一种以SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD区为抗原的纳米疫苗及其制备制造技术

本发明专利技术公开了一种以SARS‑CoV‑2病毒S蛋白RBD区为抗原的纳米疫苗及其制备。将带有SARS‑CoV‑2病毒S蛋白RBD区基因序列的表达载体转染进293T、293i、CHO细胞系中进行抗体表达，再经蛋白提取、超滤富集、抗体亲和层析纯化、纯化后蛋白收集、PBS透析和氢氧化铝佐剂混合孵育后得到所需疫苗。该疫苗是一种表达SARS‑CoV‑2病毒S蛋白RBD区氨基酸序列的蛋白，在细胞内24个单体能自组装成球体结构，并且融合表达的SARS‑CoV‑2病毒S蛋白RBD肽段展示在球体表面。疫苗对SARS‑CoV‑2病毒具有良好的中和活性，可以有效抑制病毒对vero细胞的感染。攻毒实验表明其能够明显有效保护SARS‑CoV‑2对恒河猴的感染及损伤，为当前新冠疫情防控提供了一种优良的候选疫苗。

【技术实现步骤摘要】
一种以SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD区为抗原的纳米疫苗及其制备
本专利技术属于冠状病毒疫苗制备
，具体是涉及一种特别针对SARS-CoV-2病毒具备良好中和活性的纳米自组装颗粒蛋白疫苗。同时，本专利技术还涉及所述纳米自组装颗粒蛋白疫苗的制备方法。
技术介绍
近年来，疫苗制备技术不断发展，新近出现的纳米自组装颗粒疫苗具有以下优势：制备快速、纯化工艺简便、易放大、多个抗原单体聚合展示使抗原性较高、通过人源细胞发酵生产安全性较高。例如将流感病毒保守抗原位点展示在纳米自组装颗粒表面、以增强疫苗抗原性和安全性的技术，已经广泛应用于通用流感疫苗的研发。SARS-CoV-2病毒(SevereAcuteRespiratorySyndromeCoronavirus2)属于冠状病毒科，β冠状病毒属的Sarbecovirus亚型。该病毒引起新型冠状病毒感染肺炎(COVID-19)。SARS-CoV-2病毒的潜伏期比SARS-CoV病毒潜伏期长，传染性比SARS-CoV病毒强，虽然致死率比SARS-CoV病毒弱，但也会引发病人尤其是慢性病患本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种以SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD区为抗原的纳米疫苗，其特征在于：该疫苗是一种表达SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD区氨基酸序列的蛋白，其单体氨基酸序列如序列表SEQ IDNO.1所示，在细胞内24个单体能自组装成球体结构，并且融合表达的SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD肽段展示在球体表面。/n

【技术特征摘要】
20200407 CN 20201026423381.一种以SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD区为抗原的纳米疫苗，其特征在于：该疫苗是一种表达SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD区氨基酸序列的蛋白，其单体氨基酸序列如序列表SEQIDNO.1所示，在细胞内24个单体能自组装成球体结构，并且融合表达的SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD肽段展示在球体表面。


2.制备权利要求1所述纳米疫苗的方法，具体包括以下步骤：
(1)将带有SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD区基因序列的表达载体转染进293T、293i、CHO细胞系中进行抗体表达，所述的SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD区基因序列如序列表SEQIDNO.2所示；其中，293T细胞表达体系使用无血清培养基，转染试剂为FuGENEHDTransfection(Promega)；293i和CHO细胞表达体系为悬浮表达系统，使用无血清培养基，转染试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘龙丁，李恒，郭磊，郑惠文，梁燕，杨泽宁，陈燕丽，和占龙，施海晶，李菁，
申请(专利权)人：中国医学科学院医学生物学研究所，
类型：发明
国别省市：云南;53