登革病毒抗原的快速检测试纸制造技术

本发明专利技术公开了登革病毒抗原的快速检测试纸，将登革病毒DENV1和DENV3的NS1重组蛋白分别免疫小鼠，采取捕获法交叉筛选的方式获得分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，将登革病毒NS1单克隆抗体用于制备登革病毒抗原的快速检测试纸，该试纸可以检测出四种不同血清型的登革热病毒。

【技术实现步骤摘要】
登革病毒抗原的快速检测试纸
本专利技术属于生物
，具体涉及登革病毒NS1单克隆抗体及其制备方法，以及基于该抗体的检测试纸。
技术介绍
登革热是一种急性虫媒传染病，由登革热病毒经由蚊虫叮咬传播给人，可引起登革热和重症登革热，主要通过埃及伊蚊和白纹伊蚊传播。其典型的临床表现为起病急骤，高热，头痛，肌肉、骨关节剧烈酸痛，部分患者出现皮疹、出血倾向、淋巴结肿大、白细胞计数减少、血小板减少等。该病主要在热带及亚热带地区流行，我国的广东、香港、澳门等地是登革热流行区，一般在每年的5～11月份，高峰在7～9月份流行。根据其包膜蛋白的抗原特异性差异，将登革病毒分为四种血清型(DENV1～DENV4)。登革NS1蛋白是登革病毒的一种重要的非结构蛋白，对登革病毒的测序结果显示，NS1在登革病毒各型别间具有高度保守性，其氨基酸同源型为70％。因此利用该蛋白制备的同一株单克隆抗体可以检测出不同血清型的登革病毒。目前检测试剂的一个问题在于快速诊断试剂的局限性，有一些临床样本的病毒含量极低，低于快诊试纸的检测限，无法检出；另一个问题在于有些试剂不能测出全部四本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.登革病毒NS1单克隆抗体，其特征在于，由下述方法制备而成：/n(1)将登革病毒DENV1和DENV3的NS1重组蛋白分别免疫小鼠；/n(2)取其脾脏细胞，并分别与SP2/0骨髓瘤细胞融合后制备杂交瘤细胞，DENV1型NS1蛋白免疫的融合细胞采用DENV2和DENV3型的NS1重组蛋白进行筛选，DENV3型NS1蛋白免疫的融合细胞采用DENV1和DENV4型NS1重组蛋白进行筛选，获得2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别标记为1号、2号抗体；/n(3)将筛选出的杂交瘤细胞分别注射至石蜡油致敏的小鼠腹腔中，取小鼠腹水，腹水抗体经纯化后即为登革病毒NS1单克隆抗体。/n

【技术特征摘要】
1.登革病毒NS1单克隆抗体，其特征在于，由下述方法制备而成：
(1)将登革病毒DENV1和DENV3的NS1重组蛋白分别免疫小鼠；
(2)取其脾脏细胞，并分别与SP2/0骨髓瘤细胞融合后制备杂交瘤细胞，DENV1型NS1蛋白免疫的融合细胞采用DENV2和DENV3型的NS1重组蛋白进行筛选，DENV3型NS1蛋白免疫的融合细胞采用DENV1和DENV4型NS1重组蛋白进行筛选，获得2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别标记为1号、2号抗体；
(3)将筛选出的杂交瘤细胞分别注射至石蜡油致敏的小鼠腹腔中，取小鼠腹水，腹水抗体经纯化后即为登革病毒NS1单克隆抗体。

【专利技术属性】
技术研发人员：严兵，
申请(专利权)人：武汉科源安博生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42