基于蛋白质纳米颗粒的免疫激动剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及基于蛋白质纳米颗粒的免疫激动剂及其应用，所述蛋白质纳米颗粒可调控巨噬细胞功能表型的转化。该蛋白质纳米颗能够有效地促进巨噬细胞向M1转化，且该蛋白质纳米颗粒能够有效促进TBK1、IRF3以及STAT1的磷酸化，并能够引起Cxcl11、Cxcl10、Il

【技术实现步骤摘要】
基于蛋白质纳米颗粒的免疫激动剂及其应用


[0001]本专利技术涉及生物工程及医药领域，具体涉及基于蛋白质纳米颗粒的免疫激动剂及其应用。

技术介绍

[0002]免疫治疗是当前备受欢迎的一种新型的治疗癌症的手段，其主要利用自身的免疫系统，对自身已经发生突变的癌细胞进行杀伤。相比于传统的化学疗法、发射性疗法、手术等，免疫疗法具有毒副作用相对较小、能够有效地防止肿瘤复发等优势。
[0003]当前，免疫治疗主要包含固有免疫以及获得性免疫两种，固有免疫是机体内免疫反应的第一道防线，具有反应迅速，持续时间短等特点，同时固有免疫反应的过程当中产生的细胞因子如CXCL5、CXCL10、TNF-α以及IL-1β等能够有效地引起获得性免疫反应，进而有效地促进机体的免疫反应。其中固有免疫过程中的免疫细胞主要包括巨噬细胞(Macrophage)、树突状细胞(Dentric cell)、天然杀伤性细胞(NK cell)以及中性粒细胞(Neutrophil)等。
[0004]然而，在肿瘤微环境(Tumor Microenvironment,TME)中，肿瘤周围存在的很多的免疫细胞不具有免疫反应活性，如T细胞、巨噬细胞等，常见的巨噬细胞分为两种类型，分别是M1巨噬细胞、M2型巨噬细胞。其中M1巨噬细胞属于促炎症型的巨噬细胞，能够有效抑制肿瘤的生长；而M2型巨噬细胞属于抗炎型的巨噬细胞，能够对肿瘤的生长起到一定的促进作用。因此如何有效地将肿瘤周围的巨噬细胞更加有效地转化成M1巨噬细胞，从而更好地促进肿瘤免疫成为当前亟待解决的一大难题。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供基于蛋白质纳米颗粒的免疫激动剂及其应用，所述蛋白质纳米颗粒或所述药物可调控巨噬细胞的功能表型转化。该蛋白质纳米颗粒能够有效地促进巨噬细胞向M1转化，且该蛋白质纳米颗粒能够有效促进TBK1、IRF3以及STAT1的磷酸化，并能够引起Cxcl11、Cxcl10、Il-1β、Tnf-α、Ccl5以及Pdcd1等因子的显著上调，促进机体更加有效地调节免疫反应。
[0006]为此，本专利技术的第一方面，提供一种蛋白质纳米颗粒，所述蛋白质纳米颗粒由蛋白质单体自组装形成，所述蛋白质单体包括由金属硫蛋白、连接肽、谷胱甘肽硫转移酶以从氨基端到羧基端的顺序依次连接组成的融合蛋白。
[0007]进一步，所述连接肽的氨基酸序列如SEQIDNO：3所示。
[0008]谷胱甘肽硫转移酶(GlutathioneS-transferases,GST)主要包括4个家族：A、M、T、P，在本专利技术的技术方案中，优选GSTP1。
[0009]进一步，所述GSTP1可来自不同物种，在具体的实施方式中，所述GSTP1包括但不限于GSTP1_HUMAN、GSTP1_MOUSE、GSTP1_RAT、GSTP1_MACMU、GSTP1_XENLA、GSTP1_PIG、GSTP1_BOVIN、GSTP1_MESAU、GSTP1_PONAB、GSTP1_CRILO、GSTP1_CRIMI、GSTP1_CAPHI；优选为
GSTP1_HUMAN，其氨基酸序列见SEQIDNO：1所示。
[0010]金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类低分子量、高金属含量、富含半胱氨酸，普遍存在于生物界的蛋白质。
[0011]进一步，本专利技术所述金属硫蛋白为MT1、MT2或MT3，优选为MT3。
[0012]进一步，所述金属硫蛋白可来自不同物种，在具体的实施方式中，所述MT1包括但不限于MT1A_HUMAN、MT1G_HUMAN、MT1_MOUSE、MT1E_HUMAN、MT1X_HUMAN、MT1F_HUMAN、MT1H_HUMAN、MT1_RAT、MT1A_BOVIN、MT1B_HUMAN、MT1A_PIG、MT1A_HORSE、MT1_DANRE、MT1_BOVIN、MT1M_HUMAN、MT1_CRIGR、MT1_CANLF、MT1A_RABIT、MT1A_SHEEP、MT1L_HUMAN、MT1H_BOVIN、MT1E_PIG、MT1F_PIG、MT1B_HORSE、MT1D_PIG、MT1C_PIG、MT1_CAEEL、MT1_CANGA、MT1_CHLAE、M1BL1_HUMAN、MT1C_SHEEP、MT1B_SHEEP、MT1_DROME、MT1_TETPI、MT1_COLLI、APMT1_AMOMA、MT1_SCYSE、MT1_CYPCA、MT1A_ORYSJ、MT1A_ORYSI、MT1_DROSI、MT1C_ARATH、MT1_TETPY、MT1B_ARATH、MT1_DROAN；
