一种抗感染促愈合止血防粘连膜及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抗感染促愈合止血防粘连膜及其制备方法。止血防粘连膜由N‑马来酰化壳聚糖与透明质酸钠‑琥珀酰亚胺酯反应制得的下层，N‑马来酰化明胶、聚乙烯亚胺、外泌体、丙烯酸N‑羟基琥珀酰亚胺酯、马来酸酐、N,N'‑亚甲基双丙烯酰胺经亲核取代反应后自由基聚合制得的中层，丙烯酸酯PEG‑N羟基琥珀酰亚胺酯、钙盐、凝血酶、丙烯酰胺经亲核取代反应后自由基聚合制得的上层组成。本发明专利技术制备的止血防粘连膜下层接触伤口后迅速将水分转移到中层，快速粘附，在内源性止血和机械压迫双重作用下高效止血；中层可缓慢释放明胶与外泌体促进伤口愈合，上层可抗感染、预防伤口粘连。故本止血防粘连膜有快速止血、促愈合、抗感染和防粘连功效。

【技术实现步骤摘要】
一种抗感染促愈合止血防粘连膜及其制备方法
本专利技术属于生物医用材料
，涉及一种抗感染促愈合止血防粘连膜及其制备方法。本申请的医用止血膜具有快速止血、防止位移、促愈合、抗感染、防粘连的功效。
技术介绍
在突发性事故的急救、手术以及在战争中，50%的死亡是因大量出血导致。一些传统的止血材料，例如止血纱布、止血绷带、止血棉纱等，他们的止血能力有限，止血效果并不十分理想。因此，开发出高效而且快速可吸收的止血材料及产品，在出血发生后的1-2分钟，甚至更短的时间内，有效地快速止血，这成为止血材料研发的主要目标之一。止血膜是一种用于在进行外科手术时对伤口进行止血的材料，当将止血膜贴敷到血管破损处时，其中亲水性高分子材料会与血小板发生粘着和凝聚作用，然后形成血小板血栓，继而凝成纤维蛋白栓塞来堵住血管破损处，从而达到止血作用。在伤口愈合过程，防止愈合过程中感染、粘连及加速伤口愈合已经成为很重要的方面。壳聚糖能够增加细菌细胞外膜和内膜的渗透性，且其质子化的氨基可破坏细菌细胞膜的结构和功能，进而使细胞膜的完整性遭到破坏，从而抑制细菌活性。明胶是一种广泛应用于生物医学领域的天然可吸收材料，生物相容性好，无毒无刺激，分子结构上有大量的羟基、氨基和羧基，是一种两性物质，具有极强的亲水性；置于出血部位、迅速吸收血液，引起血小板破裂，促进凝血，达到止血的目的，同时具有促进新细胞形成功能和细胞粘附性。透明质酸是一种酸性粘多糖。透明质酸以其独特的分子结构和理化性质在机体内显示出多种重要的生理功能，如抑制组织迁移、减少血纤维蛋白原沉积、阻隔和润滑作用、抗炎和促进组织愈合作用等。因此透明质酸常被制成止血膜，从而起到抑制过量纤维组织形成，防止粘连的发生，减少手术并发症，促进伤口愈合等作用。故壳聚糖、明胶和透明质酸已经被广泛应用于止血膜的制备。例如在申请号为201711316988.2的专利技术专利中，公开了一种壳聚糖基复合止血膜的制备方法。此专利技术首先将壳聚糖液和明胶液混合，并加入聚乙二醇和交联剂，搅拌反应，制得成膜液，再经流延成膜，得壳聚糖基薄膜，再将无机粉料分散液喷洒于壳聚糖基薄膜表面，自然晾干后冷压，得冷压膜，再于冷压膜表面涂覆营养匀浆后，喷洒木醋杆菌菌液，经恒温恒湿培养后，灭菌、洗涤和干燥，即得壳聚糖基复合止血膜。此专利技术所得壳聚糖基复合止血膜止血效果得到了有效提高，而且伤口愈合后，便于从伤口剥离，有利于避免清除止血膜时产生疼痛和二次受伤的情况。但该止血膜对伤口的粘附性能不强，在遇到出血较大或伤口血压较大时，易脱落，起不到很好的机械止血作用。且该止血膜无防粘连和促进伤口愈合的功效。申请号为201410748532.3的专利技术专利中，公开了一种复合止血膜材料，包括壳聚糖膜层和淀粉/明胶膜层，所述壳聚糖膜层和淀粉/明胶膜层的质量比为(1:1)～(1:20)；此专利技术还公开了一种复合止血膜材料的制备方法，将配制的壳聚糖溶液置于模具中干燥成型，制得壳聚糖膜层；将淀粉溶液与明胶溶液按质量为(1:1)～(5:1)共混配制共混液，将共混液加入所述的壳聚糖膜上，固化成型，得到复合止血膜。此专利技术中的复合止血膜可同时启动几种止血机制，高效止血，同时与创面有较佳的粘附性；另外，此专利技术制备的复合止血膜材料具有良好的生物相容性、可吸收降解，有效止血的同时具有一定的抑菌性、促愈合作用。但该止血膜粘附作用有限，在遇到出血较大或伤口血压较大时，仍易脱落，抑菌和促愈合效率低，且无防粘连功效。市场上常见的大清可吸收止血膜是由透明质酸钠和羧甲基壳聚糖经共混、分装、冷冻干燥、裁剪、包装和辐照等工序制得。该止血膜与伤口接触后，短时间内可编程凝胶，吸附于创面上，大大节约手术时间，提高手术效率，降低手术风险。该止血膜由一定的防粘连功效，但其机械性能差、粘附性能不佳，无法起到机械压迫止血的作用，且促愈合功效较低。综上所述，临床上急需一种生物相容性好、不易位移、机械强度高、可快速止血、抗感染、防粘连和长效高效促愈合功能的止血防粘连膜。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种生物相容性好、不易位移、机械强度高、可快速止血、防粘连和长效高效促愈合功能的止血防粘连膜。