一种紫草素抗菌最强部位的制备方法技术

本发明专利技术涉及中药技术领域，尤其涉及一种紫草素氯抗菌最强部位的制备方法。其技术方案：一种紫草素抗菌最强部位的制备方法，包括如下步骤：S1：称取干燥的紫草，粉碎后，加入乙醇反复浸提多次直至浸提液无色；收集浸提液，浓缩，得醇提物；S2：将醇提物与纯净水混悬，然后加入石油醚，分离除去石油醚部位；S3：在石油醚萃取后的剩余液体中，加入乙酸乙酯，反复萃取多次直至萃取液无色，分离除去乙酸乙酯部位；S4：在乙酸乙酯萃取后的剩余液体中，加入氯仿，反复萃取多次直至萃取液无色，收集、合并萃取液，回收溶剂，浓缩至浸膏，即得氯仿萃取部位。本发明专利技术提供了一种紫草素最强抗菌部位的制备方法。

【技术实现步骤摘要】
一种紫草素抗菌最强部位的制备方法
本专利技术涉及中药
，尤其涉及一种紫草素氯抗菌最强部位的制备方法。
技术介绍
紫草是紫草科植物新疆紫草或内蒙古紫草的干燥根，为常用中药之一，最早记载在《神农本草经》中。其味甘、咸，性寒，归心、肝经，具有清热、活血、解毒等功能。新疆紫草也被称为软紫草，其主要活性成分具有多种生理活性，包括抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等。紫草具有抗菌作用，并有相关文献作为佐证。但是关于紫草抗菌，大多数研究关注于其综合提取物的抗菌活性，未见其有进一步筛选抗菌最强有效部位的相关报道，这使得紫草的临床应用受到了限制。
技术实现思路
本专利技术克服了现有技术的不足，提供一种紫草素最强抗菌部位的制备方法，解决了现有技术中仅能得到紫草素综合提取物的问题。为解决上述的技术问题，本专利技术采用以下技术方案：一种紫草素抗菌最强部位的制备方法，包括如下步骤：S1：称取干燥的紫草，粉碎后，加入乙醇反复浸提多次直至浸提液无色；收集浸提液，浓缩，得醇提物；S2：将醇提物与纯净水混悬，然后加入石油醚，分离除去石油醚部位；S3：在石油醚萃取后的剩余液体中，加入乙酸乙酯，反复萃取多次直至萃取液无色，分离除去乙酸乙酯部位；S4：在乙酸乙酯萃取后的剩余液体中，加入氯仿，反复萃取多次直至萃取液无色，收集、合并萃取液，回收溶剂，浓缩至浸膏，即得氯仿萃取部位。经药理实验证明，紫草95％乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌的MIC值分别为20g·L-1、50g·L-1。氯仿萃取物对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌的MIC值均为5g·L-1。石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌的MIC值分别为20g·L-1。石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物对粪肠球菌的MIC值分别为20g·L-1。因此，氯仿萃取部位具有显著的抗菌活性。作为本专利技术的优选方案，在步骤S4之后，进行以下步骤：S5：从氯仿萃取部位分离出异戊酰紫草素。氯仿萃取部位中含有紫草素、左旋紫草素、β-β-二甲基丙烯紫草素、乙酰紫草素、异戊酰紫草素。紫草素、左旋紫草素、β-β-二甲基丙烯紫草素、乙酰紫草素、异戊酰紫草素对金黄色葡萄球菌的MIC值分别为1.98mmol/L、0.87mmol/L、2.17mmol/L、0.69mmol/L、0.13mmol/L，则异戊酰紫草素抑菌效果较好。异戊酰紫草素对粪肠球菌的MIC值为0.26mmol/L(P<0.01)。本专利技术提取并筛选出氯仿萃取部位具有显著的抗菌活性，氯仿萃取部位中单体异戊酰紫草素抑菌效果最显著。作为本专利技术的优选方案，在步骤S1中，加入乙醇反复浸提时，先加紫草粉1～2倍量的95％乙醇，室温浸泡24～72h后，取出浸提液加入新的乙醇，反复浸提多次直至浸提液无色。先加1～2倍量的95％乙醇在室温浸泡24～72h，保证紫草粉能被充分浸提，提高浸提率。作为本专利技术的优选方案，在步骤S1中，加入乙醇反复浸提时，先加紫草粉1.5倍量的95％乙醇，室温浸泡48h后，取出浸提液加入新的乙醇，反复浸提多次直至浸提液无色。当加入的乙醇的量为紫草粉的1.5倍，且浸泡时间为48h时，浸提效果最好。作为本专利技术的优选方案，在步骤S2中，将醇提物与纯净水混悬时，醇提物与纯净水的比例为1：1，然后加入石油醚的体积为醇提物与纯净水混悬液体积的1倍。醇提物与纯净水的比例为1：1，保证醇提物与纯净水充分混悬。加入石油醚的体积为醇提物与纯净水混悬液体积的1倍，可有效得到石油醚部位。作为本专利技术的优选方案，在步骤S3中，加入的乙酸乙酯的体积为石油醚萃取后的剩余液体体积的1倍。加入的乙酸乙酯的体积为石油醚萃取后的剩余液体体积的1倍时，可有效得到乙酸乙酯部位。作为本专利技术的优选方案，在步骤S4中，加入的氯仿的体积为乙酸乙酯萃取后的剩余液体体积的1倍。加入的氯仿的体积为乙酸乙酯萃取后的剩余液体体积的1倍，可有效得到氯仿萃取部位。作为本专利技术的优选方案，在步骤S1中，浓缩时，将浸提液于40℃水浴锅中用旋转蒸发仪旋转浓缩。浸提液在40℃水浴锅中用旋转蒸发仪旋转浓缩，可提高浓缩效率，提升浓缩效果。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：1、本专利技术通过在紫草粉中加入乙醇，得到醇提物，再依次通过在剩余液体中加入石油醚、乙酸乙酯、氯仿，得到氯仿萃取部位，从而精确分离出紫草中抗菌活性最强部位。氯仿萃取部位具有较强抗金黄色葡萄球菌和粪肠球菌的功效，相比于紫草综合提取物的抗菌活性大大提高，可用于可压疮导致的开放性皮肤溃疡及细菌感染；可用于缓解人们近年来对抗生素的不合理使用导致的耐药菌不断增加的问题，也可用于作为对青霉素过敏的替代抗菌药。2、氯仿萃取部位中异戊酰紫草素对金黄色葡萄球菌的MIC值分别为0.13mmol/L，则异戊酰紫草素抑菌效果较好。异戊酰紫草素对粪肠球菌的MIC值为0.26mmol/L(P<0.01)。本专利技术通过将异戊酰紫草素，得到单体异戊酰紫草素，其抑菌效果最显著。3、本专利技术通过对紫草95％乙醇提取物、石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌的MIC值进行测定，发现氯仿萃取部位具有最强的抗菌活性。通过分离氯仿萃取部位中的紫草素、左旋紫草素，β-β-二甲基丙烯紫草素、乙酰紫草素、异戊酰紫草素，并进行金黄色葡萄球菌、粪肠球菌的MIC值进行测定，发现氯仿萃取部位中异戊酰紫草素的抗菌活性最强。因此，本专利技术通过科学的实验，分析出紫草抗菌活性最强部位，实验可靠简便。附图说明图1是紫草各部位的提取、分离流程图；图2是紫草提取物及不同溶剂萃取物抑菌圈直径；图3是紫草乙醇提取物、不同溶剂萃取物对金黄色葡萄球菌和粪肠球菌生长动力学的影响；图4是异戊酰紫草素对金黄色葡萄球菌和粪肠球菌生物扫描电子显微镜SEM观察结果；图5是异戊酰紫草素对金黄色葡萄球菌和粪肠球菌生物透射电子显微镜TEM观察结果。图中，A-石油醚；B-乙酸乙酯；C-氯仿；D-正丁醇。具体实施方式下面结合附图，对本专利技术作详细的说明。为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例：一种紫草素抗菌最强部位的制备方法，包括如下步骤：S1：称取干燥的紫草，粉碎后，加紫草粉1.5倍量的95％乙醇，室温浸泡48h后，取出浸提液加入新的乙醇，反复浸提多次直至浸提液无色；收集浸提液，于40℃水浴锅中用旋转蒸发仪旋转浓缩，得醇提物；S2：将醇提物与纯净水1:1混悬，然后加入1倍体积的石油醚，分离除去石油醚部位；S3：在石油醚萃取后的剩余液体中，加入1倍体积的乙酸乙酯，反复萃取多次直至萃取液无色，分离除去乙酸乙酯部位；S4：在乙酸乙酯萃取后的剩余液体中，加入1倍体积的氯仿，反复萃取多次直至萃取液无色，收集、合并萃取液，回收溶剂，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种紫草素抗菌最强部位的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1：称取干燥的紫草，粉碎后，加入乙醇反复浸提多次直至浸提液无色；收集浸提液，浓缩，得醇提物；/nS2：将醇提物与纯净水混悬，然后加入石油醚，分离除去石油醚部位；/nS3：在石油醚萃取后的剩余液体中，加入乙酸乙酯，反复萃取多次直至萃取液无色，分离除去乙酸乙酯部位；/nS4：在乙酸乙酯萃取后的剩余液体中，加入氯仿，反复萃取多次直至萃取液无色，收集、合并萃取液，回收溶剂，浓缩至浸膏，即得氯仿萃取部位。/n

