一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂及其制备方法与应用，其特征在于，所述制剂由胎盘组织和脐带组织中的间充质干细胞中分离提取得到，包括高活性多肽分子、复合细胞生长因子、细胞活化因子以及外泌体。本发明专利技术中间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂的原材料由胎盘和脐带中的间充质干细胞分离提取得到，无动物来源的成分，不含有害化学成分、基因重组的生长因子、生长激素和重金属等；该制剂用于组织再生皮肤可以促进皮肤功能性皮肤再生，加速创伤组织的愈合。

【技术实现步骤摘要】
一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂及其制备方法与应用
本专利技术涉及生物制剂
，尤其涉及一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂及其制备方法与应用。
技术介绍
在意外事故或手术治疗后，身体会出现不同程度的皮肤损伤。由于皮肤是维持机体内环境和阻止细菌入侵的屏障，皮肤受损后造成一个开放性创面，使其抵御外来微生物侵袭的屏障作用丧失，极易引起局部与全身感染，加重病情甚至危及生命。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂及其制备方法，该制剂用于组织再生皮肤可以促进皮肤功能性皮肤再生，加速创伤组织的愈合。本申请提供了一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂，该制剂由胎盘组织和脐带组织中的间充质干细胞中分离提取得到，包括高活性多肽分子、复合细胞生长因子、细胞活化因子以及外泌体。进一步地，所述高活性多肽分子的总含量为1pg/ml-500ug/ml，所述复合细胞生长因子的总含量为70ng/ml-600ng/ml，所述细胞活化因子的总含量为3pg/ml-1700ug/ml，所述外泌体的总含量为25-530ng/ml。进一步地，所述复合细胞生长因子中主要包括胰岛素样生长因子IGF、血管内皮生长因子VEGF、表皮生长因子EGF、神经生长因子NGF、肝细胞生长因子HGF、胎盘生长因子PLGF、角化细胞生长因子KGF、白细胞分化抗原CD200及其受体CD200R。进一步地，所述复合细胞生长因子中主要组分的含量具体如下：胰岛素样生长因子IGF含量50-230ng/ml、血管内皮生长因子VEGF含量30-260pg/ml、表皮生长因子EGF含量20-250pg/ml，神经生长因子NGF含量20-350ng/ml、细胞生长因子HGF含量50-1000pg/ml、胎盘生长因子PLGF含量10-200pg/ml、角化细胞生长因子含量KGF10-300pg/ml、白细胞分化抗原CD200及其受体CD200R含量0.5-1.9ng/ml。进一步地，所述外泌体主要组分包括CD9、CD63、CD81、PLAP，主要组分的含量具体如下：CD9含量1-30ng/ml、CD63含量10-100pg/ml、CD81含量25-500ng/ml、PLAP含量500-1800ng/L。进一步地，所述细胞活化因子为主要组分包括κ-B受体活化因子T细胞核因子。进一步地，所述高活性多肽分子的分子量为500-2500道尔顿。进一步地，所述胎盘组织和脐带组织中的干细胞选自脐带血干细胞、脐带华氏胶干细胞、羊膜干细胞和胎盘干细胞中的一种或几种。进一步地，本专利技术还提供了一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂的制备方法，该制剂由以下方法分离提取：S1、将胎盘组织和脐带组织中的间充质干细胞进行组织分离工程；S2、将分离出的干细胞进行培养，然后进行细胞破碎工程；S3、将破碎的细胞进行过筛和分子筛精制，得到所需高活性多肽分子、复合细胞生长因子、细胞活化因子和外泌体，配置成所述间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂。上述任一项实施例所述的间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂在促进皮肤再生中的应用。上述技术方案中的一个技术方案具有如下有益效果：本专利技术提供了一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂及其制备方法与应用，其特征在于，所述制剂由胎盘组织和脐带组织中的间充质干细胞中分离提取得到，包括高活性多肽分子、复合细胞生长因子、细胞活化因子以及外泌体。本专利技术中间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂的原材料由胎盘和脐带中的干细胞分离提取得到，无动物来源的成分，不含有有害化学成分、基因重组的生长因子、生长激素和重金属等；该制剂用于组织再生皮肤可以促进皮肤功能性皮肤再生，加速创伤组织的愈合。【附图说明】为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。图1为大鼠伤口的变化图片；图2为大鼠伤口面积随时间变化表；图3为第1天的培养基表面图；图4为第3天的培养基表面图。【具体实施方式】为了更好的理解本专利技术的技术方案，下面对本专利技术实施例进行详细描述。应当明确，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。在本专利技术实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本专利技术。在本专利技术实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。应当理解，本文中使用的术语“和/或”仅仅是一种描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，A和/或B，可以表示：单独存在A，同时存在A和B，单独存在B这三种情况。另外，本文中字符“/”，一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。实施例1胎盘干细胞的分离取新鲜胎盘组织进行无菌和病毒检测，然后将胎盘组织上羊膜、绒毛膜等剥离，胎盘组织分离后，切割为边长为0.1cm左右的小块，加入与糊状组织体积相等的复方氯化钠溶液等，然后进行细胞破碎机工程。其中，复方氯化钠溶液包括以下一种或几种灭菌溶液：1、500ml水内含氯化钠0.85％、氯化钾0.03％、氯化钙0.033％；2、9克医用氯化钠加水稀释至1000ml；3、每1000ml升水中含有130毫当量钠离子、109毫当量氯离子、4毫当量钾离子、3毫当量钙离子；4、每1000ml升水中含亮氨酸4.1g、异亮氨酸1.8g、苯丙氨酸2.9g、苏氨酸1.8g、缬氨酸2.0g、色氨酸0.6g、甲硫氨酸2.4g、甘氨酸3.4g、赖氨酸5.0g、精氨酸2.2g、组氨酸1.0g、60.0g右旋糖酐40；5、500ml羟乙基淀粉40氯化钠注射液，30g羟乙基淀粉40与4.5g氯化钠。脐带血干细胞的分离培养(1)脐带血全血细胞分离和血浆进行预处理；(2)细胞培养皿包被抗CD34抗体和抗CD44抗体；(3)向细胞培养皿中加入步骤(1)预处理后的脐带血全血细胞，分离培养有核细胞。羊膜和脐带华氏胶干细胞的分离培养将羊膜组织和华氏胶组织分别进行切割为边长为小于1cm左右的小块，进行细胞培养和继代，收集P3-P5代细胞，加入与细胞体积相等的复方氯化钠溶液等进行细胞破碎机工程，然后研磨细胞，过筛，细胞筛为100um，过滤液分离提取检测，得到复合细胞生长因子及其他有效成分。将获得的细胞因子、多肽分子、细胞因子及外泌体混合物采用无菌复方氯化钠溶液等，配置成间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂，间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂，其特征在于，所述制剂由胎盘组织和脐带组织中的间充质干细胞中分离提取得到，包括高活性多肽分子、复合细胞生长因子、细胞活化因子以及外泌体。/n

