丹参细胞色素P450基因CYP72A395的基因克隆引物、表达载体、催化功能及应用制造技术

本发明专利技术公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP72A395的编码基因序列；本发明专利技术所提供的CYP72A395基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明专利技术检测了CYP72A395的转录表达谱，发现其在丹参花和根周皮高丰度表达；构建了CYP72A395‑RNAi载体及CYP72A395‑过表达(CYP72A395‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在CYP72A395‑RNAi株系中，丹参酮类化合物含量升高，而在CYP72A395‑oe株系中，丹参酮类化合物含量显著降低。本发明专利技术提供的CYP72A395具有负调控丹参酮类化合物生物合成的功能，可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究为提高丹参中丹参酮产量提供了新思路，并为丹参酮合成生物学研究奠定基础。

【技术实现步骤摘要】
丹参细胞色素P450基因CYP72A395的基因克隆引物、表达载体、催化功能及应用
本专利技术属于植物分子生物学及基因工程领域，具体涉及一种反向调控丹参酮生物合成的CYP72A395的基因克隆和功能研究。
技术介绍
丹参(SalviamiltiorrhizaBunge)，为唇形科鼠尾草属多年生双子叶植物，根和根茎入药。丹参主要有效成分包括脂溶性的丹参酮类成分和水溶性的丹酚酸类成分。目前，已有40余种丹参酮类化合物从丹参中分离出来，其中主要包括二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA等化合物，它们具有抗氧化、扩张血管、抗血栓、抗菌消炎以及抗肿瘤等多种药理作用，在制药、美容以及化妆品等领域得到广泛应用。随着人们生活水平的提高，心脑血管疾病的发病率逐年增长，因此，含有丹参的药品的临床需求量日益增大，通过对丹参酮合成调控机制的研究，对于利用基因工程手段提高丹参中丹参酮的含量具有重要意义。细胞色素P450(CytochromeP450，CYP450)在生物界中广泛存在，是一种血红蛋白结合蛋白，具有单加氧酶活性。CYP450是含有亚铁本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种反向调控丹参酮生物合成的细胞色素P450基因CYP72A395的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种反向调控丹参酮生物合成的细胞色素P450基因CYP72A395的编码基因，其核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。


2.根据权利要求1所述的反向调控丹参酮生物合成的相关基因CYP72A395，其特征在于，所述基因CYP72A395编码蛋白质的氨基酸残基序列如SEQIDNo.2所示。


3.一种植物RNAi双元表达载体，其特征在于所述RNAi载体...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗红梅，张建红，徐志超，宋经元，
申请(专利权)人：中国医学科学院药用植物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11