SLC7A11/YTHDC2调控轴在制备治疗肺腺癌的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及SLC7A11/YTHDC2调控轴在制备治疗肺腺癌的药物中的应用。本发明专利技术研究证实YTHDC2在肺腺癌组织和细胞中低表达，SLC7A11在肺腺癌组织中高表达；过表达YTHDC2显著抑制肺腺癌肿瘤生长；YTHDC2和SLC7A11在肺腺癌组织中的表达呈负相关关系，YTHDC2抑制SLC7A11的表达，且与细胞内胱氨酸含量呈反比，胱氨酸/谷氨酸反转运体的抑制剂能显著抑制同时低表达YTHDC2高表达SLC7A11的肺腺癌肿瘤的生长。本发明专利技术首次证实肺腺癌中“SLC7A11/YTHDC2”调控轴的存在，其是肺腺癌治疗领域的一种非常有价值的潜在药物治疗靶点，SLC7A11和YTHDC2也可作为临床上诊断肺腺癌患者的分子标志物。

【技术实现步骤摘要】
SLC7A11/YTHDC2调控轴在制备治疗肺腺癌的药物中的应用
本专利技术涉及生物医药
，具体地说，涉及SLC7A11/YTHDC2调控轴在制备治疗肺腺癌的药物中的应用。
技术介绍
肺癌主要分为非小细胞肺癌(NSCLC，约85％)和小细胞肺癌(SCLC，约15％)。NSCLC根据组织病理学类型又可分为腺癌(lungadenocarcinoma)、鳞状细胞癌、腺鳞癌、大细胞癌及肉瘤样癌等亚型。肺腺癌发病率逐年增长，已经成为NSCLC中最常见的亚型，几乎占全部肺癌的50％，且总体生存率较低。溶质载体家族成员SLC7A11为一种氨基酸转运蛋白。SLC7A11基因位于人类第4号染色体，包含14个外显子，广泛表达于脑、肝脏、巨噬细胞和视网膜色素细胞等组织和细胞中。SLC7A11基因编码SLC7A11(又称xCT)蛋白，作为轻链亚基，其与重链亚基SLC3A2(又称4F2hc)组成XC-系统，也称胱氨酸/谷氨酸反转运体。根据报道，SLC7A11在肺癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌和乳腺癌等多种癌组织或细胞系中的表达较正常组织或细胞明显升高，且与疾病的不良预后相关。YTHDC2是一种m6A结合蛋白。YTHDC2基因位于人类5号染色体上，长度为81kb，蛋白相对分子量为160kD，含1430个氨基酸序列。YTHDC2参与体内多种生物学过程。根据报道，YTHDC2在精子的发生过程中起着极其重要的作用。YTHDC2可能与自闭症相关。YTHDC2基因可能是胰腺癌的潜在易感基因。在肝癌细胞中敲除YTHDC2可以抑制细胞增殖，降低细胞活性。另外，文献(徐岩岩.YTHDC2通过p38MAPK信号通路促进结直肠癌细胞的凋亡[D].2020.)报道YTHDC2通过p38MAPK信号通路促进结直肠癌细胞的凋亡，并在其下游通过外源性死亡受体激活通路和内源性线粒体凋亡相关通路共同发挥作用，以促进结直肠癌的预后，通过外源性给予YTHDC2可能会成为结直肠癌治疗的新策略。但其结论与文献(TanabeA,TanikawaK,TsunetomiM,etal.RNAhelicaseYTHDC2promotescancermetastasisviatheenhancementoftheefficiencybywhichHIF-1alphamRNAistranslated[J].CancerLett,2016,376(1):34-42.)的研究结果相反，该文献报道通过免疫组化检测了72例人结肠癌组织中YTHDC2的表达水平，发现YTHDC2表达与肿瘤分期和转移显著正相关。目前尚未见肺腺癌中存在SLC7A11/YTHDC2调控轴的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供SLC7A11/YTHDC2调控轴在制备治疗肺腺癌的药物和肺腺癌诊断剂中的应用。本专利技术首先提供了YTHDC2基因或蛋白作为诊断标志物在制备肺腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。本专利技术还提供了YTHDC2基因或蛋白或它们的促进剂在制备治疗肺腺癌的药物中的应用。优选地，所述促进剂选自生物大分子或化合物小分子。更优选地，所述生物大分子为包含编码YTHDC2的多聚核苷酸及与之操作性相连的表达调控序列的表达载体。本专利技术还提供了SLC7A11基因或蛋白作为诊断标志物在制备肺腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。本专利技术还提供了SLC7A11基因或蛋白的抑制剂在制备治疗肺腺癌的药物中的应用。优选地，所述抑制剂选自生物大分子或化合物小分子。