一种人促卵泡激素及其体外重组装方法技术

本发明专利技术公开了一种人促卵泡激素及其体外重组装方法，属于生物医药与基因工程技术领域。本发明专利技术提供的人促卵泡激素是将FSHα和FSHβ亚基基因分别在动物乳汁中表达后，在体外重组装获得，具有与Gonal‑F等同的生物学功能。制备方法包括构建人FSHα和FSHβ基因表达载体，将人FSHα和FSHβ亚基的表达在动物乳汁中，进行体外重组装获得具备生物学活性的人促卵泡激素，本发明专利技术可以避免有生物活性的内源FSH在动物体内的积聚，从而降低由于大量生物活性FSH的积累导致的动物患肿瘤的风险。

【技术实现步骤摘要】
一种人促卵泡激素及其体外重组装方法
本专利技术涉及生物医药与基因工程
，特别是涉及一种人促卵泡激素及其体外重组装方法。
技术介绍
人促卵泡生长激素(hFSH)是由下丘脑控制的垂体前叶嗜碱性细胞合成和分泌的糖蛋白类促性腺激素，它是一种由FSHα亚基与FSHβ亚基通过非共价键结合形成的异源二聚体糖蛋白。其中FSHα亚基基因编码了92个氨基酸，包含10个半胱氨酸，形成5个二硫键；FSHβ亚基基因编码了111个氨基酸，其中包含12个半胱氨酸，形成6个二硫键。人促卵泡生长激素在女性体内的主要功能是促进子宫内膜的生长、卵泡的发育和排卵等，hFSH在临床上主要用于治疗女性不孕不育。随着人类生活环境的日益恶化，hFSH的需求量越来越大。市面上主要有两种人促卵泡生长激素产品，一种是尿源的人促卵泡生长激素，另外一种是国外进口的基因工程重组人促卵泡生长激素(人促卵泡激素)蛋白，其中在国内市场的临床应用上进口重组人促卵泡生长激素占据主要市场。进口的重组促卵泡生长激素目前主要是利用基因工程技术和细胞培养工艺来制备重组促卵泡激素生物制品，如瑞士Serono公本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人促卵泡激素，其特征在于，所述人促卵泡激素是FSHα和FSHβ亚基基因分别在动物乳汁中表达后，在体外重组装获得。/n

【技术特征摘要】
1.一种人促卵泡激素，其特征在于，所述人促卵泡激素是FSHα和FSHβ亚基基因分别在动物乳汁中表达后，在体外重组装获得。


2.根据权利要求1所述的一种人促卵泡激素，其特征在于，FSHα、FSHβ亚基基因分别在动物乳汁中表达是将Ad-FSHα、Ad-FSHβ腺病毒分别注入到非同一动物的乳腺内进行表达。


3.根据权利要求2所述的一种人促卵泡激素，其特征在于，所述Ad-FSHα、Ad-FSHβ腺病毒是将FSHα基因表达载体和FSHβ基因表达载体分别转染腺病毒包装细胞获得。


4.根据权利要求3所述的一种人促卵泡激素，其特征在于，所述FSHα基因表达载体和FSHβ基因表达载体是将FSHα亚基基因和FSHβ亚基基因分别克隆到pAdTrack-CMV中构建pAdTrack-CMV-FSHα和pAdTrack-CMV-FSHβ腺病毒穿梭载体，将pAdTrack-CMV-FSHα和pAdTrack-CMV-FSHβ穿梭载体分别与骨架载体pAdEasy-1转化到非同一大肠杆菌体内重组获得。


5.一种体外重组装制备人促卵泡激素的方法，其特征在于，FSHα亚基与FSHβ亚基蛋白在体外重新组装，得到重组人促卵泡激素，包括以下步骤：
(1)构建人FSHα和FSHβ基因表达载体
以pAdTrack-CMV为穿梭载体，将人FSHα、FSHβ亚基基因分别克隆到pAdTrack-CMV中构建pAdTrack-CMV-FSHα和pAdTrack-CMV-FSHβ腺病毒穿梭载体，将pAdTrack-CMV-FSHα和pAdTrack-CMV-FSHβ穿梭载体分别与骨架载体pAdEasy-1转化到...

【专利技术属性】
技术研发人员：李青旺，华荣茂，刘建喜，胡建宏，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61