一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白‑果胶复合纳米颗粒及其制备方法。步骤如下：制备金丝桃苷‑玉米醇溶蛋白乙醇溶液（A溶液）；制备果胶溶液（B溶液）；将A溶液加去离子水搅拌均匀，得负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液（C溶液）；将C溶液旋蒸去除乙醇，补充去离子水至原有体积得D溶液；将D溶液加入到B溶液中搅拌均匀，得负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白‑果胶复合纳米颗粒分散液（E溶液）；将E溶液冷冻离心去除不溶物，上清液干燥，得粉状负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白‑果胶复合纳米颗粒。本发明专利技术采用反溶剂沉淀法制备，制备的复合纳米颗粒粒径分布均匀，复溶性能较好，金丝桃苷包封率高，且可改善其抗氧化性和缓释性。

【技术实现步骤摘要】
一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒及其制备方法
本专利技术涉及功能性复合纳米颗粒的制备
，具体涉及一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒及其制备方法。
技术介绍
金丝桃苷是一种脂溶性黄酮类化合物，存在于多种植物中，如花椒，花椒叶，山楂，连翘等。近年来研究发现，金丝桃苷具有抗氧化、保肝、抗抑郁、抗肿瘤、抗菌等多种生物活性。然而，由于金丝桃苷水溶性低、化学稳定性低、在体内消除代谢速率快，生物利用度低，极大地限制了其在食品和医药领域的应用。已有研究表明，基于生物聚合物（蛋白质和多糖）的复合纳米颗粒可用于生物活性物质的包覆、保护和递送。然而，据我们所知，目前关于负载金丝桃苷的纳米颗粒的研究尚未见报道。因此，开发设计安全且高效的负载金丝桃苷的复合纳米颗粒对于改善金丝桃苷存在的上述局限性，扩大金丝桃苷在功能性食品和医药领域的应用具有非常重要的意义。玉米醇溶蛋白是玉米中的主要贮藏蛋白质，其价格便宜，安全无毒，且具有良好的生物相容性和可降解性，以及其独特的化学结构，可被用于开发包封疏水性生物活性物质的纳米递送载体。然而，单一玉米醇溶蛋白纳米颗粒包封率低，因其强的疏水性使其冻干后的纳米颗粒很难在水中复溶，且在胃肠环境条件下易于聚集并容易释放其包封的生物活性物质，这极大的限制了其在递送生物活性物质方面的应用。果胶作为一种天然阴离子多糖，其来源广泛、安全稳定，具良好的有生物可降解性和生物相容性，且已被广泛作为食品添加剂用于食品加工中。果胶的pKa=3.5，其可以在胃肠环境中保持原状，在结肠中被水解酶和微生物分解利用，可实现疏水性活性物质的结肠靶向释放，是一种潜在的经口给药递送载体的理想壁材。玉米醇溶蛋白与水溶性多糖相互作用形成的复合纳米颗粒递送载体为改善生物活性化合物的水分散性、生物利用度以及扩大其应用提供了有效的策略。有研究发现，多糖涂覆的玉米醇溶蛋白纳米颗粒递送载体可以显著改善疏水性化合物（如姜黄素、白藜芦醇）的水分散性、生物活性以及释放特性。考虑到金丝桃苷的化学结构不同于姜黄素和白藜芦醇，这可能使得它们与玉米醇溶蛋白和果胶的相互作用能力不同，从而导致玉米醇溶蛋白-果胶包覆金丝桃苷的能力和机制不同于姜黄素和白藜芦醇。因此，开发并探究负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒以改善金丝桃苷水分散性和递送特性为扩大其在食品、医药领域的应用具有重要的意义。然而，目前尚未见到关于利用玉米醇溶蛋白和果胶包覆金丝桃苷制备负载金丝桃苷-玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的报道。
技术实现思路
要解决的技术问题：本专利技术的目的是提供一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒，制备方法简单，采用反溶剂沉淀法制备，制备的复合纳米颗粒粒径分布均匀，复溶性能较好，金丝桃苷包封率高，且可改善其抗氧化性和缓释性。技术方案：一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的制备方法，制备步骤如下：S1：将玉米醇溶蛋白溶于85%乙醇溶液中，再加入金丝桃苷，得金丝桃苷-玉米醇溶蛋白乙醇溶液；将果胶溶解于去离子水中，25℃下搅拌过夜得到果胶溶液；S2：将步骤S1中得到的金丝桃苷-玉米醇溶蛋白乙醇溶液加入到去离子水中搅拌均匀，得到负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液；S3：将步骤S2中得到的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液减压旋转蒸发，去除乙醇，并补充去离子水至原有体积；S4：将步骤S3得到的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液加入到果胶溶液中，搅拌混合均匀，得到负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒分散液；S5：将步骤S4得到的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒分散液冷冻离心去除不溶物，复合纳米颗粒清液干燥，得到粉状玉负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒。具体的制备流程图，如图1所示。进一步的，所述步骤S1中金丝桃苷与玉米醇溶蛋白的质量比为1:20～1:10(w/w)。进一步的，所述步骤S2中金丝桃苷-玉米醇溶蛋白乙醇溶液与去离子水的体积比为1:2～1:4(v/v)；搅拌条件为在500～800rpm条件下搅拌3～9min；去离子水的pH值为4.0。进一步的，所述步骤S3中纳米颗粒分散液在真空度70～100mbar，40℃条件下减压蒸发15～30min。进一步的，所述步骤S4中果胶溶液的浓度为0.8mg/mL～1.0mg/mL，搅拌条件为在500～800rpm条件下搅拌30～60min。进一步的，所述步骤S5中离心条件为1500～3000rpm冷冻离心10～30min。进一步的，所述步骤S5中的干燥采用真空冷冻干燥。进一步的，所述的真空冷冻干燥的真空冷冻温度在-40～-60℃，时间4～24h。上述负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的制备方法制备的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒。有益效果：1、本专利技术以具有多种生活活性和潜在健康效益的金丝桃苷为疏水性生物活性物质，以生物大分子玉米醇溶蛋白和果胶为载体材料，利用反溶剂沉淀法制备了负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒，制备方法简单易操作，成本低廉，绿色环保。2、本专利技术所制得到的复合纳米颗粒主要是通过氢键、静电相互作用和疏水相互作用结合的，且颗粒分布均匀，复溶性能较好，金丝桃苷包封率大于90%，并且明显增强了金丝桃苷的抗氧化能力和缓释特性。3、本专利技术制备的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒为改善金丝桃苷水溶性差和生物利用度低以扩大其在功能性食品、饮料和医药领域的创新应用提供了新的视角。附图说明图1是实施例3中负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的制备过程图示意图。图2是实施例3中负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的微观结构。图3是实施例3中负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的冻干粉在去离子水中的复溶性。图4是实施例3中负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒在模拟胃肠条件下的稳定性。图5是实施例3中负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒对DPPH自由基的清除能力。图6是实施例3中金丝桃苷在模拟胃肠条件下的释放曲线。具体实施方式本专利技术提出了一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒及其制备方法，为使本专利技术的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下将配合实施例来对本专利技术进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。原料：实施例中选用的玉米醇溶蛋白（蛋白含量>92%）购于上海源叶生物有限公司；金丝桃苷（纯度>98%）购于成都瑞芬思生物有限公司；果胶（半乳糖醛酸含量>74%）购于上海麦克林生物有限公司。实施例1S1：精密称取2g玉米醇溶蛋白和0.02g果胶，分别溶于100mL85%乙醇水溶液和100mL去离子水中，室温（25℃）搅拌过夜得到玉米醇本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：/nS1：将玉米醇溶蛋白溶于85%乙醇溶液中，再加入金丝桃苷，得金丝桃苷-玉米醇溶蛋白乙醇溶液；将果胶溶解于去离子水中，25℃下搅拌过夜得到果胶溶液；/nS2：将步骤S1中得到的金丝桃苷-玉米醇溶蛋白乙醇溶液加入到去离子水中搅拌均匀，得到负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液；/nS3：将步骤S2中得到的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液减压旋转蒸发，去除乙醇，并补充去离子水至原有体积；/nS4：将步骤S3得到的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液加入到果胶溶液中，搅拌混合均匀，得到负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒分散液；/nS5：将步骤S4得到的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒分散液冷冻离心去除不溶物，复合纳米颗粒清液干燥，得到粉状玉负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒。/n

