用于促进CHO细胞悬浮的CRISPR-Cas13d系统以及重组CHO细胞技术方案

本发明专利技术公开了一种用于促进CHO细胞悬浮的CRISPR

【技术实现步骤摘要】
用于促进CHO细胞悬浮的CRISPR-Cas13d系统以及重组CHO细胞


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种用于促进CHO细胞悬浮的CRISPR-Cas13d系统以及重组CHO细胞。

技术介绍

[0002]生物制药离不开细胞表达系统，而最常用的细胞系则是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary，CHO)表达系统。
[0003]1987年，基因泰克公司的tPA被FDA批准，这是第一个CHO细胞表达的上市药品。之后，CHO细胞作为哺乳动物蛋白表达系统全面走入制药行业。CHO细胞大规模培养技术及其生物反应器工程可广泛应用于抗体、基因重组蛋白质药物、病毒疫苗等生物技术产品的研究开发和工业化生产。
[0004]CHO细胞最初是上皮贴壁形成纤维细胞，在培养器皿面形成单细胞层，培养空间极其有限，传代时受到蛋白水解酶、机械力等造成的创伤，传代后细胞生长速率下降。经多次传代筛选后，CHO也可悬浮生长。但是，将贴壁细胞转化为悬浮细胞需要多次驯化，效率很低。

技术实现思路

[0005]本专利技术的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于抑制IGFBP4基因表达的物质的应用，为如下(Ⅰ)和/或(Ⅱ)和/或(Ⅲ)：(Ⅰ)促进CHO细胞增殖；(Ⅱ)促进CHO细胞悬浮；(Ⅲ)促进CHO细胞由贴壁细胞向悬浮细胞转化；所述抑制IGFBP4基因表达的物质为权利要求8所述CRISPR-Cas13d系统。2.一种促进CHO细胞增殖和/或促进CHO细胞悬浮的方法，包括如下步骤：在CHO细胞中导入抑制IGFBP4基因表达的物质；所述抑制IGFBP4基因表达的物质为权利要求8所述CRISPR-Cas13d系统。3.一种促进CHO细胞由贴壁细胞向悬浮细胞转化的方法，包括如下步骤：在CHO细胞中导入抑制IGFBP4基因表达的物质；所述抑制IGFBP4基因表达的物质为权利要求8所述CRISPR-Cas13d系统。4.一种sgRNA，其靶序...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书七页序列表一二页附图三页，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：