【技术实现步骤摘要】
一种接合转移增强液及其在提高细菌接合转移效率中的应用(一)
本专利技术涉及一种接合转移增强液及其在提高细菌接合转移效率中的应用。(二)
技术介绍
水平基因转移是生物进化中主要和持续的动力之一。水平基因转移又称侧向基因转移，是指生物将遗传物质传递给其他细胞而非其子代的过程。然而，这种转移并非毫无限制，而是有一定的障碍。原核生物中水平基因转移主要是通过转化、接合转移和转导3种机制来实现的。转化是指原核生物从环境中摄取裸露DNA片段的过程，不需要受体和供体细胞的物理接触，因此在自然界中转化不是主要的基因转移方式。转导是由病毒介导的细胞间进行遗传转移的一种方式，是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。转导过程中，裸露DNA不能完成转导，不同于转化或接合过程。接合转移是细菌之间通过直接或间接接触，交换DNA的过程。在自然条件下很多质粒或转座子都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内，从而赋予宿主新的表型特征。比如在自然环境中细菌获得抗生素抗性基因，一方面是由于抗生素过度使用和滥用产生的抗生素选择压力造成细菌产生抗...
【技术保护点】
1.一种接合转移增强液，其特征在于所述增强液是由二甲基亚砜与甘油和甲醇以体积比10-200:5:2混合而成。/n
【技术特征摘要】
1.一种接合转移增强液，其特征在于所述增强液是由二甲基亚砜与甘油和甲醇以体积比10-200:5:2混合而成。
2.一种权利要求1所述接合转移增强液在提高细菌接合转移效率中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述应用是：在50-60℃下，将接合转移增强液加入接合转移平板中，接种受体菌和供体菌进行接合转移。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述接合转移包括质粒或转座子的接合转移。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述接合转移增强液体积加入量以接合转移平板体积计为0.01-1.0％。
6.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述质粒接合转移为随机插入突变文库的构建，所述随机插入突变文库的构建方法为：以含庆大霉素抗性的E.coliWM3064/pBTK30菌体为供体菌，以铜绿假单胞菌PAO1菌体为受体菌，用LB培养基充分悬浮制成菌悬液；取菌悬液加入接合转移平板上，37℃培养箱中静置共培养6h，用LB培养基将接合转移后的混合菌体全部洗涤下来，将洗脱下来的菌液接种至LB+25μg/ml庆大霉素平板上，37℃培养...
【专利技术属性】
技术研发人员：李百元，尹业师，陈华海，曹林艳，胡云霏，陈丹，
申请(专利权)人：湖南科技学院，
类型：发明
国别省市：湖南;43
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。