一种卡那霉素的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种卡那霉素的检测方法，包括如下步骤：取一定量的卡那霉素适配体与待测样品混合，室温反应0.8～1.2h后加入DNA互补序列和信号探针，室温反应20～40min后得到反应液，向反应液中加入核酸外切酶III进行酶解反应，酶解反应完全后加热终止酶解反应；最后加入水溶性碳纳米颗粒得到检测液，测定检测液的荧光强度，根据测得的荧光强度和相应的标准曲线计算卡那霉素的浓度。本发明专利技术所述卡那霉素的检测方法，具有高的灵敏度和选择性，线性范围为50～100nM，检测限为2.5nM，可用于牛奶中卡那霉素的检测。

【技术实现步骤摘要】
一种卡那霉素的检测方法
本专利技术涉及抗生素检测领域，具体涉及一种卡那霉素的检测方法。
技术介绍
卡那霉素(KAN)是一种由卡那链霉菌产生的碱性氨基糖苷类抗生素，具有广谱抗菌性，是我国畜禽和水产养殖中的一种常用兽药。不合理或过量使用卡那霉素会导致其残留在动物源食品中，最终通过食物链进入人体，对人体产生不同程度的危害。因而多个地区和国家都制定了严格的最大残留量(maximumresiduelimits,MRLs)。例如欧盟，美国和日本等国家规定了该类化合物在动物组织及牛奶中的最大残留限量(0.1mg/L)，我国农业部也明确规定了在牛奶中的最大残留限量150μg/kg。因此，建立卡那霉素准确可靠的检测分析手段具有重要的现实需要。目前，有多种检测KAN的方法，比如酶联免疫法、拉曼光谱法、色谱法、电化学法等。公开号为CN111307768A的中国专利技术专利申请记载了一种快速检测样品中卡那霉素的方法：首先，向单壁碳纳米管与卡那霉素适配体的均匀混合物中加入甲醇溶液，异丙醇溶液得到碳纳米管-卡那霉素适配体复合物，再向复合物中加水或者适配体溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种卡那霉素的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：/n取卡那霉素适配体与待测样品混合，室温反应0.8～1.2h后加入DNA互补序列和信号探针，室温反应20～40min后得到反应液；向反应液中加入核酸外切酶III进行酶解反应，酶解反应完全后加热终止酶解反应，最后加入水溶性碳纳米颗粒后得到检测液，测定检测液的荧光强度，根据测得的荧光强度和相应的标准曲线计算卡那霉素的浓度。/n

【技术特征摘要】
1.一种卡那霉素的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
取卡那霉素适配体与待测样品混合，室温反应0.8～1.2h后加入DNA互补序列和信号探针，室温反应20～40min后得到反应液；向反应液中加入核酸外切酶III进行酶解反应，酶解反应完全后加热终止酶解反应，最后加入水溶性碳纳米颗粒后得到检测液，测定检测液的荧光强度，根据测得的荧光强度和相应的标准曲线计算卡那霉素的浓度。


2.根据权利要求1所述的卡那霉素的检测方法，其特征在于，所述卡那霉素适配体的序列为5’-TGGGGGTTGAGGCTAAGCCGATTTT-3’。


3.根据权利要求1所述的卡那霉素的检测方法，其特征在于，所述的DNA互补序列的序列为5’-ACGGCTTAGCCTCATTTT-3’。


4.根据权利要求1所述的卡那霉素的检测方法，其特征在于，所述的信号探针的序列为5’-FAM-AGGCTAAGCCGT-3’。


5.根据权利要求1、3或4任意一项所述的卡那霉素的检测方法，其特征在于，DNA互补序列与信号探针的投料摩尔比为1：4～6。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓华，冯婷婷，王峥，
申请(专利权)人：桂林医学院，山西中医药大学，浙江大学，
类型：发明
国别省市：广西;45