瞬时识别药物诱导HK-2细胞损伤的阵列传感器的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种瞬时识别药物诱导HK‑2细胞损伤的阵列传感器的制备方法及其应用，其制备方法包括：将盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺加入缓冲液中，混匀搅拌，过滤透析得到猝灭效应优良的聚多巴胺‑聚乙烯亚胺共聚物载体；其可通过静电作用吸附三种不同发射波长的QDs并猝灭其荧光，形成多通道传感器。不同肾毒性药物作用于细胞，细胞膜表面物质改变，诱导传感器QDs游离，形成特征荧光指纹图谱，借助多元统计方法，快速识别药物损伤机制。基于药物损伤的时‑效关系，检测不同时间的荧光信号，绘制动态荧光指纹，进一步实现药物诱导肾细胞损伤的精准分型。该传感器为快速探究药物的肾毒性机制提供一种新工具和新方法。

【技术实现步骤摘要】
瞬时识别药物诱导HK-2细胞损伤的阵列传感器的制备方法及其应用
本专利技术属于生物传感领域，涉及瞬时识别药物诱导HK-2细胞损伤的阵列传感器的制备方法及其应用，具体是涉及一种基于荧光指纹图谱瞬时识别不同药物诱导HK-2细胞损伤的多通道传感器的制备方法及其应用。
技术介绍
药源性肾损伤是指药物引起的肾脏结构或功能异常，主要表现为急性肾小管坏死，急性间质性肾炎和渗透性肾病。许多药物经肾脏代谢或排泄，容易蓄积在肾脏进而损伤肾小球，肾小管或肾基底膜。此外，部分药物能够引起短时间内双侧肾脏滤过功能急剧下降，使体内毒物蓄积，严重可能导致急性肾功能衰竭。研究表明，肾毒性药物导致19％-25％的重症患者中出现急性肾功能衰竭，很有可能导致慢性肾病或终末期肾病。不同肾毒性药物导致的肾损伤作用机制复杂，如氨基糖苷类药物可以通过损伤线粒体和溶酶体功能，干扰肾小管运输，造成肾小管细胞毒性反应，进而导致肾小管上皮细胞坏死；磺胺类抗生素本身或代谢产物易在肾内组织中形成结晶，沉积于远端肾小管管腔内，阻塞尿流，激发间质反应，引起起阻塞性肾病；免疫抑制剂类药物通过影响肾脏本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.瞬时识别药物诱导HK-2细胞损伤的阵列传感器的制备方法，其特征在于，其具体操作步骤如下：/n步骤(1.1)、PDA-PEI共聚物载体的制备：将盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺加入到Tris-HCl缓冲液中，在室温10-30℃下避光搅拌2-8h后过滤，置于透析袋透析24-36h；除去未反应的盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺，从而得到PDA-PEI共聚物载体；/n步骤(1.2)、传感器的构建：将PDA-PEI共聚物载体与三种不同发射波长的QD(MPA@CdSe/ZnS)，QD(PEG-COOH@CdSe/ZnS)和QD(Cys@CdSe/ZnS)充分混合得到PDA-PEI/QDs传感器，所述的PDA-PEI/QD...

【技术特征摘要】
1.瞬时识别药物诱导HK-2细胞损伤的阵列传感器的制备方法，其特征在于，其具体操作步骤如下：
步骤(1.1)、PDA-PEI共聚物载体的制备：将盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺加入到Tris-HCl缓冲液中，在室温10-30℃下避光搅拌2-8h后过滤，置于透析袋透析24-36h；除去未反应的盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺，从而得到PDA-PEI共聚物载体；
步骤(1.2)、传感器的构建：将PDA-PEI共聚物载体与三种不同发射波长的QD(MPA@CdSe/ZnS)，QD(PEG-COOH@CdSe/ZnS)和QD(Cys@CdSe/ZnS)充分混合得到PDA-PEI/QDs传感器，所述的PDA-PEI/QDs传感器即为识别药物诱导的HK-2细胞损伤的多通道传感器。


2.根据权利要求1所述的瞬时识别药物诱导HK-2细胞损伤的阵列传感器的制备方法，其特征在于，在步骤(1.1)中，所述盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺的质量比为1:1-1:10。


3.根据权利要求1所述的瞬时识别药物诱导HK-2细胞损伤的阵列传感器的制备方法，其特征在于，在步骤(1.1)中，所述聚乙烯亚胺的重均分子量为600Da-10000Da。


4.根据权利要求1所述的瞬时识别药物诱导HK-2细胞损伤的阵列传感器的制备方法，其特征在于，在步骤(1.2)中，所述三种不同发射波长的QDs与PDA-PEI的终浓度比均为1:4-1:2，三个QDs激发波长均为230nm，其发射波长分别为515nm，580nm及640...

【专利技术属性】
技术研发人员：余伯阳，田蒋为，白雪斐，喻谢安，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32