一种抗感染促愈合止血防粘连膜，所述止血防粘连膜由下层、中层和上层组成：下层由N-马来酰化壳聚糖与透明质酸钠-琥珀酰亚胺酯充分混匀后，加入0.006-0.020的光引发剂，充分混匀后，在紫外灯下聚合而成；中层由N-马来酰化明胶、聚乙烯亚胺、外泌体、丙烯酸N-羟基琥珀酰亚胺酯充分混匀后，再加入马来酸酐、0.2-0.5%的光引发剂和0.01-0.02%的N,N'-亚甲基双丙烯酰胺充分混匀，将混合液加入到以下层为底的容器中，在紫外灯下聚合而成；上层由丙烯酸酯PEG-N羟基琥珀酰亚胺酯、钙盐、凝血酶、丙烯酰胺、0.05-0.10%光引发剂充分混匀后喷涂到中层表面，在紫外灯下聚合而成。止血防粘连膜下层、中层和上层聚合后，经程序式真空干燥、灭菌制得成品。进一步的，所述N-马来酰化壳聚糖重量百分比为2-4，优选为2.5-3.5%；所述透明质酸钠-琥珀酰亚胺酯重量百分比为2.4-6.5%，优选为3.1-5.7%；N-马来酰化明胶重量百分比为20-30，优选为22.5-27.5；聚乙烯亚胺重量百分比为0.01-0.03%，优选为0.015-0.025%；外泌体重量百分比为0.5-1.0%，优选为0.07-0.08%；N-羟基琥珀酰亚胺酯重量百分比为4-8%，优选为5-7%；马来酸酐重量百分比为5-10%，优选为7-8%；丙烯酸酯PEG-N羟基琥珀酰亚胺酯重量百分比为4-6%，优选为4.5-5.5%；钙盐重量百分比为0.2-0.4%，优选为0.25-0.35%；凝血酶重量百分比为0.1-0.3%，优选为0.15-0.25%；丙烯酰胺重量百分比为1-2%，优选为1.25-1.75%；所述N-马来酰化壳聚糖的分子量为20-200KDa，马来酰化取代度为20-40%；所述透明质酸钠-琥珀酰亚胺酯的分子量为1500-2200KDa，琥珀酰亚胺酯接枝率为90-95%；所述N-马来酰化壳聚糖中的氨基与透明质酸钠-琥珀酰亚胺酯中的琥珀酰亚胺酯，摩尔比为1.25:1。所述N-马来酰化明胶的分子量为50-100KDa，马来酰化取代度为85-95%；所述聚乙烯亚胺的分子量为1800Da；所述外泌体为脂肪间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、骨髓间充质干细胞中的一种或多种间充质干细胞分泌的外泌体；所述丙烯酸酯PEG-N羟基琥珀酰亚胺酯分子量为1-10KDa；所述钙盐为氯化钙、硫酸钙、碳酸钙中的一种或多种；所述凝血酶为固体粉末，酶活为40-300U/mg；所述光引发剂为2-羟基-2-甲基-1-[4-(2-羟基乙氧基)苯基]-1-丙酮。所述聚合第下层所用紫外灯功率为150W，波长为365nm，照射时间为20-30min；所述中层聚合所用紫外灯功率为150W，波长为365nm，照射时间为20-40min；所述上层聚合所用紫外灯功率为150W，波长为365nm，照射时间为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗感染促愈合止血防粘连膜，其特征在于，止血防粘连膜由下层、中层和上层组成：下层由2-4%的N-马来酰化壳聚糖与2.4-6.5%的透明质酸钠-琥珀酰亚胺酯充分混匀后，加入0.006-0.020的光引发剂，充分混匀后，在紫外灯下聚合而成；中层由20-30%的N-马来酰化明胶、0.01-0.03%的聚乙烯亚胺、0.5-1.0%的外泌体、4-8%的丙烯酸N-羟基琥珀酰亚胺酯充分混匀后，再加入5-10%的马来酸酐、0.2-0.5%的光引发剂和0.01-0.02%的N, N'-亚甲基双丙烯酰胺充分混匀，将混合液加入到以下层为底的容器中，在紫外灯下聚合而成；上层由4-6%的丙烯酸酯PEG-N羟基琥珀酰亚胺酯、0.2-0.4%钙盐、0.1-0.3%凝血酶、1-2%丙烯酰胺、0.05-0.10%光引发剂充分混匀后喷涂到中层表面，在紫外灯下聚合而成；止血防粘连膜下层、中层和上层聚合后，经程序式真空干燥、灭菌制得成品。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗感染促愈合止血防粘连膜，其特征在于，止血防粘连膜由下层、中层和上层组成：下层由2-4%的N-马来酰化壳聚糖与2.4-6.5%的透明质酸钠-琥珀酰亚胺酯充分混匀后，加入0.006-0.020的光引发剂，充分混匀后，在紫外灯下聚合而成；中层由20-30%的N-马来酰化明胶、0.01-0.03%的聚乙烯亚胺、0.5-1.0%的外泌体、4-8%的丙烯酸N-羟基琥珀酰亚胺酯充分混匀后，再加入5-10%的马来酸酐、0.2-0.5%的光引发剂和0.01-0.02%的N,N'-亚甲基双丙烯酰胺充分混匀，将混合液加入到以下层为底的容器中，在紫外灯下聚合而成；上层由4-6%的丙烯酸酯PEG-N羟基琥珀酰亚胺酯、0.2-0.4%钙盐、0.1-0.3%凝血酶、1-2%丙烯酰胺、0.05-0.10%光引发剂充分混匀后喷涂到中层表面，在紫外灯下聚合而成；止血防粘连膜下层、中层和上层聚合后，经程序式真空干燥、灭菌制得成品。


