大黄鱼抗肿瘤肽piscidin 5 like及其制备方法与应用，涉及大黄鱼抗菌肽。在分离得到Lc
【技术实现步骤摘要】
大黄鱼抗肿瘤肽piscidin 5 like及其制备方法与应用
[0001]本专利技术涉及大黄鱼抗菌肽，尤其是涉及大黄鱼抗肿瘤肽piscidin 5 like及其制备方法与应用。
技术介绍
[0002]随着对抗菌肽(antimicrobial peptides)研究的发展，学者发现抗菌肽是一类最有希望能完全或部分替代抗生素的候选物。抗菌肽靶向细胞膜的独特作用方式几乎不会引起抗性的产生。因此，在过去的若干年里，大量的工作和努力致力于对抗菌肽的研究
[1-3]，并且越来越多的抗菌肽被从细菌、动物、植物中分离出来。其中生物多样性较高的海洋生物是丰富的抗菌肽的重要来源。
[0003]研究发现一些抗菌肽具有很强的抗肿瘤活性
[4]，且具有很大的潜力发展成为一种药物。我们都知道，癌细胞细胞膜上的能量依赖型转运蛋白，如P-葡糖蛋白，使一些已经存在的抗癌药物(如阿霉素或vinca alkaloids)变得无效，因为获得抗性的P-葡糖蛋白能够降低细胞内药物浓度
[5]。尤其耐药性的产生逐渐在世界范围内都引发了对肿瘤或炎症治疗失败的担忧。以前的研究发现肿瘤细胞或细菌的细胞膜携带有更多的净负电荷，如磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，PS)
[6]、O-糖基化粘蛋白(O-glycosylated mucins)
[7]、脂多糖(Lipopolysaccharides，LPS)、脂磷壁酸(lipoteichoic acid，LTA)。大部分的抗菌肽、或称之为抗肿瘤肽(anticancer peptides，ACPs)拥有两亲性结构、有限结合并插入到带负电的细胞膜以破坏细胞或线粒体膜
[8-9]，因此，不难理解为什么阳性肽更容易靶向并破坏肿瘤细胞、病原菌细胞膜。类似于抗菌机制，ACPs的抗肿瘤作用机制也是多样的。比如CS5931能够激活HCT-8细胞的caspase 9and 3表现出显著的抗增殖、促凋亡活性
[10]；Pleurocidin家族的NRC-03、NRC-07成员能够裂解乳腺癌细胞的细胞膜
[11]；Kahalalide F通过消耗乳腺癌细胞系SKBR3的ErbB3(human epidermal growth factor receptor 3)和抑制Akt(protein kinase B)信号引起细胞的坏死样死亡
[12]；Magainin 2或tachyplesin能够通过线粒体通路激活caspase-9/3诱导凋亡
[13-14]；A9K可穿透进入HeLa细胞影响F-actin的重建，进而引起线粒体的功能紊乱
[15]。
[0004]Piscidins拥有多样的抗性活性，包括抗菌、抗寄生虫、抗病毒、抗肿瘤活性。大黄鱼piscidin-like(Lc-pis)能够结合到HeLa细胞上并引起其死亡，Lc-pis主要聚集在核膜的周围，人工修饰Lc-pis的正电荷增强了该效应，然而，负电荷消除了聚集效应，因此Lc-pis具有抗肿瘤活性
[16]。体外重组表达大黄鱼piscidin 5 like的抗肿瘤活性的检测对于丰富海洋生物源抗肿瘤候选肽提供基础参考依据。
[0005]参考文献：
[0006][1]Hoskin DW,Ramamoorthy A.Studies on anticancer activities of antimicrobial peptides[J].Biochim Biophys Acta,2008,1778:357-375.
[0007][2]Schweizer F.Cationic amphiphilic peptides with cancer-selective toxicity[J].Eur J Pharmacol,2009,625:190-194.
[0008][3]Hancock REW,Sahl HG.Antimicrobial and host-defense peptides as new antiinfective therapeutic strategies[J].Nat Biotechnol,2006,24:1551-1557.
[0009][4]Lin MC,Lin SB,Chen JC,et al..Shrimp anti-lipopolysaccharide factor peptide enhances the antitumor activity of cisplatin in vitro and inhibits HeLa cells growth in nude mice[J].Peptides,2010,31:1019
–
1025.
[0010][5]Zupko I,Rethy B,Hohmann J,et al..Antitumor activity of alkaloids derived from Amaryllidaceae species[J].In Vivo,2009,23:41
–
48.
[0011][6]Dobrzynska J,Szachowicz-Petelska B,Sulkowski S,et al..Changes in electric charge and phospholipids composition in human colorectal cancer cells[J].Mol Cell Biochem,2005,276:113-119.
[0012][7]Dennis JW.N-linked oligosaccharide processing and tumor cell biology[J].Semin Cancer Biol,1991,2:411-420.
[0013][8]Chen HC,Brown JH,Morell JL,Huang CM.Synthetic magainin analogues with improved antimicrobial activity[J].FEBS Lett,1988,236:462
–
466.
[0014][9]Risso A,Braidot E,Sordano MC,et al..BMAP-28,an antibiotic peptide of innate immunity,induces cell death through opening of the mitochondrial permeability transition pore[J].Mol Cell Biol,2002,22:1926
–
1935.
[0015][10]L.Y.Cheng,C.G.Wang,H.Z.Liu,F.X.Wang,L.H.Zheng,J.Zhao,et al.,A novel polypeptide extracted from C本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.Lc-P5L基因的编码序列为：2.Lc-P5L的氨基酸序列为：3.rLc-p5L的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)构建Lc-p5L重组表达载体；2)将步骤1)所得的重组表达载体转化宿主细胞，并对宿主细胞进行诱导表达，获得表达产物；3)分离纯化步骤2)所得的表达产物，获得重组蛋白，即rLc-p5L。4.如权利要求3所述rLc-p5L的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述表达载体选用pET-28a。5....
【专利技术属性】
技术研发人员：郑利兵，苏永全，迟长凤，潘滢，陈佳，郑炜豪，
申请(专利权)人：福建福鼎海鸥水产食品有限公司，
类型：发明
国别省市：
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