重组白额高脚蛛毒素多肽及其制备方法技术

重组白额高脚蛛毒素多肽及其制备方法，其重组白额高脚蛛毒素多肽由如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示的任一核苷酸片段编码获得。本发明专利技术还公开了重组白额高脚蛛毒素多肽的制备方法，包括：1)构建含白额高脚蛛毒素多肽编码基因的重组表达载体；2)将步骤1)得到重组表达载体热击转化至酿酒酵母S78构建重组菌；3)重组菌在YSD液体培养基中发酵培养，表达获得白额高脚蛛毒素多肽。该重组白额高脚蛛毒素多肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌和沙门氏菌等常见微生物菌种具有抑菌活性，适用于制备抗菌饲料添加剂，以及果蔬种子的保存，或者添加至制备抗菌药物中，用于制备抗菌药物，其制备方法简单，成本低廉，工业应用前景广。

【技术实现步骤摘要】
重组白额高脚蛛毒素多肽及其制备方法
本专利技术涉及蜘蛛毒素多肽的重组表达方法，尤其是涉及重组白额高脚蛛毒素多肽及其制备方法。
技术介绍
大多数蜘蛛都能分泌毒液，其毒液中含有许多具有生物学活性的物质，由于蜘蛛毒素具有高度的特异性和选择性，从而被广泛的应用于新药物研究开发和新型生物杀虫剂等方面。蜘蛛毒素的分类包括:(1)小分子物质,主要包括核苷酸、氨基酸、单胺类及多胺类物质，目前，蜘蛛毒液中研究最充分且最成熟的小分子物质是多胺类物质。酰基多胺是具有低分子量的毒素，其主要存在于Nephila属和Argiope属的某些编织类蜘蛛毒液中。这些毒素具有杀虫活性，它们通过可逆阻断昆虫神经肌肉接头以及昆虫和哺乳动物中的突触后谷氨酸敏感受体通道快速诱导昆虫麻痹。(2)大分子物质,主要包括多种活性酶，血蓝蛋白和一些毒素蛋白，毒素蛋白中最热门的是Latrodectus蜘蛛毒液中的毒素蛋白。Latrodectus蜘蛛的毒液中含有大量高分子量蛋白质和少数小分子多肽。已有研究表明Latrodectus毒液的神经毒性主要由高分子量蛋白质组分引起。(3)多肽类，大多数蜘蛛毒液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.重组白额高脚蛛毒素多肽，其特征在于，所述重组白额高脚蛛毒素多肽由如SEQ IDNO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示的任一核苷酸片段编码获得，或与SEQID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示的任一核苷酸片段编码获得的任一多肽氨基酸序列同源性≥80％的白额高脚蛛毒素多肽。/n

【技术特征摘要】
20200908 CN 20201093405211.重组白额高脚蛛毒素多肽，其特征在于，所述重组白额高脚蛛毒素多肽由如SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3或SEQIDNO.4所示的任一核苷酸片段编码获得，或与SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3或SEQIDNO.4所示的任一核苷酸片段编码获得的任一多肽氨基酸序列同源性≥80％的白额高脚蛛毒素多肽。


2.如权利要求1所述重组白额高脚蛛毒素多肽，其特征在于，所述重组白额高脚蛛毒素多肽为U1、U3、U4或U27中的任一一种，U1、U3、U4、U27的氨基酸序列分别如SEQIDNO.5、SEQIDNO.6、SEQIDNO.7、SEQIDNO.8所示。


3.含白额高脚蛛毒素多肽编码基因的重组菌，其特征在于，所述重组菌为含重组表达载体pVT102U/α的酿酒酵母，所述重组表达载体pVT102U/α含如SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3和SEQIDNO.4中的任一核苷酸序列片段。


4.如权利要求3所述的含白额高脚蛛毒素多肽编码基因的重组菌，其特征在于，所述重组表达载体pVT102U/α包括pVT102U/α-U1、pVT102U/α-U3、pVT102U/α-U4和pVT102U/α-U27。


5.一种重组白额高脚蛛毒素多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)构建含白额高脚蛛毒素多肽编码基因的重组表达载体，所述白额高脚蛛毒素多肽如权利要求1或2所述；
2)将步骤1)得到重组表达载体热击转化至酿酒酵母S78构建重组菌；
3)重组菌在YSD液体培养基中发酵培养，表达获得白额高脚蛛毒素多肽。


6.如权利要求5所述重组白额高脚蛛毒素多肽的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中构建重组表达载体的具体操作，包括引物设计、PCR扩增、获得目的片段和构建重组表达载体。


7.如权利要求5所述重组白额高脚蛛毒素多肽的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中构建重组菌的具...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈金军，刘子昊，刘学良，朱伟仙，
申请(专利权)人：湖州眺旺生物科技有限公司，湖南农业大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33