一种快速鉴定转基因耐除草剂大豆ZH10-6转化体特异性的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于多重PCR方法快速鉴定转基因耐除草剂大豆ZH10‑6转化体特异性的方法，该方法以转基因耐除草剂大豆ZH10‑6的G2‑epsps和GAT外源插入基因序列设计合成特异性引物，通过引物浓度优化组合，构建转化体特异性鉴定多重PCR反应体系。本发明专利技术针对转基因耐除草剂大豆ZH10‑6的外源插入序列的独特表达方式（插入了两个重复的G2‑epsps基因和一个GAT基因，形成了2个表达框和4个边界）设计了4对转化体特异性序列，引入大豆内源Lectin基因构建五重PCR反应体系，为基于外源目的基因的转基因转化体特异性鉴定提供了一种经济高效、准确可靠的高通量的技术手段。

【技术实现步骤摘要】
一种快速鉴定转基因耐除草剂大豆ZH10-6转化体特异性的方法
本专利技术属于农业转基因生物安全评价
，特别是涉及一种转基因耐除草剂大豆转化体特异性多重PCR方法构建及其应用。
技术介绍
随着转基因作物的商业化种植，转基因作物的安全性以及对人类健康和生态环境的潜在威胁倍受广大民众的广泛关注。我国农业部发布的“转基因植物安全评价指南”，为我国农业转基因生物安全评价提供了技术支撑。其中分子特征是转基因植物安全评价的重要组成部分，指转基因植物中外源DNA片段在受体基因组中的整合、表达以及遗传稳定性等方面的信息，是建立转基因植物精准检测技术的依据。目前，我国针对转基因植物安全评价的分子特征鉴定已建立了多种检测方法。蛋白质水平检测方法主要包括试纸条法、酶联免疫吸附法和生物传感器法；核酸水平检测方法主要包括普通PCR、实时荧光PCR和环介导等温扩增PCR技术等。而多重PCR即复合PCR(MultiplexPolymeraseChainReaction，MPCR)可在一个反应体系内同时检测多个转基因成分，并且可以在一次反应中检测多个品系的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速鉴定转基因耐除草剂大豆ZH10-6转化体特异性的引物，其特征在于包括ZH10A（边界A）：/n引物正向序列：5’-GAGCCTCGGATGGGATTGAT-3’/n反向引物序列：5’-TCGCTCATGTGTTGAGCATATAA-3’/n ZH10B（边界B）：/n引物正向序列：5’-GTCGTGACTGGGAAAACCCT-3’/n反向引物序列：5’- ATTCTAAAACGCTTTCTTCTTGCTA-3’/nZH10C（边界C）：/n引物正向序列：5’- CTAAACCTCTTAATGATACGGCTT-3’/n反向引物序列：5’- TCGTGACTGGGAAAACCCT-...

【技术特征摘要】
1.一种快速鉴定转基因耐除草剂大豆ZH10-6转化体特异性的引物，其特征在于包括ZH10A（边界A）：
引物正向序列：5’-GAGCCTCGGATGGGATTGAT-3’
反向引物序列：5’-TCGCTCATGTGTTGAGCATATAA-3’
ZH10B（边界B）：
引物正向序列：5’-GTCGTGACTGGGAAAACCCT-3’
反向引物序列：5’-ATTCTAAAACGCTTTCTTCTTGCTA-3’
ZH10C（边界C）：
引物正向序列：5’-CTAAACCTCTTAATGATACGGCTT-3’
反向引物序列：5’-TCGTGACTGGGAAAACCCT-3’
ZH10D（边界D）
引物正向序列：5’-ACCCTTGTTGAACGAGTGG-3’
反向引物序列：5’-AGAAGAGTATTCGGGAAGCTAA-3’。


2.一种采用权利要求1所述的快速鉴定转基因耐除草剂大豆ZH10-6转化体特异性的引物快速鉴定的方法，其特征在于它按如下步骤进行：
（1）用于鉴定转基因耐草甘膦大豆ZH10-6新品种的分子特征转化体特异性引物，其特征在于，包括ZH10A（边界A）引物正向序列：5’-GAGCCTCGGATGGGATTGAT-3’，反向引物序列：5’-TCGCTCATGTGTTGAGCATATAA-3’；ZH10B（边界B）引物正向序列：5’-GTCG...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵新，王一衡，李瑞环，尉万聪，兰青阔，王永，
申请(专利权)人：天津市农业科学院，
类型：发明
国别省市：天津;12