一种快速诊断蜜蜂丝状病毒试纸及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种蜜蜂丝状病毒抗体胶体金快速检测试剂条，包括支撑层，以及在所述支撑层上依次设置的加样垫、金标抗体释放垫、检测层和吸收层，所述金标抗体释放垫包埋有胶体金标记的抗蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白的鼠源多克隆抗体；所述检测层上设置有检测带和质控带，所述检测带固定有抗蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白的兔源多克隆抗体，所述质控带固定有蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白抗原。本发明专利技术的试纸条特异性强，极大的降低了出现假阳性的概率，保证了试纸条特异性和灵敏度；安全性高，避免检测过程中复杂的病毒处理操作；操作简便快捷，本发明专利技术不需要专业的技术人员进行操作和专业仪器的辅助检测，检测结果直观易判定并且检测时间只需20min极为迅速。

A rapid diagnostic test paper for bee filovirus and its application

【技术实现步骤摘要】
一种快速诊断蜜蜂丝状病毒试纸及其应用
本专利技术属于兽医生物
，涉及胶体金以及金标抗体复合物，尤其涉及蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白抗体的检测试纸条，同时还涉及该试纸条的制备方法以及应用。
技术介绍
蜜蜂丝状病毒（Apismelliferafilamentousvirus，AmFV），最初被误认为是蜜蜂立克次氏体病，随着后来进一步的研究发现它是一个大的囊膜双链DNA(dsDNA)病毒。其丝状核蛋白折叠成三个重叠的“8”环状，形成一个450nm×170nm的病毒粒子。由于蜜蜂丝状病毒（AmFV）具有基因组大、隐性感染、流行广泛等特点，近年来逐渐受到各国科学家的关注。但该病毒的研究进展缓慢，2015年才完成第一株（瑞士株）基因组的测序工作。病毒蛋白主要包括核衣壳蛋白和囊膜蛋白。AmFV感染的一个主要诊断特征是，严重感染的成年蜜蜂的血淋巴由于细胞降解和大量病毒粒子的存在而变成奶白色。AmFV已在美国、英国、瑞士、法国、墨西哥、叙利亚、非洲、中国等地区的意大利蜜蜂及中国地区的中华蜜蜂中被报道，并都具有较高的流行率。另有报道称蜜蜂丝状病毒在中国意大利本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蜜蜂丝状病毒抗体胶体金快速检测试纸条，包括支撑层，以及在所述支撑层上依次设置的加样垫、金标抗体释放垫、检测层和吸收层，其特征在于，所述金标抗体释放垫包埋有胶体金标记的抗蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白的鼠源多克隆抗体；所述检测层上设置有检测带和质控带，所述检测带固定有抗蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白的兔源多克隆抗体，所述质控带固定有蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白；其中，蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白的序列如序列表中序列2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种蜜蜂丝状病毒抗体胶体金快速检测试纸条，包括支撑层，以及在所述支撑层上依次设置的加样垫、金标抗体释放垫、检测层和吸收层，其特征在于，所述金标抗体释放垫包埋有胶体金标记的抗蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白的鼠源多克隆抗体；所述检测层上设置有检测带和质控带，所述检测带固定有抗蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白的兔源多克隆抗体，所述质控带固定有蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白；其中，蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白的序列如序列表中序列2所示。


2.如权利要求1所述的检测试纸条，其特征在于，所述蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白是将序列表中序列1所示的核苷酸片段插入到表达载体中表达后纯化得到所述蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白；所述表达载体为PET-28a载体。


3.如权利要求1所述的检测试纸条，其特征在于，所述的支撑层为聚氯乙烯板；所述的加样垫为中速定性滤纸；所述的金标抗体释放垫为玻璃纤维素膜。


4.如权利要求1所述的检测试纸条，其特征在于，所述的检测层为硝酸纤维素膜。


5.如权利要求1所述的检测试纸条，其特征在于，所述的吸收层为玻璃纤维。


6.一种制备权利要求l-5任一项所述检测试纸条的方法，其包括如下步骤：
1）在检测层的不同位置上分别固定抗蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白的兔源多克隆抗体以及蜜蜂丝状病毒囊膜蛋白，形成检测带和质控带；
2）制备金标抗体释放垫；
3）组装支撑层、加样垫、金标抗体释放垫、检测层和吸收层。


7.如权...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯春生，邓炎春，杨大贺，杨卅，
申请(专利权)人：中国农业科学院蜜蜂研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11