本发明专利技术公开了花葵素‑3‑O‑芸香糖苷在制备抗粘质沙雷氏菌感染的药物中的应用。本发明专利技术首次发现花葵素‑3‑O‑芸香糖苷具有抑制粘质沙雷氏菌感染的作用，并且在有效剂量下不抑制粘质沙雷氏菌生长；本发明专利技术首次发现花葵素‑3‑O‑芸香糖苷与环丙沙星联合用药能有效抑制粘质沙雷氏菌生物被膜的形成，预示着其具有较好的预防和治疗粘质沙雷氏菌感染的临床应用前景。
【技术实现步骤摘要】
花葵素-3-O-芸香糖苷在制备抗粘质沙雷氏菌感染的药物中的应用
本专利技术属于医药技术，特别涉及花葵素-3-O-芸香糖苷在制备抗粘质沙雷氏菌感染的药物中的应用。
技术介绍
抗生素的过度使用导致许多致病菌产生耐药性。抗生素的广泛使用给细菌带来了选择性压力，为了抵御抗生素所带来的选择性压力，细菌逐渐形成了对抗抗生素的防御系统，即在细胞外面形成一层生物被膜(Biofilm)。生物被膜将细胞包裹在里面，构成了一道天然屏障，能够将大多数抗生素阻挡在细胞外，使得抗生素很难透过细胞膜进入细胞内部，从而增强了细菌对抗生素的抗性。因此，转变给药策略，发现新的作用靶点，研发能够降低细菌毒力，而不对细菌产生选择性压力的药物，是应对细菌耐药的重要策略。群体感应(Quorumsensing，QS)是指细菌在生长过程中，能够释放信号分子，随着细菌密度的增加，其释放的信号分子的浓度也逐渐增加，当信号分子的浓度达到一定的阈值时，信号分子能与受体蛋白结合，从而激活毒力等相关基因的表达，从而调控细菌群体的生理活动。研究发现，细菌许多毒力因子的分泌、生物被膜的形成、对宿主细胞的侵染、对抗生素的抵抗等均受到QS系统的调控。抑制细菌的QS能够很好地抑制细菌的毒力，且不会对细菌带来选择性压力。因此，QS有望成为抗感染药物研发的重要靶标。粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)是一种革兰氏阴性菌，广泛存在于土壤、水体、动物、植物和人体皮肤上，是导致临床病人感染的常见病原菌。粘质沙雷氏菌主要分泌C4-HSL和C6-HSL两种信号分子。信号分子与受体蛋白结合后能够调控蛋白酶(Protease)、脂肪酶(Lipase)、灵菌红素(Prodigiosin)、溶血素(Hemolysin)、胞外多糖(EPS)、Swarming等毒力因子的分泌。此外，粘质沙雷氏菌生物被膜的形成也受QS系统的调控。因此，抑制粘质沙雷氏菌的QS系统，能够降低粘质沙雷氏菌的毒力，降低其耐药性的产生。抗生素的广泛使用使得细菌产生耐药性，临床上只能加大抗生素的使用量来治疗耐性菌感染。而抗生素的过度使用又进一步加剧了细菌多重耐药，甚至泛耐药。因此，寻求新的抗生素替代方案，或者开发新型药物，以抑制细菌毒力为目的，而不对细菌产生选择性压力，这样就避免了细菌耐药性的产生。再将这种药物与传统抗生素联合用药，以达到增强抗生素药敏性的效果。花葵素-3-O-芸香糖苷(CAS登记号：33978-17-5)广泛存在于天竺葵、草莓、葡萄等含花色素较多的植物体内，其结构如下：花葵素-3-O-芸香糖苷具有抗氧化、抗肿瘤等多种功效。但至今尚未见有关花葵素-3-O-芸香糖苷抗感染的研究报道。
技术实现思路
专利技术目的：针对上述现有技术，本专利技术提供了花葵素-3-O-芸香糖苷在制备抗粘质沙雷氏菌感染的药物中的应用。技术方案：本专利技术公开了花葵素-3-O-芸香糖苷在制备改善或治疗粘质沙雷氏菌感染的药物中的应用。进一步的，所述花葵素-3-O-芸香糖苷通过抑制并破坏粘质沙雷氏菌生物被膜形成而达到抗感染目的。更进一步的，所述花葵素-3-O-芸香糖苷通过抑制粘质沙雷氏菌群体感应从而抑制生物被膜形成。更进一步的，所述花葵素-3-O-芸香糖苷能够抑制群体感应调控的信号分子的合成，能够抑制群体感应调控的毒力因子的合成，能够抑制群体感应相关基因的表达。本专利技术还公开了花葵素-3-O-芸香糖苷联合环丙沙星用于制备改善或者治疗粘质沙雷氏菌感染的药物中的应用。其中，所述花葵素-3-O-芸香糖苷与环丙沙星联合用药能显著增强对粘质沙雷氏菌生物被膜的破坏作用。