【技术特征摘要】
1.一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：
S1：将玉米醇溶蛋白溶于85%乙醇溶液中，再加入金丝桃苷，得金丝桃苷-玉米醇溶蛋白乙醇溶液；将果胶溶解于去离子水中，25℃下搅拌过夜得到果胶溶液；
S2：将步骤S1中得到的金丝桃苷-玉米醇溶蛋白乙醇溶液加入到去离子水中搅拌均匀，得到负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液；
S3：将步骤S2中得到的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液减压旋转蒸发，去除乙醇，并补充去离子水至原有体积；
S4：将步骤S3得到的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白纳米颗粒分散液加入到果胶溶液中，搅拌混合均匀，得到负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒分散液；
S5：将步骤S4得到的负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒分散液冷冻离心去除不溶物，复合纳米颗粒清液干燥，得到粉状玉负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒。


2.根据权利要求1所述的一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中金丝桃苷与玉米醇溶蛋白的质量比为1:20～1:10(w/w)。


3.根据权利要求1所述的一种负载金丝桃苷的玉米醇溶蛋白-果胶复合纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中金丝桃苷-玉米醇溶蛋白乙醇溶液与去离子水的体积比为1:2～1:4(v/v)；...

【专利技术属性】
技术研发人员：李梅，王小晶，王军，徐怀德，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61