【技术实现步骤摘要】
创制果实无绿色青肩番茄材料的方法及其应用
本专利技术涉及植物基因编辑
，具体涉及一种通过基因编辑技术创制果实无绿色青肩番茄材料的方法及应用，更具体地涉及到创制果实无绿色青肩番茄材料的靶标位点、引物、表达载体及其应用。
技术介绍
番茄作为一种重要的蔬菜作物，因其具有非常高的经济价值和营养价值，在世界各地广泛种植。中国是世界上番茄种植面积最大，产量最多的国家，年产量约5500万吨，占蔬菜总量的7％左右。在产业化、规模化种植的今天，市场对蔬菜产品的品质也提出了更高的要求，其中外观是番茄果实一项非常重要的商品性状。因此，人们更倾向于选择果实大小适中，果面光滑，着色均匀，成熟一致的品种。但是很多番茄品种果实却有绿色青肩，即果实上半部分靠近果柄区域颜色深绿，这种青肩造成番茄果实上半部分成熟进程晚于下半部分，使得整个果实不能一致、均匀地成熟，极大影响了番茄得商品性状。u突变体是一种未成熟时果实表面呈现均匀淡绿色，而能够成熟一致的材料。目前已研究发现U基因编码一个SlGLK2转录因子，与番茄果实中叶绿体的发育和叶绿素的分布相关...
【技术保护点】
1.创制果实无绿色青肩番茄材料的靶标位点，其特征在于，所述靶标位点为：target1:TGGTGTCGATTAAATTCCCA，/ntarget2:TGAATAGCAGGTTCTTCACA。/n
【技术特征摘要】
1.创制果实无绿色青肩番茄材料的靶标位点，其特征在于，所述靶标位点为：target1:TGGTGTCGATTAAATTCCCA，
target2:TGAATAGCAGGTTCTTCACA。
2.创制果实无绿色青肩番茄材料的引物，其特征在于，所述引物根据权利要求1所述的靶标位点设计。
3.根据权利要求2所述的创制果实无绿色青肩番茄材料的引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如下所示：
SlGLK2-CRISPRFw：
5’-GAATCTAACAGTGTAGTTTGTGGTGTCGATTAAATTCCCAGTTTTAGAGCTAGAAATAG-3’，
SlGLK2-CRISPRRv：
5’-GCTATTTCTAGCTCTAAAACTGAATAGCAGGTTCTTCACACAAACTACACTGTTAGATT-3’。
4.创制果实无绿色青肩番茄材料的表达载体，其特征在于，所述表达载体为含有以043中间载体为模板、权利要求2所述的引物扩增获得的双sgRNA克隆框的PTX041双元表达载体。
5.创制果实无绿色青肩番茄材料的靶标位点、引物及表达载体在番茄育种中的应用。
6.通过基因编辑技术创制果实无绿色青肩番茄材料的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1，设计并筛选SlGLK2基因的sgRNA靶位点序列；
S2，针对双元表达载体PT...
【专利技术属性】
技术研发人员：张俊红，李国斌，蔡梁玉，叶志彪，王家发，艾国，张得迪，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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