一种预防COVID-19的新型疫苗及其制备方法技术

一种预防COVID‑19的新型疫苗，所述的新型疫苗的抗原的核苷酸序列为SEQ NO:1，氨基酸序列为SEQ NO:2，本发明专利技术的疫苗的抗原包含两个功能部分：可诱导特异性中和抗体的S蛋白受体结合结构域和可诱导激活效应T细胞的T细胞相关N蛋白截短肽段；本发明专利技术的疫苗具有以下特征：T细胞相关N蛋白截段肽段诱导N蛋白抗体的产生能力弱，能够使用N抗体鉴别疫苗接种者和新冠感染患者，疫苗抗原不诱导N蛋白抗体的产生，能够减少肺损伤，更加安全；本发明专利技术的细胞疫苗造价低，且能够诱导产生病毒特性性中和抗体和T细胞免疫反应。

【技术实现步骤摘要】
一种预防COVID-19的新型疫苗及其制备方法
本专利技术属于基因工程及分子免疫学
，具体涉及一种预防COVID-19的新型疫苗及其制备方法。
技术介绍
SARS-CoV2也称为2019-nCoV，是一种新型的冠状病毒科Sarbecovirus亚属的RNA病毒，导致了2019新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的全球流行。截至8月10日，全球病毒感染人数已超过1986万人，死亡人数超过73万。目前有139种候选疫苗在临床前评估，25种候选疫苗正在临床评估或临床试验中，其中部分疫苗如重组腺病毒载体疫苗、灭火疫苗已进入II期临床试验并显示出令人鼓舞的结果，然而当前各类疫苗的抗原设计仍存在一些不足，需进一步优化。例如部分人群体内存在较高5型腺病毒（Ad5）的中和抗体，抑制了基于Ad5新冠疫苗的疗效；灭火疫苗可诱导机体产生大量非中和抗体，存在潜在安全风险，同时疫苗刺激机体产生的N蛋白抗体会对感染患者的血清学诊断造成干扰。刺突蛋白（S蛋白）是SARS-CoV2表面的关键蛋白，主要由S1和S2两部分组成。其中S1中的受体结合结构域（RBD）能本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种预防COVID-19的新型疫苗，其特征在于：所述的新型疫苗的抗原的核苷酸序列为SEQ NO:1，氨基酸序列为SEQ NO: 2。/n

【技术特征摘要】
1.一种预防COVID-19的新型疫苗，其特征在于：所述的新型疫苗的抗原的核苷酸序列为SEQNO:1，氨基酸序列为SEQNO:2。


2.根据权利要求1所述的一种预防COVID-19的新型疫苗，其特征在于：所述的新型疫苗抗原主要由三部分组成，编码SARS-CoV2的受体结合结构域的核苷酸序列SEQNO:3、编码自切割肽T2A的核苷酸序列SEQNO:4，以及编码N蛋白T细胞反应肽段的核苷酸序列SEQNO:5。


3.根据权利要求2所述的一种预防COVID-19的新型疫苗，其特征在于：所述的编码SARS-CoV2的受体结合结构域的多核苷酸进行密码子优化，氨基酸序列为SEQNO:6；自切割肽T2A氨基酸序列为SEQNO:7；编码Ntap的核苷酸序列可为病毒原始序列或进行序列的密码子优化，其氨基酸序列为SEQNO:8。


4.根据权利要求2或3所述的一种预防COVID-19的新型疫苗，其特征在于：所述的编码SARS-CoV2的受体结合结构域为RBD，编码N蛋白T细胞反应肽段为Ntap。


5.一种如权利要求1或2所述的预防COVID-19的新型疫苗的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）首先构建能分泌表达GP96-hFc的慢病毒载体，感染并筛选出能稳定分泌表达GP96-hFc的HEK293T的细胞系，核苷酸序列见序列SEQNO:8，蛋白序列见SEQNO:9；
（2）构建能嵌合表达SARS-CoV2的S蛋白受体结合结构域和截短的N蛋白T细胞相关肽段的慢病毒载体，并在步骤1）的基础上筛选出能分...

【专利技术属性】
技术研发人员：程振国，王尧河，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南;41