[0013]所述MT2包括但不限于MT2_HUMAN、MT2_MOUSE、MT2_BOVIN、MT2_DANRE、MT2A_PIG、MT2_RAT、MT2_CANLF、MT2_PONAB、MT2_CRIGR、MT2_DROME、MT2_SHEEP、MT2_CANGA、MT2_MACFA、MT2_CHLAE、MT2_MESAU、MT2_CRILO、MT2_STECO、MT2_CAEEL、MT2_COLLI、MT2_CALSI、MT2_SCYSE、MT2_CYPCA、MT2_YARLI；
[0014]所述MT3包括但不限于MT3_BOSMU、MT3_HUMAN、MT3_MACFA、MT3_SHEEP、MT3_HORSE、MT3_MOUSE、MT3_RABIT、MT3_RAT、MT3_BOVIN、MT3_PIG。
[0015]进一步，所述金属硫蛋白优选为MT3_HUMAN，其氨基酸序列见SEQIDNO：2所示。
[0016]进一步，所述蛋白质纳米颗粒是由金属离子诱导而形成的融合蛋白，所述金属离子选自下组：Fe
2+
、Mn
2+
、Zn
2+
、Cu
2+
、Cr
3+
，优选为Fe
2+
。
[0017]进一步，所述蛋白质单体的氨基酸序列如SEQIDNO：4所示。
[0018]本专利技术的第二方面，提供所述蛋白质纳米颗粒用于调控巨噬细胞的功能表型转换的应用。
[0019]进一步，所述调控巨噬细胞的功能表型转换是指抑制巨噬细胞向M2表型极化，和/或促进巨噬细胞向M1表型极化。
[0020]进一步，所述巨噬细胞为肿瘤相关巨噬细胞。
[0021]进一步，所述蛋白质纳米颗粒通过上调细胞内活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)的产生调控巨噬细胞的功能表型转换。
[0022]进一步，所述蛋白质纳米颗粒通过促进TBK1、IRF3以及STAT1的磷酸化调控巨噬细胞的功能表型转换。
[0023]在具体的实施方式中，本专利技术提供的蛋白质纳米颗粒能够诱导细胞内ROS的产生，从而特异性地诱导Raw264.7巨噬细胞向M1转化，诱导细胞内TBK1、IRF3以及STAT1的磷酸化；且可在RNA水平上促进Cxc本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质纳米颗粒用于调控巨噬细胞功能表型的转换应用；所述蛋白质纳米颗粒由蛋白质单体自组装形成，所述蛋白质单体包括由金属硫蛋白、连接肽、谷胱甘肽硫转移酶以从氨基端到羧基端的顺序依次连接组成的融合蛋白，所述连接肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述调控巨噬细胞的功能表型转换是指抑制巨噬细胞向M2表型极化，和/或促进巨噬细胞向M1表型极化。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述巨噬细胞为肿瘤相关巨噬细胞。4.如权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于，所述蛋白质纳米颗粒通过上调细胞内活性氧的产生调控巨噬细胞功能表型的转换；可选地，所述蛋白质纳米颗粒通过促进TBK1、IRF3以及STAT1的磷酸化调控巨噬细胞的功能表型转换。5.一种蛋白质纳米颗粒用于制备药物的应用，所述药物用于调控巨噬细胞的功能表型转换；所述蛋白质纳米颗粒由蛋白质单体自组装形成，所述蛋白质单体包括由金属硫蛋白、连接肽、谷胱甘肽硫转移酶以从氨基端到羧基端的顺序依次连接组成的融合蛋白，所述连接肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。6.如权利要求5所述的应用，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱新杰，林坚，
申请(专利权)人：江苏集萃分子工程研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：