有益效果：(1)本专利技术首次发现花葵素-3-O-芸香糖苷具有抑制粘质沙雷氏菌感染的作用，并且在有效剂量下不抑制粘质沙雷氏菌生长；(2)本专利技术首次发现花葵素-3-O-芸香糖苷与环丙沙星联合用药能有效抑制粘质沙雷氏菌生物被膜的形成，预示着其具有较好的预防和治疗粘质沙雷氏菌感染的临床应用前景。附图说明图1是花葵素-3-O-芸香糖苷对群体感应调控的信号分子合成的影响；图2是花葵素-3-O-芸香糖苷对群体感应调控的毒力因子表达的影响；图3是花葵素-3-O-芸香糖苷抑制群体感应相关基因的表达；图4是花葵素-3-O-芸香糖苷联合环丙沙星抑制和破坏粘质沙雷氏菌生物被膜。具体实施方式下面结合具体实施例对本申请作出详细说明。实施例1对群体感应调控的信号分子合成的影响：药物：花葵素-3-O-芸香糖苷是从植物天竺葵的花中分离提取获得，本领域技术人员采用的花葵素-3-O-芸香糖苷可直接购买于上海源叶生物有限公司。菌株：粘质沙雷氏菌NJ01购买自中国医学微生物菌种保藏中心(CMCC，41002)。挑取粘质沙雷氏菌NJ01单菌落到LB培养基中，28℃、180rpm培养17h。取培养好的菌液100uL接种到100mL新鲜的LB培养基中，同时加入终浓度为50和100μg/mL的花葵素-3-O-芸香糖苷，以DMSO为对照，28℃、180rpm培养24h。培养液于4℃、10000rpm离心10min。上清液加入等体积酸化的乙酸乙酯萃取3遍，合并有机相，35℃减压蒸干。萃取物用甲醇溶解，过0.22μm有机滤膜，采用HPLC-MS/MS测定信号分子的含量。试验结果如图1所示，其中A为DMSO处理后C4-HSL的液相图谱，B为50μg/mL的花葵素-3-O-芸香糖苷处理后C4-HSL的液相图谱，C为100μg/mL的花葵素-3-O-芸香糖苷处理后C4-HSL的液相图谱，D为DMSO处理后C6-HSL的液相图谱，E为50μg/mL的花葵素-3-O-芸香糖苷处理后C6-HSL的液相图谱，F为100μg/mL的花葵素-3-O-芸香糖苷处理后C6-HSL的液相图谱，G为C4-HSL的MS图谱，H为C4-HSL的MS/MS图谱，I为C6-HSL的MS图谱，J为C6-HSL的MS/MS图谱，K和L分别为50和100μg/mL的花葵素-3-O-芸香糖苷处理后C4-HSL和C6-HSL的相对含量。***，p<0.001,vscontrol(SPSS18.0)。由此可见，花葵素-3-O-芸香糖苷明显抑制群体感应调控的信号分子的合成，花葵素-3-O-芸香糖苷具有良好的群体感应抑制活性，能很好的抑制粘质沙雷氏菌信号分子的合成，有效量为50-100μg/mL。实施例2对群体感应调控的毒力因子表达的抑制作用：挑取粘质沙雷氏菌NJ01单菌落接种到LB培养基中，28℃、180rpm培养17h。取培养好的菌液30uL接种到30mL新鲜的LB培养基中，同时加入终浓度为50和100μg/mL的花葵素-3-O-芸香糖苷，以DMSO为阴性对照，以100μg/mL的香草酸(Vanillicacid,Van)为阳性对照。28℃、180rpm培养24h。培养液于4℃、10000rpm离心10min。蛋白酶活性测定：取100mg偶氮酪蛋白溶于5m本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.花葵素-3-O-芸香糖苷在制备抗粘质沙雷氏菌感染的药物中的应用。/n
【技术特征摘要】
1.花葵素-3-O-芸香糖苷在制备抗粘质沙雷氏菌感染的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述花葵素-3-O-芸香糖苷抑制并破坏粘质沙雷氏菌生物被膜形成。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述花葵素-3-O-芸香糖苷通过抑制粘质沙雷氏菌群体感应从而抑制生物被膜形成。
4.根据权利要求3所述的应用，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：周金伟，刘恩岐，
申请(专利权)人：徐州工程学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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