一种便可通片标准指纹图谱的构建方法和测定便可通片成分含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种便可通片标准指纹图谱的构建方法和测定便可通片成分含量的方法，包括如下步骤：供试品溶液的制备；对照品溶液的制备：将芦荟苷用甲醇和0.1％体积浓度醋酸水混合溶液溶解，将柚皮苷、新橙皮苷和松果菊苷分别用甲醇溶解，分别得到对照品溶液；高效液相色谱检测：色谱条件为：采用流动相A为甲醇，流动相B为0.1％体积浓度的醋酸水溶液，总流速为1ml/min；进行梯度洗脱；建立便可通片标准指纹图谱；本发明专利技术的指纹图谱的峰型较好，分离度、对称因子和理论塔板数均较好；本发明专利技术可以对结构差异较小的成分进行有效的分离，可以更好的标准产品的质量，更准确地实现产品中有效成分含量的同时测定。

【技术实现步骤摘要】
一种便可通片标准指纹图谱的构建方法和测定便可通片成分含量的方法
本专利技术属于医药
，具体涉及一种便可通片标准指纹图谱的构建方法和测定便可通片成分含量的方法。
技术介绍
便秘是常见病、多发病，针对便秘有效治疗药物缺少，依托传统中医药理论，开发以治疗便秘为主的创新中药，是市场需求导向，也是继承发展中医药传统的重要创举。创新中药“便可通片”是以治疗便秘为主的创新中药，已获得临床研究批件，以便可通片研发创新中药对于中医药事业的可持续发展具有极大的战略意义。便可通片由芦荟3～6重量份、枳实6～11重量份、决明子6～11重量份、火麻仁6～11重量份、肉苁蓉6～11重量份、桃仁6～11重量份、当归6～11重量份、玄参18～25重量份和生地黄18～25重量份组成。目前中成药的质量标准多采用单一指标成分的含量，不符合中医药多成分、多靶点、多途径的作用特点。中药HPLC指纹图谱是采用高效液相色谱手段标定中药共有特征峰图谱，能够综合反映中成药制剂的主要组分情况，是一种综合的、整体的、可量化的质量评价手段。目前，利用中药指纹图谱来进行中成药质量评价，说明批次间的一致性已经被国内外广泛接受和认可。现有该品种的质量标准仅对处方中的阿魏酸进行定量测定，标准较简单，且阿魏酸含量较低，难以全面控制产品质量，尚无贴合中医药特色的质量评价标准。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种便可通片标准指纹图谱的构建方法和测定便可通片成分含量的方法，本专利技术的指纹图谱具有较好的可控性，峰的数量多，峰形好，峰的分离度好，并且重复高，可有效分离结构相近物质，有利于对便可通片的质量进行控制，本专利技术能同时对四种有效成分进行鉴别。本专利技术提供一种便可通片标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1)供试品溶液的制备：取便可通片，除去包衣，研磨，和甲醇混合，超声处理，定容，过滤，取滤液，得供试品溶液；2)对照品溶液的制备：将芦荟苷用甲醇和0.1％体积浓度醋酸水混合溶液溶解，将柚皮苷、新橙皮苷和松果菊苷分别用甲醇溶解，分别得到芦荟苷、柚皮苷、新橙皮苷、松果菊苷对照品溶液；3)高效液相色谱检测：色谱条件为：色谱柱为C18反相色谱柱；柱温为25℃；检测波长为300nm，采用流动相A为甲醇，流动相B为0.1％体积浓度的醋酸水溶液，总流速为1ml/min；进行梯度洗脱，梯度洗脱程度见下表1：表1梯度洗脱程序表4)便可通片标准指纹图谱的建立：吸取供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪中，用步骤3)的高效液相色谱检测，匹配16个共有峰，确定6个特征峰，建立便可通片标准指纹图谱。优选的，步骤1)所述供试品溶液的制备方法中，供试品的质量浓度为0.02g/ml。优选的，步骤1)所述供试品溶液的制备方法中，超声处理的功率为500w，频率为40kHz，超声处理的温度低于25℃。优选的，步骤3)的色谱条件中，色谱柱为Cl8色谱柱，柱长为25cm，内径为4.6mm，粒径为5μm。优选的，所述步骤2)对照品溶液的制备方法中，甲醇和0.1％体积浓度醋酸水混合溶液的体积比为39:61。优选的，所述芦荟苷质量浓度为0.04618～0.9235mg/mL，柚皮苷质量浓度为0.03780～0.7561mg/mL，新橙皮苷质量浓度为0.03755～0.7510mg/mL，松果菊苷质量浓度为0.02598～0.5196mg/mL。优选的，所述吴茱萸药材特征图谱有6个特征峰，其中2号峰为松果菊苷，4号峰为柚皮苷，5号峰为新橙皮苷，9号峰为芦荟苷，15号峰为芦荟大黄素，16号峰为大黄酸；表2特征图谱6个特征峰的相对保留时间以9号峰为参照峰，所述吴茱萸药材特征图谱的6个特征峰的相对保留时间如表2所示。一种利用便可通片标准指纹图谱的测定便可通片成分含量的方法，步骤为，根据便可通片标准指纹图谱计算得到松果菊苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷的含量。目前，中药特别是中药混合物的指纹图谱构建中，由于中药包括多种原料，因此为了便于控制产品质量，有效成分往往难以确定，或者多种有效成分的峰形、分离度等并不好，导致目前一般以阿魏酸一种成分来作为质量标准，结果并不理想。本专利技术的有益效果是：本专利技术立足于便可通片的标准指纹图谱的建立方法，及同时测定4种化学成分的含量测定方法，深化质量标准，精准控制指标，实现符合中医药特色的中成药便可通片质量评价体系，提升产品质量，稳定品质。本专利技术采用中药指纹图谱技术等多成分分析法，立足于便可通片的标准指纹图谱的建立方法；设定中药活性成分含量范围，建立同时测定4种化学成分的含量测定方法。首次对不同批次便可通片HPLC指纹图谱研究，建立便可通片指纹图谱，对主要共有峰进行归属，并对主要成分芦荟苷、柚皮苷、新橙皮苷、松果菊苷进行定量测定，深化质量标准，精准控制指标，实现符合中医药特色的中成药便可通片质量评价体系，提升产品质量，稳定品质。本专利技术建立了10批便可通片的指纹图谱，采用指纹图谱软件共标定出16个共有峰，相似度均大于0.95，说明所建立的指纹图谱具有较好的可控性，为便可通片的质量评价提供依据。方法学试验表明该色谱方法可同时定量分析芦荟苷、柚皮苷、新橙皮苷、松果菊苷的含量。综上所述，采用上述建立的HPLC指纹图谱方法，同时对便可通片药材、饮片与成品，进行指纹图谱检测和有效成分含量测定，实现终端质控向生产过程质量控制过渡，提升产品质量，稳定品质，为便可通片的上市生产奠定基础。本专利技术的指纹图谱的相似度非常高，表明各个共有峰的选择非常好，产品共性高；本专利技术的指纹图谱的峰型较好，分离度、对称因子和理论塔板数均较好；本专利技术可以对结构差异较小的成分进行有效的分离，可以更好的标准产品的质量，更准确地测定产品有效成分的含量。本法利用HPLC指纹图谱对便可通片进行质量控制，建立其标准图谱，进行相似度评价，同时实现了4个指标成分含量的同时测定，相比于现有相关报道，更加全面的反映了便可通片制剂的质量，保证了制剂批次间的一致性。附图说明图1为10批便可通片HPLC指纹图谱。图2为便可通片标准指纹图谱和对照品的图谱比较图。图3为便可通片标准指纹图谱和原药材的图谱比较图。图4为对比例1的HPLC指纹图谱。图5为对比例2的HPLC指纹图谱。图6为对比例3的HPLC指纹图谱。图7为对比例4的HPLC指纹图谱。图8为0h的芦荟苷对照品溶液的指纹图谱。图9为4h的以甲醇做溶剂的芦荟苷对照品溶液的指纹图谱。图10为4h的以流动相为溶剂的芦荟苷对照品溶液的指纹图谱。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术的具体实施方式做进一步描述，并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围内。实施例1便可通片标准指纹图谱的建立为使药材有足够的代表性，收集不同产地的药材或不同商品规格等级的药材作为供试品。<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种便可通片标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：/n1)供试品溶液的制备：取便可通片，除去包衣，研磨，和甲醇混合，超声处理，定容，过滤，取滤液，得供试品溶液；/n2)对照品溶液的制备：将芦荟苷用甲醇和0.1％体积浓度醋酸水混合溶液溶解，将柚皮苷、新橙皮苷和松果菊苷分别用甲醇溶解，分别得到芦荟苷、柚皮苷、新橙皮苷、松果菊苷对照品溶液；/n3)高效液相色谱检测：/n色谱条件为：色谱柱为C

