一种用WSL细胞系制备非洲猪瘟病毒活疫苗的应用及其制备方法技术

本发明专利技术属于兽用疫苗的技术领域，本发明专利技术提供了一种用WSL细胞系制备非洲猪瘟病毒活疫苗的应用及其制备方法。本发明专利技术提供的用WSL细胞系制备非洲猪瘟病毒活疫苗的方法，包括如下步骤：(1)WSL细胞系的复苏和培养：取出冻存的WSL细胞系培养至细胞形成单层；(2)制备毒种：取所述WSL细胞系加入含非洲猪瘟病毒的细胞维持液进行毒种培养，制得毒种；(3)制备病毒液：取所述WSL细胞系加入含毒种的细胞维持液进行病毒液培养，制得病毒液；(4)配制疫苗：在所述病毒液中加入疫苗保护剂和抗生素，进行冷冻真空干燥，即得成品。本发明专利技术生产的非洲猪瘟病毒活疫苗安全性高、免疫保护好，对非洲猪瘟强毒攻击具有完全的免疫保护作用。

【技术实现步骤摘要】
一种用WSL细胞系制备非洲猪瘟病毒活疫苗的应用及其制备方法
本专利技术涉及兽用疫苗的
，尤其涉及一种用WSL细胞系制备非洲猪瘟病毒活疫苗的应用及其制备方法。
技术介绍
目前国内、国外非洲猪瘟病毒及其基因缺失病毒的体外增值培养以及基因缺失活疫苗的制备所用的细胞基本是原代猪肺泡巨噬细胞和猪骨髓细胞，原代猪肺泡巨噬细胞和猪骨髓细胞制备过程繁琐，操作特别麻烦，易造成细菌和外源病毒污染，特别是骨髓细胞在接毒前还需要多次加入刺激因子和换液，此方法成本高、操作繁琐、劳动强度大、易于污染、且批间差异大、不利于规模化大生产。也有报道用Vero细胞培养非洲猪瘟病毒，但病毒适应性差，不稳定，毒价低。因此，有必要提供一种具有操作简单、不易染菌、工艺稳定、易于生产、病毒含量高、质量易控等优点，可显著提高疫苗产量和质量的非洲猪瘟病毒疫苗。
技术实现思路
为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种用WSL细胞系制备非洲猪瘟病毒活疫苗的应用。优选的，所述非洲猪瘟病毒为非洲猪瘟病毒基因缺失毒株SY本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用WSL细胞系制备非洲猪瘟病毒活疫苗的应用。/n

【技术特征摘要】
1.一种用WSL细胞系制备非洲猪瘟病毒活疫苗的应用。


2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒为非洲猪瘟病毒基因缺失毒株SY18ΔMGF/CD2v。


3.一种用WSL细胞系制备非洲猪瘟病毒活疫苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)WSL细胞系的复苏和培养：取出冻存的WSL细胞系培养至细胞形成单层；
(2)制备毒种：取所述WSL细胞系加入含非洲猪瘟病毒的细胞维持液进行毒种培养，制得毒种；
(3)制备病毒液：取所述WSL细胞系加入含毒种的细胞维持液进行病毒液培养，制得病毒液；
(4)配制疫苗：在所述病毒液中加入疫苗保护剂和抗生素，进行冷冻真空干燥，即得成品非洲猪瘟病毒活疫苗。


4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述含非洲猪瘟病毒的细胞维持液中非洲猪瘟病毒的体积百分比浓度为3％～5％，所述含非洲猪瘟病毒的细胞维持液的添加量为培养瓶体积的8～12％，每毫升所述毒种中病毒含量在107.0TCID50以上。
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【专利技术属性】
技术研发人员：张中洋，吴金，郭志文，高玉龙，宝梅英，杨金梅，吴文霞，汪春雨，
申请(专利权)人：吉林和元生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22