脱脂脱蛋白的大分子川芎多糖及其从药渣的制备方法技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及一种脱脂脱蛋白的大分子川芎多糖及其制备方法，以及从已被使用过的川芎中提取、纯化的工艺，以及该川芎多糖的用途。与药材来源的小分量川芎多糖不同，本发明专利技术的川芎多糖是以分子量较大的多糖为主，降糖、降血脂作用更为显著。

【技术实现步骤摘要】
脱脂脱蛋白的大分子川芎多糖及其从药渣的制备方法专利
本专利技术属于医药
，具体涉及一种脱脂脱蛋白的大分子川芎多糖，以及从川芎药渣中提取、纯化的工艺，以及该川芎多糖的用途。专利技术背景川芎，为伞形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根茎，在我国有着长期的用药史，其植物分布于我国各地，主要栽培于四川、云南、湖北、贵州、广西等省份。夏季当茎上的节盘显著突出，并略带紫色时采挖，除去泥沙，晒后烘干，再去须根。川芎活血行气，祛风止痛。用于胸痹心痛，胸胁刺痛，跌扑肿痛，月经不调，经闭痛经，癥瘕腹痛，头痛，风湿痹痛。现阶段已从川芎中发现近300种化学成分，川芎主要由挥发油、内酯类、有机酸、生物碱以及多糖等成分。有文献记载，川芎根茎含挥发油约1％，其中主成分约为藁本内酯占58％、3-丁酜内酯5％和香桧烯6％，还含阿魏酸、川吲哚、3-亚丁基苯酞、月桂烯、川芎嗪、棕榈酸、胡萝卜苷、β-谷固醇等成分。2015年版《中华人民共和国药典》，以阿魏酸为成分考察指标，规定川芎按干燥品计算，含阿魏酸不得少于0.10％。藁本内酯，别名东当归酞内酯，是我国传统中药伞形科植物当归挥发油的主要活性成分。本品采用水蒸气蒸馏法提取，对心脑血管，循环系统及免疫功能均有较强的药理作用。研究表明，藁本内酯有很强的解痉，平喘，镇静作用，能改善微循环，松弛平滑肌，抑菌，提高机体免疫调节功能。因此，藁本内酯也常常被当成川芎的主要有效成分指标之一。从已有报道看，川芎多糖并未作为川芎主要成分而引起充分研究，因此在中药生产中，有大量川芎药渣，尽管含有大量川芎多糖，仍不得不被直接作为生产废料而直接丢弃，造成资源浪费和环境问题。而且，药材、药渣两种来源的多糖，其分子量分布是否存在差异，是未曾考察的问题。
技术实现思路
本专利技术提供了一种脱脂脱蛋白的大分子川芎多糖；本专利技术还提供了以川芎废弃药渣为原料，提取制备该川芎多糖的方法。本专利技术还提供了川芎粗多糖在制备降糖、降脂等药物、功能性食品中的应用。一种川芎多糖，其中总糖含量≥30％；一种川芎多糖，其平均分子量为87kDa±10％，多分散性为2.3±10％；一种川芎多糖，其中糖醛酸含量≥20％；一种川芎多糖，其红外光谱图在波长1720cm-1处有一明显的特征峰；一种脱脂脱蛋白的川芎多糖；一种脱脂脱蛋白的川芎多糖，在制备降糖、降脂等药物中的应用；一种脱脂脱蛋白的川芎多糖，在制备食品中的应用，例如川芎多糖水胶体在食品的应用。本专利技术所述的川芎多糖，可用于药品、新型的保健食品添加剂或高附加值化妆品的原料。一种脱脂脱蛋白的川芎多糖的制备方法：粉碎：将川芎药渣干燥，粉碎；脱脂：与正己烷混合，搅拌，混合物静置后弃去正己烷；除蛋白：用水溶解，调节pH值，加入蛋白酶，加热；乙醇醇沉，离心取沉淀；将沉淀热水浸提1-3次，合并各次提取液；提取液浓缩、离心，保留上清液；上清液醇沉、离心，弃去上清液，取沉淀，即得。本专利技术所述川芎多糖，具有如下特点：(1)成分不同：本专利技术是以大分子量多糖为主，而常规药材来源的川芎多糖为小分子量为主，差异非常显著；糖醛酸含量不同，本专利技术的糖醛酸含量提高了约4倍；(2)更显著的降糖、降脂功能：因成分不同，带来了多糖药理作用差异，相对于小分子多糖，大分子多糖具有更突出的降糖降脂功能；(3)无脂、无蛋白：更适合特殊人群(蛋白过敏)的用药、食品添加等需求；(4)低成本：来源于废弃药渣，药材资源利用充分，经济环保。附图说明图1为不同来源川芎多糖GPC图。具体实施例原料：川芎药渣实施例1川芎多糖的制备粉碎：将原料川芎药渣放入烘箱中60℃干燥，直至水含量降至15％以下，粉碎，过60目筛；脱脂：粉碎后的药渣与正己烷按1∶3体积比混合，搅拌2h，混合物静置后，弃去正己烷；除蛋白：用水溶解，用0.1mol/L的NaOH调节pH值7-9，以1g样品加100μL蛋白酶的比例加入蛋白酶，加热120min；加入溶液3倍体积的95％乙醇醇沉，离心取沉淀；将沉淀热水浸提2次：将水浴锅预热到60℃投料，川芎药渣与水的投料按质量比为1∶14，得提取液，合并各次提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/3，离心10min，保留上清液；上清液中加入3倍体积比的95％乙醇醇沉，密封，放置于8℃冰箱过夜；样品离心10min，弃去上清液，取沉淀，即得。实施例2川芎多糖的制备粉碎：将原料川芎药渣放入烘箱中40℃干燥，直至水含量降至20％以下，粉碎，过40目筛；脱脂：粉碎后的药渣与正己烷按1∶5体积比混合，搅拌2h，混合物静置后，弃去正己烷；除蛋白：用水溶解，用0.1mol/L的NaOH调节pH值7-9，以1g样品加200μL蛋白酶的比例加入蛋白酶，加热60min；加入溶液5倍体积的95％乙醇醇沉，离心取沉淀；将沉淀热水浸提3次：将水浴锅预热到60℃，投料，川芎药渣与水的投料按质量比为1∶10，得提取液，合并各次提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/4，离心30min，保留上清液；上清液中加入5倍体积比的95％乙醇醇沉，密封，放置于10℃冰箱过夜；样品离心10min，弃去上清液，取沉淀，即得。实施例3川芎多糖的制备粉碎：将原料川芎药渣放入烘箱中50℃干燥，直至水含量降至20％以下，粉碎，过50目筛；脱脂：粉碎后的药渣与正己烷按1∶2体积比混合，搅拌0.5h，混合物静置后，弃去正己烷；除蛋白：用水溶解，用0.1mol/L的NaOH调节pH值7-9，以1g样品加50μL蛋白酶的比例加入蛋白酶，加热60min；加入溶液5倍体积的95％乙醇醇沉，离心取沉淀；将沉淀热水浸提1次：将水浴锅预热到60℃投料，川芎药渣与水的投料按质量比为1∶20，得提取液，合并各次提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/4，离心120min，保留上清液；上清液中加入2倍体积比的95％乙醇醇沉，密封，放置于10℃冰箱过夜；样品离心60min，弃去上清液，取沉淀，即得。实施例4川芎多糖的制备粉碎：将原料川芎药渣放入烘箱中60℃干燥，直至水含量降至20％以下，粉碎，过60目筛；脱脂：粉碎后的药渣与正己烷按1∶3体积比混合，搅拌0.5h，混合物静置后，弃去正己烷；除蛋白：用水溶解，用0.1mol/L的NaOH调节pH值7-9，以1g样品加100μL蛋白酶的比例加入蛋白酶，加热60min；加入溶液5倍体积的95％乙醇醇沉，离心取沉淀；将沉淀热水浸提2次：将水浴锅预热到60℃投料，川芎药渣与水的投料按质量比为1∶12，得提取液，合并各次提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/3，离心120min，保留上清液；上清液中加入2倍体积比的95％乙醇醇沉，密封，放置于10℃冰箱过夜；样品离心60min，弃去上清液，取沉淀，即得。实施例5不脱脂和不脱蛋白的川芎粗多糖(以川芎药材为原料)...

