冻干粉；S3：将S2处理得到的肠道菌群冻干粉装入胶囊中，得到肠道菌群胶囊。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述菌群提取的操作如下：1)向采集的粪便样品中加入生理盐水，混合后得到粪便样品稀释混合液；2)将步骤1)处理得到的粪便样品稀释混合液进行初步离心，分离底部大颗粒物质沉淀，得到上层均质液体A；3)将步骤2)处理得到的上层均质液体A进行逐级离心，分离底部沉淀物质，得到上层均质液体B；4)将步骤3)处理得到的上层均质液体B进行高速离心，去除上层液体，得到的底部沉淀即为肠道菌群。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤3)中，所述逐级离心是指依次以100-300g、200-400g、400-600g、700-900g的离...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓政，王振宇，
申请(专利权)人：深圳市融思生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：