【技术实现步骤摘要】
一种新型冠状病毒IgA抗体磁微粒化学发光法检测试剂盒
本专利技术属于免疫分析检测
，尤其是涉及一种新型冠状病毒IgA抗体磁微粒化学发光法检测试剂盒。
技术介绍
首次感染和反复接触病毒时病毒载量高，病原体的特定蛋白如Covid-19的S蛋白和N蛋白等会刺激免疫系统引起抗体应答。T.M.Gallagher研究发现冠状病毒刺突蛋白(S蛋白)是一种I型跨膜包膜糖蛋白，由负责与病毒结合和融合的S1和S2两个结构域组合而成，S1中间片段是一个受体结合域，可以与靶细胞上的血管紧张素转化酶(ACE2)特异性结合，从病毒表面突出，可以更早地与宿主细胞接触，是中和抗体的主要诱导剂；S2结构域包含一个融合肽和两个七肽重复序列，负责病毒与靶细胞膜之间的融合。病毒S蛋白上的RBD与靶细胞上的ACE2结合后，S2通过HR1和HR2区之间的相互作用而发生构象改变，形成融合核心，并使病毒和靶细胞膜紧密接近，从而导致病毒融合进入细胞。全长的S蛋白包含RBD和其他病毒功能域以及多个抗原中和表位，因此与单独的RBD相比，可诱导出更有效的中和...
【技术保护点】
1.一种新型冠状病毒IgA抗体磁微粒化学发光法检测试剂盒，其特征在于：包括磁性颗粒-抗FITC抗体、FITC标记新型冠状病毒重组抗原、碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记鼠抗人IgA单克隆抗体、化学发光底物、牛血清白蛋白缓冲液。/n
【技术特征摘要】
1.一种新型冠状病毒IgA抗体磁微粒化学发光法检测试剂盒，其特征在于：包括磁性颗粒-抗FITC抗体、FITC标记新型冠状病毒重组抗原、碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记鼠抗人IgA单克隆抗体、化学发光底物、牛血清白蛋白缓冲液。
2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgA抗体磁微粒化学发光法检测试剂盒，其特征在于：FITC标记新型冠状病毒抗原中的新型冠状病毒抗原为S-RBD蛋白。
3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgA抗体磁微粒化学发光法检测试剂盒，其特征在于：所述磁性颗粒-抗FITC抗体的制备，包括以下步骤，将四氧化三铁微球用戊二醛进行活化，室温混匀4-6h后，用0.02-0.05MPBSPH＝7.4的缓冲液清洗三次，并用该溶液进行悬浮，浓度为50-80mg/mL，之后，每毫升悬浮液中，加入鼠抗FITC抗体约100-180ug，于37℃混匀温育4-10h，用等体积的0.02-0.05MPBS、质量分数5％BSApH＝7.4缓冲液于37℃封闭1小时；最后，用质量分数0.5％BSA、0.02-0.05MTris-HClpH＝8.0的缓冲液清洗三次；所四氧化三铁的微球的粒径为0.1-0.5μm。
4.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgA抗体磁微粒化学发光法检测试剂盒，其特征在于：还包括牛血清白蛋白缓冲液，其制备包括如下步骤，将2.1-2.6gBSA溶于2.1-2.8L0.15-0.20M的PBS缓冲液中，pH值范围在7.4±0.2，搅拌至完全溶解，并加入2.1-2.5mLProClinTM300搅拌混匀30-60min。
5.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgA抗体磁微粒化学发光法检测试剂盒，其特征在于：FITC标记新型冠状病毒重组抗原的制备，包括如下步骤：
1)将待标记重组抗原置于透析袋中，透析缓冲液为0.02-0.05M碳酸盐缓冲液，透析1-2h；
2)将FITC溶于二甲基亚砜中，配制浓度为1-2mg/ml；
3)将透析完成的重组抗原与FITC按照质量比为1:(0.5-1)的比例进行混合，轻摇混匀，2-8℃避光反应8-12h；
4)向上述反应混合液中加入1-5M的NH4CL，并使终浓度达到30-60mM，置于2-8℃反应2-4h，以终止反应；
5)将上述完成的标记液置于0.01-0.05M的PBS缓冲液中透析12h后，取出标记好的原料，加入等体积的甘油保存备用。
6.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgA抗体磁微粒化学发光法检测试剂盒，其特征在于：
辣根过氧化酶标记鼠抗人IgA单克隆抗体的制备，包括如下步骤，
A、辣根过氧化物酶(HRP)活化
1)配制5-10mg/mLHRP溶液；
2)配制10-20mg/mL过碘酸钠NaIO4溶液；
3)将步骤1)和步骤2)配制溶液按体积比(1-2)：1混匀，2-8℃避光反应30min；
4)配制浓度为10-40μL/mL的乙二醇水溶液，与步骤3)配制的溶液以相同体积混合，常温避光反应0.5-2h，活化即完成；
B辣根过氧化酶标记鼠抗人IgA单克隆抗体
1)将待标记IgA单克隆抗体置...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘萍，栾大伟，张振斌，史光辉，何景珍，田鸽，
申请(专利权)人：博奥赛斯重庆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50
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