一种生产法尼烯的酿酒酵母工程菌的构建和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种生产法尼烯的酿酒酵母工程菌的构建和应用，属于合成生物学技术领域。本发明专利技术通过染色体整合表达MVA途径限速酶编码基因tHMG1和染色体整合融合表达ERG20与法尼烯合成酶编码基因Fsso，构建了一株产法尼烯的酿酒酵母工程菌。本发明专利技术获得的酿酒酵母工程菌构建操作简单，摇瓶发酵能够积累1.0g/L法尼烯，具有工业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种生产法尼烯的酿酒酵母工程菌的构建和应用
本专利技术涉及一种生产法尼烯的酿酒酵母工程菌的构建和应用，属于合成生物学

技术介绍
法尼烯(farnesene)，分子式为C15H24，是一种最简单的链状倍半萜化合物。自然界中，法尼烯存在α-法尼烯和β-法尼烯两种倍型。法尼烯易挥发，具有香脂香气。法尼烯合成通过法尼烯合成酶一步转化即可完成。植物中，前体法尼基焦磷酸(FPP)的天然合成途径主要包括两种：甲羟戊酸(MVA)途径和2-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸(MEP)途径。通过植物提取，需要消耗大量的人力和物力，获得的法尼烯含量很低，而且成分不单一。通过代谢工程和合成生物学策略，法尼烯的微生物合成已经成功实现。目前，利用代谢工程改造酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)合成倍半萜化合物步骤复杂，且过多的代谢改造会使菌体生长负担加重，无法提供足够多的微生物细胞去合成法尼烯。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种生产法尼烯的酿酒酵母工程菌。本专利技术为酿酒酵母倍半萜化合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生产法尼烯的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌染色体整合表达甲羟戊酸途径限速酶编码基因tHMG1，同时整合表达法尼烯合成酶编码基因Fsso和法尼基焦磷酸合成酶编码基因ERG20；所述整合表达甲羟戊酸途径限速酶编码基因tHMG1是以GAL作为启动子，以LYS2作为整合位点；所述整合表达法尼烯合成酶编码基因Fsso和ERG20即表达ERG20-Fsso，是以GAL作为启动子，以TPI1作为终止子，以GAL80作为整合位点，融合表达法尼烯合成酶编码基因Fsso和ERG20。/n

【技术特征摘要】
1.一种生产法尼烯的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌染色体整合表达甲羟戊酸途径限速酶编码基因tHMG1，同时整合表达法尼烯合成酶编码基因Fsso和法尼基焦磷酸合成酶编码基因ERG20；所述整合表达甲羟戊酸途径限速酶编码基因tHMG1是以GAL作为启动子，以LYS2作为整合位点；所述整合表达法尼烯合成酶编码基因Fsso和ERG20即表达ERG20-Fsso，是以GAL作为启动子，以TPI1作为终止子，以GAL80作为整合位点，融合表达法尼烯合成酶编码基因Fsso和ERG20。


2.根据权利要求1所述的酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌以酿酒酵母YPH499为宿主。


3.根据权利要求1所述的酿酒酵母工程菌，其特征在于，所述酿酒酵母工程菌以pMD-19Tsimple为整合表达...

【专利技术属性】
技术研发人员：石贵阳，王均华，李由然，朱惠霖，张梁，丁重阳，徐沙，顾正华，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32