一种用于mRT-PCR检测半夏侵染病毒的体系及其应用制造技术

本发明专利技术是利用mRT‑PCR(多重反转录聚合酶链式反应)技术对侵染半夏的CMV(黄瓜花叶病毒)、SMV(大豆花叶病毒)、DsMV(芋花叶病毒)进行检测。通过提取半夏植株mRNA，反转录得到cDNA，利用设计的特异引物进行PCR扩增，使用琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物，根据照胶仪显示条带鉴定侵染病毒种类。本方法技术成熟、方便快捷、特异性高、准确性好、用价低廉，一次性检测侵染半夏的多种病毒，为半夏病毒病防治及良种选育提供重要技术支持。

【技术实现步骤摘要】
一种用于mRT-PCR检测半夏侵染病毒的体系及其应用
本专利技术涉及植物病毒检测领域，具体而言，涉及一种用于鉴定半夏侵染病毒的的引物对组、试剂盒、方法及应用。
技术介绍
半夏(Pinelliaternata(Thunb.)Breit.)为天南星科半夏属植物，始载于《神农本草经》，列为下品，其球形块茎经炮制后可入药，产品可分为生半夏、清半夏、姜半夏、法半夏。根据用药历史考证，在558种中药处方中，半夏使用频率为第22位，具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结等功效，在中医临床上是治疗湿痰咳嗽的要药，半夏泻心汤对于胃肠功能的恢复可发挥重要的作用，具有临床推广价值。尤其，自仲景始，至当代诸多名家如朱良春、李可等均以生半夏抗肿瘤，现代毒性研究及药理研究均证明其抗肿瘤作用机制确切，可作用于多系统脏器肿瘤；临床应用中取得了较好的临床疗效。并且，半夏的需求量随着中国中医药的发展日益增加，随之而来的是人工种植面积的不断扩大，但由于栽培技术不当，野生种质资源难以供应，长期使用块茎和珠芽进行无性繁殖，导致生产上半夏病毒病危害十分严重，重者可致减产60％以上，并且病毒一旦本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于mRT-PCR检测半夏侵染病毒的引物对组，所述引物对组选自SEQ ID NO:1-14中的一组或多组。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于mRT-PCR检测半夏侵染病毒的引物对组，所述引物对组选自SEQIDNO:1-14中的一组或多组。


2.根据权利要求1所述的引物组，其中所述的引物组具体为





3.权利要求1或2所述的mRT-PCR引物组在检测半夏病毒中的应用。


4.一种用于mRT-PCR检测半夏病毒的试剂盒，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的引物对组，所含物质及程序如下：



反应程序：94℃预变性5min；94℃变性30s，52.9℃退火30s，72℃延伸70s，31个循环；72℃延伸10min，4℃终止反应。


5.权利要求4所述的一种用于mRT-PCR检测半夏病毒的试剂盒在鉴...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛淑俊，孟义江，杨太新，温春秀，刘灵娣，李锦超，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：河北;13