2.根据权利要求1所述的一种抗感染促愈合止血防粘连膜，其特征在于，所述N-马来酰化壳聚糖的分子量为20-200KDa，马来酰化取代度为20-40%；所述透明质酸钠-琥珀酰亚胺酯的分子量为1500-2200KDa，琥珀酰亚胺酯接枝率为90-95%；其中N-马来酰化壳聚糖中的氨基与透明质酸钠-琥珀酰亚胺酯中的琥珀酰亚胺酯，摩尔比为1.25:1。


3.根据权利要求1所述的一种抗感染促愈合止血防粘连膜，其特征在于，所述N-马来酰化明胶的分子量为50-100KDa，马来酰化取代度为85-95%。


4.根据权利要求1所述的一种抗感染促愈合止血防粘连膜，其特征在于，所述聚乙烯亚胺的分子量为1800Da；所述外泌体为脂肪间充质干细胞、胎盘间充质干细胞、骨髓间充质干细胞中的一种或多种间充质干细胞分泌的外泌体；所述丙烯酸酯PEG-N羟基琥珀酰亚胺酯分子量为1-10KDa；所述钙盐为氯化钙、硫酸钙、碳酸钙中的一种或多种；所述凝血酶为固体粉末，酶活为40-300U/mg。


5.根据权利要求1所述的一种抗感染促愈合止血防粘连膜，其特征在于，所述光引发剂为2-羟基-2-甲基-1-[4-(2-羟基乙氧基)苯基]-1-丙酮。

【专利技术属性】
技术研发人员：张海军，袁坤山，张淑欣，车超越，侯文博，尹玉霞，鲁守涛，段翠海，
申请(专利权)人：山东百多安医疗器械股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37