一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，包括步骤：1)将茶末粉碎后过筛，加入蒸馏水，水浴加热进行浸提；2)将茶汤用超滤离心管进行超滤浓缩；3)超滤后将溶液利用树脂进行吸附后，加入乙醇醇沉；4)醇沉过后的茶汤，动态柱层析分离茶氨酸。本发明专利技术方法得到的茶氨酸粗品中不含茶多酚、咖啡碱、茶多糖等杂质，茶氨酸粗品的提取率为88％，茶氨酸粗品中L

【技术实现步骤摘要】
一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法


[0001]本专利技术属于茶氨酸提取
，具体涉及一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法。

技术介绍

[0002]茶末，呈细粉末状的茶叶，指茶叶的碎末，在制作茶叶过程中产生的副产品。这些茶叶副产物与茶叶一样，不仅含有很多对人体有益的成分，而且还含有多种特殊生化成分。每生产1kg净茶，就要产生0.1kg的碎茶末，比例达10％，因此提高茶叶副产物利用率，是茶产业增效、农民增收的一条有效渠道。但是，我国茶叶生产几乎保持传统单一的利用模式，对茶叶副产物进行的综合开发利用研究不多，因此仍旧大量的茶叶副产物资源被废弃，导致了资源的浪费。现目前的研究中，对茶末的利用主要在于制作液体茶饮料、茶泡包等；从茶末中提取茶多酚、茶多糖等活性物质并研究其生物活性；从茶末中提取茶氨酸的研究相对较少，因此，继续茶副产物的增值加工利用，既能提高茶叶经济效益，延长产业链，又能丰富社会的物质资源，增加社会效益。
[0003]目前茶氨酸的获取主要来源于化学合成、生物合成和提取分离三个方面。化学合成法有污染和毒性，且难于提纯等难点也是众所周知的，化学合成法一般得到的茶氨酸都是DL-型消旋体，想进一步得到L-型茶氨酸还需要拆分；生物合成法具有污染小，产品安全等优点，但目前由于技术成本较高，如要广泛应用于工业化生产还有很多问题需要解决；提取分离主要包括试剂沉淀法、膜分离法和离子交换层析法，试剂沉淀法操作复杂，得到的茶氨酸的纯度不高，还易造成茶氨酸损失不适合工业生产；膜分离法只能得到纯度不高的茶氨酸粗品，不能起到很好的分离效果；离子交换层析法的关键在于如何选择分离效果最好的树脂。
[0004]竹叶青是四川名茶，具有显著的地方代表性，茶叶经济作为四川农业经济的重要组成部分，茶产业在四川的地位举足轻重。茶叶中的天然茶氨酸均为L型，而合成的茶氨酸大部分为L型和D型的混合物，其中前者在体内的生物活性远高于后者。从茶叶中直接提取、分离和纯化茶氨酸是最为直接、安全、有效的生产途径，并且保证茶氨酸原有的天然化学性质和功能属性。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的旨在提供一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，通过超滤，吸附，离子交换层析等方法，得到一套从竹叶青茶末中分离提取茶氨酸的工艺。
[0006]为了达到上述技术目的，本专利技术具体通过以下技术方案实现：
[0007]一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，包括以下方法：
[0008]1)将茶末粉碎后过筛，加入蒸馏水，水浴加热进行浸提；
[0009]2)将茶汤用超滤离心管进行超滤浓缩；
[0010]3)超滤后将溶液利用树脂进行吸附后，加入乙醇醇沉；
[0011]4)醇沉过后的茶汤，动态柱层析分离茶氨酸。
[0012]进一步的，步骤1)中加入蒸馏水的液固比为15:1mL/g。
[0013]进一步的，步骤1)中水浴加热温度为80℃。
[0014]进一步的，步骤1)中浸提时间为60min。
[0015]进一步的，步骤2)中超滤浓缩选用截留分子量为10KD的超滤离心管。
[0016]进一步的，步骤3)中吸附选用PA6树脂吸附210min，优选的，PA6树脂使用前用超纯水溶胀后浮选，再用0.5mol/L盐酸浸泡一天，用去离子水洗至中性，乙醇浸泡一天，用去离子水洗至流出液加水不变浑浊为止，然后用2％的氢氧化钠浸泡一天，最后用超纯水洗至中性，保存在乙醇中，待用。
[0017]进一步的，步骤4)中分离茶氨酸选用NKA-II树脂，每次上样50mL，以1BV/h的流速动态洗脱并分段收集。优选的，收集1.5BV～4.5BV阶段的洗脱液，冷冻干燥后获得茶氨酸粗品。
[0018]本专利技术的有益效果为：