【技术保护点】
1.一种川芎多糖，其中总糖含量≥30％，其平均分子量为87kDa±10％。/n

【技术特征摘要】
1.一种川芎多糖，其中总糖含量≥30％，其平均分子量为87kDa±10％。


2.权利要求1所述的川芎粗多糖，其中糖醛酸含量≥20％。


3.一种权利要求1-2所述川芎多糖，其制备方法包括：
粉碎：取已被使用过的川芎(以下称川芎药渣)，干燥，粉碎；
脱脂：与正己烷混合，搅拌，混合物静置后弃去正己烷；
除蛋白：用水溶解，调节pH值，加入蛋白酶，加热；乙醇醇沉，离心取沉淀；
将沉淀热水浸提1-3次，合并各次提取液；
提取液浓缩、离心，保留上清液；
上清液醇沉、离心，弃去上清液，取沉淀，即得。


4.一种权利要求3所述川芎多糖，其制备方法包括：
粉碎：将川芎药渣放入烘箱中干燥，直至水含量降至20％以下，粉碎；
脱脂：与正己烷混合，搅拌，混合物静置后，弃去正己烷；
除蛋白：用水溶解，用NaOH调节pH值7-10，加入蛋白酶，加热30-240min；乙醇醇沉，离心取沉淀；
将沉淀热水浸提1-3次：将水浴锅预热到60℃投料，药渣与水的投料按质量比为1∶(10-20)，得提取液，合并各次提取液；
提取液浓缩、离心，保留上清液；
上清液中加入1-5倍体积比的95％乙醇醇沉，密封，放置于2-10℃冰箱过夜；离心5-60min，弃去上清液，取沉淀，即得。


5.一种权利要求4所述川芎多糖，其制备方法包括：
粉碎：将原料川芎药渣放入烘箱中40-60℃干燥，直至水含量降至15％以下，粉碎，过40-70目筛；
脱脂：粉碎后的药渣与正己烷按1∶(1-5)体积比混合，搅拌，混合物静置后，弃去正己烷；
除蛋白：用水溶解，用0.1mo...

【专利技术属性】
技术研发人员：王岩，王书军，庞纪平，游强蓁，何子豪，穆远楠，
申请(专利权)人：天津中新药业集团股份有限公司中新制药厂，
类型：发明
国别省市：天津;12