本发明专利技术提供了一种花生过敏原Arah3特异性纳米抗体及其应用，所述的特异性纳米抗体为纳米抗体P84、纳米抗体P99、纳米抗体P72、纳米抗体P43、纳米抗体P91或纳米抗体P178中的至少一种。本发明专利技术所述的一种花生过敏原Arah3特异性纳米抗体制备周期短，成本低，稳定性高，可用于免疫检测体系的构建。免疫检测体系的构建。免疫检测体系的构建。
【技术实现步骤摘要】
一种花生过敏原Arah3特异性纳米抗体及其应用
[0001]本专利技术属于免疫检测领域，尤其是涉及一种花生过敏原Arah3特异性纳米抗体及其应用。
技术介绍
[0002]传统食物过敏原组分的免疫检测技术开发基于单克隆或多克隆抗体的筛选与制备，其要求在动物免疫过程中注射高纯度过敏原蛋白，并且筛选和制备抗体周期较长。在驼源动物外周血液中天然存在一种重链抗体(Heavy Chain only Antibodies,HCAbs)，与传统单克隆抗体相比，重链抗体天然缺失轻链及重链第一恒定区(CH1)。克隆并表达重链抗体的重链可变区得到重链抗体的抗原识别和结合域，称为纳米抗体(Nanobody,Nb)。纳米抗体具有与原重链抗体相当的结构稳定性及抗原结合活性，是目前已知的可结合靶向抗原的最小抗体单位。传统免疫过程需要制备高纯度过敏原蛋白，并且传统单克隆抗体制备周期长，成本高，与传统单克隆抗体片段相比，纳米抗体存在诸多优势。纳米抗体可溶性极高，不易发生聚集沉淀，具有很高的稳定性，能够在高温、强酸、强碱等致变性条件下保持抗原结合活性，适合于原核及真核表达系统。目前，纳米抗体被广泛应用于开发治疗性抗体药物、诊断试剂(胶体金法、酶联免疫吸附法、电化学发光法)、亲和纯化基质、免疫学研究等基础科学研究领域。
技术实现思路
[0003]有鉴于此，本专利技术旨在克服现有技术中的缺陷，提出一种花生过敏原Arah3特异性纳米抗体及其应用。
[0004]为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0005]一种花生过敏原Arah3特异性纳米抗体，所述的特异性纳米抗体为纳米抗体P84、纳米抗体P99、纳米抗体P72、纳米抗体P43、纳米抗体P91或纳米抗体P178中的至少一种。
[0006]进一步，所述的特异性纳米抗体包括4个框架区FR1、FR2、FR3、FR4和3个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3；
[0007]对于纳米抗体P84：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；
[0008]对于纳米抗体P99：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示；
[0009]对于纳米抗体P72：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示，所述的FR4的氨基
酸序列如SEQ ID NO.18所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.19所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.20所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.21所示；
[0010]对于纳米抗体P43：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.22所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.24所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.25所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.26所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.27所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.28所示；
[0011]对于纳米抗体P91：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.29所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.30所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.31所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.32所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.33所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.34所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.35所示；
[0012]对于纳米抗体P178：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.36所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.37所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.38所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.39所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.40所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.41所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.42所示；
[0013]所述的特异性纳米抗体的4个框架区和3个互补决定区的排列顺序为FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。
[0014]进一步，所述的纳米抗体P84的VHH的氨基酸序列如SEQ ID NO.43所示；所述的纳米抗体P99的VHH的氨基酸序列如SEQ ID NO.44所示；所述的纳米抗体P72的VHH的氨基酸序列如SEQ ID NO.45所示；所述的纳米抗体P43的VHH的氨基酸序列如SEQ ID NO.46所示；所述的纳米抗体P91的VHH的氨基酸序列如SEQ ID NO.47所示；所述的纳米抗体P178的VHH的氨基酸序列如SEQ ID NO.48所示。
[0015]所述的花生过敏原Arah3特异性纳米抗体的应用，所述的特异性纳米抗体在食品过敏原免疫检测中的应用。
[0016]所述的花生过敏原Arah3特异性纳米抗体的应用，所述的特异性纳米抗体在食品过敏原表位鉴定中的应用。
[0017]所述的花生过敏原Arah3特异性纳米抗体的应用，所述的特异性纳米抗体在基于抗体的过敏原纯化和示踪的应用。
[0018]相对于现有技术，本专利技术具有以下优势：
[0019]本专利技术所述的一种花生过敏原Arah3特异性纳米抗体制备周期短，成本低，稳定性高，可用于食物组分中过敏原特异性纳米抗体的制备和检测体系构建。
附图说明
[0020]图1为本专利技术实施例所述的花生总蛋白质的电泳图；
[0021]图2为本专利技术实施例所述的花生过敏原纳米抗体富集度的柱状图；
[0022]图3为本专利技术实施例所述的酶联免疫反应筛选结果的柱状图；
[0023]图4为本专利技术实施例所述的花生过敏原纳米抗体纯化的曲线图；
[0024]图5为本专利技术实施例所述的花生过敏原纳米抗体的蛋白电泳图；
[0025]图6为本专利技术实施例所述的纯化的花生过敏原纳米抗体的免疫印迹图；
[0026]图7为本专利技术实施例所述的纳米抗体本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种花生过敏原Arah3特异性纳米抗体，其特征在于：所述的特异性纳米抗体为纳米抗体P84、纳米抗体P99、纳米抗体P72、纳米抗体P43、纳米抗体P91或纳米抗体P178中的至少一种。2.根据权利要求1所述的花生过敏原Arah3特异性纳米抗体，其特征在于：所述的特异性纳米抗体包括4个框架区FR1、FR2、FR3、FR4和3个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3；对于纳米抗体P84：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；对于纳米抗体P99：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示；对于纳米抗体P72：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.19所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.20所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.21所示；对于纳米抗体P43：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.22所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.24所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.25所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.26所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO...
【专利技术属性】
技术研发人员：王硕，胡耀中，陆旸，张川，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：
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