【技术特征摘要】
1.一种紫草素抗菌最强部位的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：称取干燥的紫草，粉碎后，加入乙醇反复浸提多次直至浸提液无色；收集浸提液，浓缩，得醇提物；
S2：将醇提物与纯净水混悬，然后加入石油醚，分离除去石油醚部位；
S3：在石油醚萃取后的剩余液体中，加入乙酸乙酯，反复萃取多次直至萃取液无色，分离除去乙酸乙酯部位；
S4：在乙酸乙酯萃取后的剩余液体中，加入氯仿，反复萃取多次直至萃取液无色，收集、合并萃取液，回收溶剂，浓缩至浸膏，即得氯仿萃取部位。


2.根据权利要求1所述的一种紫草素抗菌最强部位的制备方法，其特征在于，在步骤S4之后，进行以下步骤：
S5：从氯仿萃取部位分离出异戊酰紫草素。


3.根据权利要求1所述的一种紫草素抗菌最强部位的制备方法，其特征在于，在步骤S1中，加入乙醇反复浸提时，先加紫草粉1～2倍量的95％乙醇，室温浸泡24～72h后，取出浸提液加入新的乙醇，反复浸提多次直至浸提液无色。


4...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦冬梅，邹楠，袁今奇，努力比亚·阿不都克尤木，李聪，姚佳，侯金秋，孟凌宇，杜梦鸽，
申请(专利权)人：石河子大学，
类型：发明
国别省市：新疆;65