【技术特征摘要】
1.一种便可通片标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)供试品溶液的制备：取便可通片，除去包衣，研磨，和甲醇混合，超声处理，定容，过滤，取滤液，得供试品溶液；
2)对照品溶液的制备：将芦荟苷用甲醇和0.1％体积浓度醋酸水混合溶液溶解，将柚皮苷、新橙皮苷和松果菊苷分别用甲醇溶解，分别得到芦荟苷、柚皮苷、新橙皮苷、松果菊苷对照品溶液；
3)高效液相色谱检测：
色谱条件为：色谱柱为C18反相色谱柱；柱温为25℃；检测波长为300nm，采用流动相A为甲醇，流动相B为0.1％体积浓度的醋酸水溶液，总流速为1ml/min；进行梯度洗脱，梯度洗脱程度见下表1：
表1梯度洗脱程序表



4)便可通片标准指纹图谱的建立：吸取供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪中，用步骤3)的高效液相色谱检测，匹配16个共有峰，确定6个特征峰，建立便可通片标准指纹图谱。


2.如权利要求1所述的便可通片标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤1)所述供试品溶液的制备方法中，供试品的质量浓度为0.02g/ml。


3.如权利要求1或2所述的便可通片标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，步骤1)所述供试品溶液的制备方法中，超声处理的功率为500w，频率为40kHz，超声处理的温度低于25℃。


4.如权利要求1或2所述的便可通片...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖娟，唐纯玉，万丹，梁雪娟，唐代凤，张水寒，王雄龙，周华荣，李震，
申请(专利权)人：湖南时代阳光药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43