【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂，其特征在于，所述制剂由胎盘组织和脐带组织中的间充质干细胞中分离提取得到，包括高活性多肽分子、复合细胞生长因子、细胞活化因子以及外泌体。


2.根据权利要求1所述的间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂，其特征在于，所述高活性多肽分子的总含量为1pg/ml-500ug/ml，所述复合细胞生长因子的总含量为70ng/ml-600ng/ml，所述细胞活化因子的总含量为3pg/ml-1700ug/ml，所述外泌体的总含量为25-530ng/ml。


3.根据权利要求1所述的间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂，其特征在于，所述复合细胞生长因子中主要包括胰岛素样生长因子IGF、血管内皮生长因子VEGF、表皮生长因子EGF、神经生长因子NGF、肝细胞生长因子HGF、胎盘生长因子PLGF、角化细胞生长因子KGF、白细胞分化抗原CD200及其受体CD200R。


4.根据权利要求3所述的间充质干细胞来源的细胞生长因子制剂，所述复合细胞生长因子中主要组分的含量具体如下：
胰岛素样生长因子IGF含量50-230ng/ml、血管内皮生长因子VEGF含量30-260pg/ml、表皮生长因子EGF含量20-250pg/ml，神经生长因子NGF含量20-350ng/ml、细胞生长因子HGF含量50-1000pg/ml、胎盘生长因子PLGF含量10-200pg/ml、角化细胞生长因子含量KGF10-300pg/ml、白细胞分化抗原CD200及其受体CD200R含量0.5-1....

【专利技术属性】
技术研发人员：程锦雁，贾婷婷，郭鸽，聂霄，张鹏，
申请(专利权)人：沃森克里克北京生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11