[0019]本专利技术提供了一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，该方法操作简单，得到的提取物纯度高，经试验证明冷冻干燥后获得茶氨酸粗品中，L-茶氨酸含量纯度为91.23％，而且茶氨酸粗品的提取率为88％，茶氨酸粗品中不含茶多酚、咖啡碱、茶多糖等杂质。
附图说明
[0020]图1是本专利技术茶氨酸分离纯化工艺路线；
[0021]图2是本专利技术PA6树脂静态吸附茶多酚曲线；
[0022]图3是本专利技术茶氨酸提取物红外光谱图。
具体实施方式
[0023]下面将结合本专利技术具体的实施例，对本专利技术技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0024]实施例1
[0025]如图1所示，本实施例提供了一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，具体包括以下步骤：
[0026]1)将制作茶叶过程中产生的茶末收集，用粉碎机粉碎过60目筛，按照液固比15:1加入蒸馏水，在80℃水浴浸提60min。
[0027]2)选取截留分子量为10KD的超滤离心管，取浸提的茶汤进行超滤浓缩。
[0028]新的超滤管是干燥的，使用前需要加入一定量的超纯水没过超滤膜，放入冰箱中预冷几分钟，然后将水倒出即可使用。超滤管可重复使用，在使用后倒出超滤管内残留液体，先用超纯水润洗几次，若管内有残留蛋白沉淀，加入超纯水后用枪头轻轻吹打至沉淀悬浮后倒掉，不可用水猛冲以免造成的膜的损坏。随后加入0.2mol的氢氧化钠溶液，室温放置20min后离心10min，倒出残留的氢氧化钠溶液。将管芯浸入装满超纯水的1L烧杯中，放置2h，后重复几次不断稀释氢氧化钠的浓度。管芯洗净后加满超纯水，管内也加满水，将管芯
放回管中，盖上管盖，放到4℃环境下可长期存放。
[0029]3)将超滤后的茶汤利用PA6树脂静态吸附。超滤后的茶汤中主要的小分子物质为茶多酚、茶氨酸、可溶性多糖、咖啡碱等，其中茶多酚的含量较高，选用PA6树脂进行吸附去除。将得到的茶汤加入4倍体积的95％乙醇溶液，常温下沉淀3h，然后离心15min，取上清茶汤。
[0030]PA6树脂使用前用超纯水溶胀后浮选，再用0.5mol/L盐酸浸泡一天，用去离子水洗至中性，乙醇浸泡一天，用去离子水洗至流出液加水不变浑浊为止，然后用2％的氢氧化钠浸泡一天，最后用超纯水洗至中性，保存在乙醇中，待用。
[0031]4)量取500mL预处理过的NKA-II树脂，用超纯水洗净后湿法装于5cm
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30cm的玻璃柱中，为避免出现气泡和断层现象，装柱使用玻璃棒进行引流，最后用超纯水动态平衡1-2h，待用。取步骤3)得到的茶汤，制成茶氨酸浓度为1mg/ml的溶液，每次上样50mL，以1BV/h的流速动态洗脱，收集1.5BV～4.5BV阶段的洗脱液，冷冻干燥后获得茶氨酸粗品。
[0032]实施例2
[0033]超滤后的茶汤中主要的小分子物质为茶多酚、茶氨酸、可溶性多糖、咖啡碱等。其中茶多酚的含量较高，选择PA6树脂静态吸附，对超滤后的茶汤进行吸附，绘制静态吸附曲线。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，其特征在于，包括以下方法：1)将茶末粉碎后过筛，加入蒸馏水，水浴加热进行浸提；2)将茶汤用超滤离心管进行超滤浓缩；3)超滤后将溶液利用树脂进行吸附后，加入乙醇醇沉；4)醇沉过后的茶汤，动态柱层析分离茶氨酸。2.根据权利要求1所述的一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，其特征在于，步骤1)中加入蒸馏水的液固比为15:1mL/g。3.根据权利要求1所述的一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，其特征在于，步骤1)中水浴加热温度为80℃。4.根据权利要求1所述的一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，其特征在于，步骤1)中浸提时间为60min。5.根据权利要求1所述的一种竹叶青茶末中提取茶氨酸的方法，其特征在于，步骤2)中超滤浓缩选用截留分子量为10KD的超滤离心管。6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：李玉锋，兰林，任昱至，袁源，钱叶迁，李宇航，谢玲，汪晟羽，张晋森，周冠伟，
申请(专利权)人：西华大学，
类型：发明
国别省市：