更有选地，所述生物大分子为以SLC7A11蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制SLC7A11蛋白表达或基因转录的小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸；或能表达或形成所述小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。本专利技术还提供了SLC7A11/YTHDC2调控轴作为靶点在制备治疗肺腺癌药物中的应用。本专利技术还提供了胱氨酸/谷氨酸反转运体的抑制剂在制备治疗同时低表达YTHDC2高表达SLC7A11个体的肺腺癌药物中的应用。本专利技术优点在于：1、本专利技术证实YTHDC2在肺腺癌组织和细胞中低表达，SLC7A11在肺腺癌组织中高表达，两者用于肺腺癌的诊断均具有较好的诊断效能。2、本专利技术还证实过表达YTHDC2能显著抑制肿瘤生长，另外，YTHDC2和SLC7A11在肺腺癌组织中的表达呈负相关关系，YTHDC2抑制SLC7A11的表达，且与细胞内胱氨酸含量呈反比，胱氨酸/谷氨酸反转运体的抑制剂能显著抑制同时低表达YTHDC2高表达SLC7A11的肺腺癌肿瘤的生长。本专利技术首次证实肺腺癌中“SLC7A11/YTHDC2”调控轴的存在，其是肺腺癌治疗领域的一种非常有价值的潜在药物治疗靶点。附图说明图1：YTHDC2在肺腺癌组织中低表达。(A-B)RT-qPCR和ELISA法检测YTHDC2mRNA和蛋白在配对肺腺癌组织中的表达情况；(C)WB检测肺腺癌细胞和肺泡上皮细胞中YTHDC2的表达情况；(D)WB法检测11对配对肺腺癌组织中YTHDC2的表达水平。注：灰度值用ImageJ软件测得。图2：YTHDC2和SLC7A11在肺腺癌组织中呈负相关关系。(A)免疫组化IHC法检测YTHDC2和SLC7A11蛋白在配对肺腺癌组织中的表达情况，且用IHCscore表示；(B)相关性分析YTHDC2和SLC7A11蛋白浓度在配对肺腺癌组织中的相关关系。图3：YTHDC2抑制SLC7A11的表达，且与细胞内胱氨酸含量呈反比。(A-B)WB和RT-qPCR法检测YTHDC2过表达后(YTHDC2WT是野生型，YTHDC2△YTH是缺少YTHdomain)SLC7A11的蛋白和mRNA表达情况；(C)相关性分析显示配对肺腺癌组织中YTHDC2蛋白和细胞内胱氨酸含量的相关关系。图4：YTHDC2和SLC7A11的ROC曲线。图5：SystemXC-抑制剂能显著抑制PDX肿瘤的生长。(A)PDXs肿瘤显示DMSO及SystemXC-抑制剂索拉非尼和Erastin衍生物处理后肿瘤的大小；(B-E)DMSO及SystemXC-抑制剂索拉非尼和Erastin衍生物处理后PDXs肿瘤的生长曲线。图6：过表达野生型和突变型YTHDC2质粒分别转染H1299建立的移植瘤模型的移植瘤大小。具体实施方式下面结合附图对本专利技术提供的具体实施方式作详细说明。实施例1一、实验方法1RT-qPCR法检测细胞和组织中YTHDC2、SLC7A11的表达量1.1抽提RNA(整个过程要在冰上操作)(1)将细胞消化离心，PBS洗一次后吸去PBS，加入1mlTrizol，吹打混匀，置于-80℃中保存。(2)从冰箱中取出Trizol总RNA混悬物室温融化后，立即向其中加入氯仿(200ul氯仿/mlTrizol)，剧烈颠倒混匀30s，至溶液呈乳糜状或颗粒状，待氯仿充分乳化(无分相现象本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.YTHDC2基因或蛋白作为诊断标志物在制备肺腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.YTHDC2基因或蛋白作为诊断标志物在制备肺腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。


2.YTHDC2基因或蛋白或它们的促进剂在制备治疗肺腺癌的药物中的应用。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述促进剂选自生物大分子或化合物小分子。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述生物大分子为包含编码YTHDC2的多聚核苷酸及与之操作性相连的表达调控序列的表达载体。


5.SLC7A11基因或蛋白作为诊断标志物在制备肺腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。


6.SLC7A11基因或蛋白的抑制剂在制备治疗肺腺癌的药物中的应用。

【专利技术属性】
技术研发人员：马丽芳，王佳谊，余科科，张骁，徐鑫，缪雅悠，田晓婷，
申请(专利权)人：上海市胸科医院，
类型：发明
国别省市：上海;31